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口蹄疫疫苗及免疫技术


现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2018/2/23 20:09:52 关注:486 评论: 我要投稿

  引言
  口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、高度接触传染性,且可快速远距离传播的动物疫病。侵染对象是猪、牛、羊、骆驼等主要畜种及其他家养和野生偶蹄动物,易感动物多达70余种。发病动物的主要症状是精神沉郁、流涎、跛行、卧地,近查可见口、鼻、蹄和母畜乳头等无毛部位发生水疱,水疱破损后形成溃疡或斑痂。口蹄疫的发病率高,可造成巨大的经济损失和社会影响。该病为世界动物卫生组织法定报告的动物传染病,我国将其列为一类动物疫病。
  目前,口蹄疫仍然在世界许多地区流行,实践证明有效的疫苗免疫能够控制口蹄疫大范围的暴发和流行。世界动物卫生组织和泛美口蹄疫中心肯定灭活疫苗免疫是当前防控口蹄疫的最有效手段。20世纪50年代,欧洲大部分国家开始实施计划免疫接种,达到了消除口蹄疫的目的。一些国家也采取这种政策,成为了OIE认可的“免疫无口蹄疫国家”。
  中国政府对口蹄疫的防控一直高度重视,有健全的组织机构与防控体系,长期坚持实施 “预防为主、免疫和扑杀相结合”的综合防控措施,取得了举世公认的成效。
  一、口蹄疫疫苗及选用
  1、口蹄疫疫苗的选用
  免疫预防,疫苗是关键。人类自从发现并确认了口蹄疫病毒,就开始了其疫苗的研究。口蹄疫疫苗的品质和效力是免疫预防的关键因素。现在所用的灭活疫苗是高滴度的强毒增殖之后,经灭活处理而获得。口蹄疫疫苗生产需要高标准的生物安全设施和严格的操作规程,为此我国政府严格控制口蹄疫疫苗的研发和生产机构。中国农业部指定中农威特生物科技股份有限公司为生产全系列口蹄疫疫苗的唯一企业。中农威特公司历史悠久,其前身是中国农业科学院兰州兽医研究所的生物制品车间,上世纪50年代,就开始了口蹄疫疫苗的研发和生产,为我国口蹄疫的防控发挥了决定性的作用。公司已经发展成为口蹄疫疫苗品类齐全、技术先进、服务先行的领军企业,被行业赞誉为“我国家畜口蹄疫疫情的灭火器,口蹄疫疫苗的原创地,口蹄疫研究的先锋队”。
  口蹄疫病毒有7个血清型,各血清型间互不交叉免疫保护,因此防控口蹄疫相当于防控7种不同的传染病。每个血清型又有多个亚型,亚型内各毒株间也有明显的抗原差异,不能全部交叉保护。通常,病毒在发生变异之后,原有的口蹄疫疫苗对新流行毒株的保护力会下降或失去保护作用,因此疫苗毒株必须与流行毒株相匹配,免疫才有效果。选用口蹄疫疫苗时,不仅必须要考虑血清型的一致性、毒株的抗原匹配性,还需要考虑疫病的流行强度,流行强度越大,需要的疫苗效力应越高。
  2、常用口蹄疫疫苗
  疫苗效力、安全性等方面的技术进步,为有效防控口蹄疫发挥了关键性的作用,也是消除直至最终消灭口蹄疫的先决条件。每一次新的疫情出现时,中农威特生物科技股份有限公司在兰州兽医研究所、OIE/国家口蹄疫参考实验室、家畜疫病病原生物学国家重点实验室的强大技术力量的引领推动下,总是走在重大动物疫病防控的最前沿,都能在第一时间为口蹄疫防控一线提供针对流行毒株的最新高效疫苗。
  (1)猪口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗(Re-O/MYA98/JSCZ/2013株+Re-A/WH/09株)猪口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗(Re-O/MYA98/JSCZ/2013株+Re-A/WH/09株)的最大特点是,突破了传统制苗毒株的筛选技术,对制苗毒株的基因进行了人工改造,打破了常规疫苗种毒自然属性缺陷的限制,提升了疫苗种毒制备技术水平。该疫苗种毒的制备是以口蹄疫病毒的复制、抗原性和致病性等前沿技术理论为指导,利用单质粒口蹄疫病毒拯救技术系统(反向遗传操作系统,专利号:ZL201310175324.4),定向设计和优化改造,构建出病毒产量,以及抗原匹配性、抗原稳定性等种用性能和安全性明显优于田间分离毒的疫苗种毒,大大地提高了制苗毒株的免疫原性,使病毒增殖能力更强,敏感性、靶向性更好。结合中农威特公司的悬浮培养、抗原浓缩纯化等高新技术工艺,再次提升公司内控质量标准,生产出世界上第一个经过反向遗传学技术改造的口蹄疫高效灭活疫苗,具有很高的理论和技术创新,与极高的生产价值。
