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小肠是仔猪营养物质消化和吸收的主要部位，其消化酶活性与仔猪的健康生长密切相关。研究报道，碳水化合物水解后的单糖可通过肠壁上皮细胞的转运载体吸收，而其他二糖类水解产物不能被肠壁直接吸收，但可由肠黏膜二糖酶水解成单糖后被吸收利用。所以，小肠黏膜二糖酶在碳水化合物的最终消化起至关重要的作用。本研究采用等能值、碳水化合物与脂肪能值比（CEV/FEV）不同的日粮饲喂仔猪，研究日粮能源结构的变化对仔猪小肠黏膜二糖酶活性及基因表达的影响，为日粮能源结构的有效应用及仔猪日粮配制提供理论参考。
1材料与方法1.1 试验动物
本研究选取健康的、胎次相近，体重一致的（9.85±0.81）kg的杜×长×大断奶仔猪18头，随机分为3个处理组，每个处理6个重复，进行为期28 d的饲养试验，其中预试期7 d，试验期21 d。试验猪单笼饲养，于每天07:30、12:00、17:30饲喂，自由饮水。
1.2 试验日粮本研究的试验日粮参照NRC（1998）10~50 kg阶段生长猪营养需要配制，3种日粮配方的消化能、粗蛋白、各种氨基酸的含量基本一致，日粮的能值比分别为11.7∶1.0、1.5∶1.0和1.0∶6.9。
1.3 样品采集 饲养试验结束后，所有仔猪前腔静脉放血处死，剖开腹腔取出小肠，分离出空肠前段和回肠中段样本，使用预冷的生理盐水冲洗去除内容物，用载玻片刮取肠黏膜于1.5 mL 灭菌离心管中，于液氮中速冻后放-80℃超低温冰箱中保存备用。用于测定小肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶和麦芽糖酶活性及蔗糖酶异/麦芽糖酶复合物（SI）基因表达变化。
2结果与分析3.1 日粮能源结构对仔猪小肠黏膜二糖酶活性的影响 日粮能源结构对仔猪十二指肠黏膜二糖酶活性的影响日粮能源结构对仔猪十二指肠黏膜二糖酶活性产生了显著影响。从表1可以看出，随着能值比的降低，十二指肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶和麦芽糖酶活性均呈下降趋势。乳糖酶和麦芽糖酶活性均为CEV/FEV 为11.7∶1.0组显著高于CEV/FEV 为1.5∶1.0组（P<0.05），与高CEV/FEV组相比，低CEV/FEV组的乳糖酶和麦芽糖酶活性分别低30.51%和15.60%，蔗糖酶活性为CEV/FEV 为11.7∶1.0组显著高于1.0∶6.9组（P<0.05），CEV/FEV 为1.5：1.0组与其他两组间差异不明显（P>0.05）。
对仔猪空肠黏膜二糖酶活性的影响
日粮能源结构对仔猪空肠黏膜二糖酶活性均有明显影响。从表2可以发现，随着碳水化合物含量的降低，植物性油脂添加量的增加，空肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶和麦芽糖酶活性均呈现下降趋势，且CEV/FEV 为11.7∶1.0组显著高于CEV/FEV 为1.5∶1.0组和1.0∶6.9组（P<0.05），CEV/FEV 为1.5∶1.0组和1.0∶6.9组的乳糖酶活性比11.7∶1.0组分别降低了35.58%和32.67%。CEV/FEV 为1.5∶1.0组和1.0∶6.9组各二糖酶活性差异不明显（P>0.05）。
对仔猪回肠黏膜二糖酶活性的影
