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锰和铁都是动物必需的微量元素，二者在吸收和代谢中存在着复杂的关系。小肠黏膜上的二价金属转运蛋白（Divalent Metal Transporter 1， DMT1）是最早发现的将小肠腔内二价铁转运至细胞内的膜转铁蛋白，也是肠道中唯一的二价锰转运载体，参与大鼠、猪和鸡肠上皮细胞对锰的摄取。膜铁转运蛋白（Ferroportin，FPN1）是最新发现的转运铁的跨膜转运载体，其主要功能是将铁从肠黏膜细胞中转运至血液，可能也参与除铁以外锌、铜、锰、钴和镉的转运。因此，本试验旨在研究饲粮铁水平对肉仔鸡锰吸收及组织中沉积的影响及其机制，进一步揭示锰与铁之间的互作关系，为提高肉鸡锰吸收率、减少锰排出对环境的污染， 提供系统、深入的科学依据。
1 材料与方法
1.1 试验设计与处理安排
采用单因子完全随机设计，共4 个处理组，分别为不加铁基础饲粮组、以硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）形式添加铁100、250、500 mg/kg 组。
为观察饲粮铁对锰吸收的影响，在28 日龄时， 每笼按平均体重抽取2 只鸡进行结扎十二指肠灌注，结扎肠段长度为10 cm，灌注液为含20 ?g/mL 酚红、pH 6.0 的5.5 mmol/L Mes- 生理盐水溶液，灌注液含锰8.74 mmol/L，灌注量为3.5 mL，灌注时间为30 min。
1.2 试验动物与饲粮
将336 只1 日龄商品代罗斯308 肉公雏按照体重随机分成4 个组，每组6 个重复， 每个重复14 只鸡，饲养于不锈钢肉鸡笼中，自由采食和饮自来水（未检测到铁）。试鸡饲养管理按《罗斯肉仔鸡饲养管理手册》进行。
参照我国肉仔鸡营养需要量（2004）配制1~28 日龄肉仔鸡玉米- 豆粕型基础饲粮（ 表1， 含铁77.7 mg/kg），并按上述处理安排配制添加铁试验饲粮（实测含铁量分别为166、308、579 mg/kg）。
试验期28 d。
2 结果与分析
2.1 饲粮铁水平对肉仔鸡生长性能的影响
由表3 可见，饲粮铁水平对肉仔鸡生长性能指标无显著影响（P >0.10），但日增重和日采食量均有随饲粮铁水平升高而降低的趋势（P >0.10）。
2.2 饲粮铁水平对肉仔鸡血液指标的影响
由表4可见，饲粮铁水平对血浆总铁结合力、血红蛋白浓度及红细胞压积均无显著影响（P >0.10），但显著影响血浆铁和血浆转铁蛋白饱和度（P <0.10），二者均随饲粮铁水平增加而提高（P <0.10）。
2.3 饲粮铁水平对肉仔鸡组织铁和锰含量的影响表
由表5 可见，饲粮铁水平除对28 日龄心脏铁含量无显著影响（P >0.10）外，显著影响其他所测组织铁含量（P <0.10），这些组织铁含量均随饲粮铁水平增加而提高（P <0.10）。饲粮铁水平对肝脏和心脏锰含量无显著影响（P >0.10），但十二指肠黏膜、胰腺和骨灰锰含量均随饲粮铁水平增加而降低（P <0.10）。
2.4 饲粮铁水平对肉仔鸡十二指肠黏膜DMT1 和FPN1 mRNA 水平及锰吸收率的影响表
由表6 可见，饲粮铁水平显著影响十二指肠黏膜DMT1 和FPN1 mRNA 水平（P <0.10），其中加铁组DMT1 mRNA 水平均显著低于对照组（P <0.10）， 且添加铁500 mg/kg 组DMT1 mRNA 水平也低于其他2 个添加铁组（P <0.10）。添加铁500 mg/kg 组FPN1 mRNA 水平显著低于对照组和其他2 个添加铁组（P <0.10），其他3 组间差异不显著（P >0.10）。