  (2)牛口蹄疫O型、A型双价灭活疫苗
  2013年,口蹄疫的流行形势又发生了变化。中农威特公司立即启用了牛口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗的战略应急储备技术,突破传统工艺,全面提升抗原的免疫原性;采用国际先进的、拥有独立自主知识产权的抗原浓缩纯化技术,有效提升了疫苗效力。该疫苗具有广谱高效、一针两防、制苗毒株最佳、高于国家标准等特点,被许多大型养殖场广泛使用,表现出良好的防控效果。
  (3)猪口蹄疫O型灭活疫苗
  猪口蹄疫O型灭活疫苗(O/MYA98/BY/2010株)是OIE/国家口蹄疫参考实验室和中农威特公司,为应对2010年突发的“缅甸98毒株”疫情而研制的疫苗产品,可以预防O型口蹄疫,已广泛使用于全国口蹄疫的强制免疫接种和规模化养殖场口蹄疫的防控。猪口蹄疫O型灭活疫苗(O/MYA98/BY/2010株)对当前流行于我国的O型口蹄疫3个遗传谱系、5个典型代表毒株都具有很好的免疫效力,是抗原性和免疫效果优良的优势毒株,可以满足我国当前和今后一段时期内O型口蹄疫防控的需要。
  (4)口蹄疫O型、亚洲1型、A型三价灭活疫苗(O/MYA98/BY/2010株+Asia1/JSL/ZK/06株+Re-A/WH/09株)口蹄疫O型、亚洲1型、A型三价灭活疫苗的优点是抗原谱广、保护性强,选用的毒株既能预防现行优势流行毒株,又能覆盖、控制既往流行毒株。O型毒株选用2010年在广东白云区采集分离到的与目前流行毒株最为匹配的O/MYA98/BY/2010株,是当前O型口蹄疫防控的最佳毒株。A型毒株是由亲本毒(A/WH/09株)通过人工改造基因获得,既能抵抗A/WH/09株的感染,也能抵抗A/MM/2013株的感染。Asia1毒株选用的是经典的江苏系毒株(Asia1/JSL/ZK/06株),该毒株为我国亚洲1型口蹄疫的防控发挥了关键作用,有力地阻止了亚洲1型口蹄疫在我国的蔓延。
  (5)其他口蹄疫疫苗
  中农威特公司的疫苗已成为国家口蹄疫疫病强制免疫的主导产品,而且公司能够随着疫情形势的变化及时推出新的疫苗。除以上具有完全自主知识产权的口蹄疫疫苗之外,还出品口蹄疫A型灭活疫苗,口蹄疫O型合成肽疫苗等系列产品。
  二、口蹄疫疫苗的储运
  高效疫苗的生产供应、疫苗毒株与流行毒株的抗原匹配性、预防接种的科学管理、有效的免疫密度等,都会影响口蹄疫疫苗的免疫效果,只有关注每一要素,规范操作,才能确保成功免疫。否则,不仅直接影响免疫效果,产生接种应激,还有可能延误疫病的防控,造成重大损失。
  口蹄疫疫苗对酸、碱、热、紫外线敏感,偏酸、偏碱、过热、冻融和曝晒,均可使疫苗的有效抗原成分降解,从而使疫苗的免疫效果降低甚至丧失。
  疫苗必须置于2~8℃的环境下保存,还要避光防潮、分类存放。为保证疫苗效力,疫苗储运要有相应的冷藏设施和温度检测设备。
  疫苗运输须确保全程冷链,妥善包装,使其尽快入库或到达目的地。疫苗出、入库应有记录,使用时采取“先入先用”的原则。
  三、口蹄疫免疫技术
  1、免疫前的准备
  (1)接种器具
  准备所需要的注射器、针头、镊子,酒精、碘酊、脱脂棉等器械和急救药物。
  按动物的大小选用相应型号的注射针头,以确保将疫苗注入肌肉层。还要做好注射器、针头的消毒和无菌保存。
  使用一次性无菌注射器时,要检查其包装是否完好,是否在有效期内。一次性物品用过后,应无害化处理。
  (2)疫苗
  口蹄疫等重大动物疫病疫苗全部赋二维码出厂、上市销售,为谨防假冒伪劣疫苗的流入,应在中国兽医药品监察所“国家兽药查询”系统对疫苗进行“兽药产品二维码追溯查询”。还要检查疫苗外观质量,不得使用疫苗瓶有裂纹、封口不严、无标签,疫苗中有异物、分层、变质、过期,和未按照储运条件存放的疫苗。