从表3可以看出，随着碳水化合物含量的降低，植物性油脂添加量的增加，回肠黏膜乳糖酶呈下降趋势，但各组间差异不显著。蔗糖酶活性也呈现下降趋势，表现为CEV/FEV 为11.7∶1.0组显著高于CEV/FEV 为1.5∶1.0组和1.0∶6.9组（P<0.05），CEV/FEV 为1.5∶1.0组和1.0∶6.9组各二糖酶活性差异不明显（P>0.05）。麦芽糖酶活性均为CEV/FEV 为11.7∶1.0组显著高于CEV/FEV 为1.5∶1.0组（P<0.05），1.5∶1.0组显著高于1.0∶6.9组（P<0.05）。
2.2 对仔猪小肠黏膜二糖酶SI mRNA表达量的影响 日粮能源结构对仔猪小肠黏膜二糖酶SI mRNA表达量产生显著的影响。从表3可以看出，随着碳水化合物含量的降低，植物性油脂添加量的增加，仔猪小肠各段黏膜二糖酶SI mRNA表达量呈下降趋势，且有显著性差异。十二指肠中CEV/FEV 为11.7∶1.0组SI mRNA表达量显著高于CEV/FEV 为1.5∶1.0组和1.0∶6.9组（P<0.05），CEV/FEV 为1.5：1.0组显著高于1.0∶6.9组（P<0.05）。与CEV/FEV 为11.7∶1.0组相比，CEV/FEV 为1.5∶1.0组和1.0∶6.9组 SI mRNA表达量分别降低了19.59%和48.45%。空肠和回肠中CEV/FEV 为11.7∶1.0组SI mRNA表达量显著高于其他两组（P<0.05），其他两组间差异不明显（P>0.05）。
3讨论3.1 日粮能源结构对仔猪小肠黏膜二糖酶活性的影响 小肠腔和肠黏膜是动物机体营养物质消化吸收的主要场所，单一的碳水化合物如葡萄糖即可通过肠上皮细胞Na+依赖性转运载体运输进入上皮细胞供能，而其他碳水化合物需经肠腔中碳水化合物消化酶消化成二糖，再在肠黏膜上二糖酶的作用下分解为单糖吸收。研究报道，在小肠中二糖酶绝大部分分布于黏膜表面，在肠腔中二糖酶活性不足总活性的5%。饲料种类和各营养成分含量对于仔猪小肠黏膜二糖酶的分泌和表达具有重要的影响，小肠黏膜二糖酶的活性对日粮具有很强的适应性。
研究表明，日粮中添加外源生物活性物质也会引起小肠黏膜二糖酶活性发生变化，并且研究发现日粮中添加表皮生长因子对仔猪小肠黏膜产生明显的影响，提高了乳糖酶和蔗糖酶的活性。说明日粮营养成分对动物的消化酶活性的影响较大。
研究表明，小肠黏膜酶活性的变化与形态学的变化密切相关，肠绒毛萎缩，成熟小肠上皮细胞受损伤，因而消化酶的活性也随之降低。本研究中随着碳水化合物与脂肪能值比的降低，小肠黏膜绒毛高度逐渐下降，隐窝深度增加（结果未列出），因此试验测得的黏膜二糖酶活性呈降低趋势，与小肠形态结构变化相符。
3.2 日粮能源结构对仔猪小肠黏膜SI m RNA表达量的影响 动物小肠黏膜柱状上皮细胞表面微绒毛上具有大量的二糖酶和肽酶，主要在碳水化合物和蛋白质的最终消化起重要作用。SI 复合物存在于小肠黏膜刷状缘膜上，可将碳水化合物和蔗糖消化成单糖后被吸收利用。
在先天性蔗糖酶-异麦芽糖酶缺失的人体内发现，蔗糖酶的第1 098个氨基酸残基是由谷氨酸替代了脯氨酸，通过抑制N-连接甘露糖糖基化，进而抑制蔗糖酶向小肠黏膜游离端转移。因此，SI复合物糖基化对蔗糖酶活性和SI复合物转移到游离端很重要。
本试验发现，随着日粮中碳水化合物含量的降低，植物性油脂含量的提高，小肠各段黏膜SI mRNA表达量呈逐渐下降趋势，其可能与日粮中碳水化合物含量减少有关，但是否与细胞膜结构变化有关或受其他机制的调节仍需进一步的研究。
4小 结日粮中添加0～0.4 mg/kg酵母硒对肉仔鸡生长性能、屠宰性能和肉品质无显著影响。随日粮酵母硒添加量的增加，血清、胸肌、肝脏和肾脏的硒含量随之线性增加，添加0.2～0.4 mg/kg的酵母硒时，血清、胸肌、肝脏和肾脏的硒含量均显著高于对照组，各组织的硒含量由高到低依次为肝脏和肾脏、血清、胸肌。
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