饲粮铁水平显著影响原位结扎十二指肠中锰的吸收率（P <0.10），其中加铁组锰吸收率均显著低于对照组（P <0.10），且添加铁500 mg/kg 组锰吸收率也低于其他2 个添加铁组（P <0.10）。
3 讨 论
3.1 饲粮铁水平对肉仔鸡生长性能的影响
玉米- 豆粕型饲粮中添加100 mg/kg 铁对1~21 日龄肉仔鸡采食量和日增重均无显著影响，但添加400~800 mg/kg 铁降低采食量和日增重。本试验中添加铁250、500 mg/kg 组采食量和日增重均有降低的趋势，说明此时机体可能已经呈现铁临界过量的状态。
3.2 饲粮铁水平对肉仔鸡血液指标的影响
尽管动物缺铁会导致血红蛋白浓度降低，但在不缺铁饲粮中添加100~500 mg/kg 铁并不增加血红蛋白浓度。本试验中对照组与添加铁组间血红蛋白浓度和红细胞压积均未表现出差异，可能与本试验中所用饲粮含铁较高、此时鸡只仅临界缺铁有关。血浆转铁蛋白饱和度低于16% 说明体内铁缺乏，超过60% 则说明铁过量。本试验饲粮中添加铁250 mg/kg 组转铁蛋白饱和度接近60%，说明鸡只处于临界铁过量状态，添加铁500 mg/kg 组转铁蛋白饱和度超过60%，说明鸡只处于铁过量状态。
3.3 饲粮铁水平对肉仔鸡组织铁和锰含量的影响断奶仔猪饲粮中添加铁100、500 mg/kg， 肝脏和十二指肠铁含量线性增加而锰含量线性降低。断奶犊牛饲粮中添加750 mg/kg 铁显著提高肝脏铁含量，但仅有十二指肠锰含量显著降低。蛋鸡采食添加锰300 mg/kg 饲粮6 周后，十二指肠和肝脏中锰含量升高而铁含量降低。本试验中肝脏、胰腺、十二指肠和胫骨灰铁含量随饲粮铁添加水平升高而增加，胰腺、十二指肠和胫骨灰锰含量随饲粮铁添加水平升高而降低，强烈提示饲粮铁和锰在吸收和代谢中存在拮抗关系。
3.4 饲粮铁水平对肉仔鸡十二指肠 DMT1 和FPN1 mRNA 水平及锰吸收率的影响断奶大鼠饲喂添加2% 羧酸铁的高铁饲粮2 周后，十二指肠中与铁吸收转运相关的基因Dcytb、DMT1、FPN1 和TfR1 mRNA 水平均明显降低。8 日龄肉仔鸡饲喂含铁51 mg/kg 和141 mg/kg 饲粮6 周后， 高铁组十二指肠中DMT1、FPN1 和Dcytb mRNA 水平均低于低铁组。蛋鸡采食添加锰300 mg/kg 饲粮6 周后， 十二指肠DMT1 mRNA 水平降低， 但FPN1 mRNA 水平升高。本试验中添加铁组十二指肠黏膜中DMT1 mRNA 表达量明显低于对照组，且与锰吸收率表现出相同的趋势，强烈提示饲粮铁可能通过降低DMT1 mRNA 表达量而降低了锰的吸收。只有500 mg/kg 铁组十二指肠黏膜中FPN1 mRNA 表达量明显低于对照组，这可能与FPN1 位于基底膜、其表达量受肠黏膜细胞内铁含量调控有关。
4 结 论
肉仔鸡十二指肠黏膜中DMT1 和FPN1 mRNA 表达量、原位结扎十二指肠对锰的吸收率及胰腺、十二指肠和胫骨灰锰含量均随饲粮铁水平升高而降低，表明饲粮添加铁可能通过调控十二指肠黏膜DMT1 和FPN1 的表达量降低了锰的吸收及组织中的沉积。
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