  (3)动物检查
  免疫前要充分了解接种动物的品种、年龄、饲养条件、健康状况、妊娠情况,及疫苗免疫、发病流行情况等。
  (4)小范围试验
  初次或大量使用疫苗的地区或养殖场,应先进行10~30头的小范围试验,在确认安全、无不良反应后,方可扩大接种范围。
  2、免疫注意事项
  (1)人员要求
  接种工作要求由经过培训的专业人员,在更换衣服、鞋、帽和消毒之后,严格遵守操作规程进行。
  接触过病畜的人员,不应再参加安全畜群的免疫接种,以防疫病的传播。若必须参加,则一定要通过淋浴、换衣、咳痰和隔离后,方可进行免疫操作。
  (2)免疫接种“四打”“四不打”
  为了减少应激反应,提高防疫效果,科学免疫操作倡导“四打”“四不打”。
  “四打”:
  ①免疫接种仅对健康牲畜进行;
  ②在动物处于休闲、非应激状态下进行免疫接种;③将免疫接种安排在气温适宜的时间段,如在炎热季节,应选在清晨或者傍晚进行;④经过长途运输后的动物,充分休息24小时以上,再进行免疫接种。
  “四不打”:
  ①动物在宰杀前20天之内不要对其进行免疫接种;②天气突变、转群、断奶、换料、饱腹期间暂不要进行免疫接种;③对患病、瘦弱牲畜,及断奶前幼畜暂不接种,待牲畜康复或恢复正常后方可免疫接种;④配种20天左右的母畜、一月内即将临产母畜最好不要接种。
  3、免疫程序
  疫苗接种要严格按照说明书规定的接种途径、剂量、注意事项,以及科学的免疫程序进行。
  (1)推荐免疫程序
  免疫程序是通过大量试验验证后制定的,免疫程序的制定应考虑当地疫情状况、动物的饲养管理、母源抗体水平、免疫次数、接种反应,以及疫苗抗原的免疫原性、含量等因素。因此,根据免疫效果,免疫程序需要在实践应用中不断调整和完善。
  首免时间应根据幼畜体内的母源抗体水平确定;首免之后,必须在一个月左右二次免疫;经过一段时间动物体内抗体水平会逐渐减弱甚至消失,为使机体继续保持对口蹄疫病毒的免疫力,根据免疫抗体检测结果,需要间隔一段时期再加强免疫。

 

  (2)紧急免疫接种
  紧急情况下,如疫病暴发时,对疫区和受威胁区尚未感染的动物应该紧急免疫接种,以便尽快形成免疫隔离带。
  疫苗对安全区、受威胁区及疫区牲畜均可使用。必须依序免疫接种,先接种安全区的牲畜,然后再接种受威胁区的牲畜,最后接种疫区内的牲畜。非疫区的动物,在接种后21天方可运输。
  4、免疫接种操作
  免疫接种操作是影响口蹄疫疫苗免疫效果的重要因素之一。为有效减少冷刺激,保证剂量均匀、方便使用,要将疫苗回温到20~25℃后,再进行免疫接种。使用前,应将疫苗充分摇匀,但切不可剧烈振荡,以防气泡产生。已经吸出的疫苗不可再回注于疫苗瓶内。疫苗瓶开启后,应在当天尽快用完。免疫接种口蹄疫疫苗时,不要同时接种其他疫苗。
  接种器具和注射部位应该严格消毒,接种时针头要逐头更换,保证一针一畜,以免造成交叉感染。接种部位一般选择在颈部肌肉比较厚的部位。注射时入针深度要适中,注射剂量要准确。针头与体表呈90°垂直注入疫苗,确保将疫苗注入肌肉内,不可注入脂肪层或者皮下。禁止以“飞针”方式注射,以免造成疫苗注射剂量不足和注射部位不准确。
  接种时,需有专人做好记录,注明家畜种类、大小、性别、接种动物头数和未接种头数等。在安全接种后,观察7~10日,并详细记录有关情况。
  由于口蹄疫的特殊性,接种疫苗只是预防和控制口蹄疫的重要措施之一。在免疫预防的同时,还应加强饲养管理,采取消毒、隔离、封锁等其他综合防治措施。
  5、免疫副反应的观察与预防
  疫苗接种后可能会产生副反应。
  (1)正常反应
  免疫接种动物精神、食欲正常,注射部位无明显变化,泌乳正常,仅体温一过性升高,一日内恢复,无其他可见临床体征变化。
  (2)一般反应
  注射部位肿胀、体温升高,减食1~2日,随着时间的延长,反应逐渐减轻,直至消失。
  (3)严重反应
  因品种、个体差异,少数动物可能出现急性过敏反应,如急躁不安、呼吸加快、肌肉震颤、鼻腔流血、口角泛白沫等,甚至因抢救不及时而死亡,少数妊娠母畜可能出现流产。对严重副反应动物,建议及时使用肾上腺素、地塞米松等药物进行治疗,同时采用适当的辅助治疗措施,以减少损失。
  四、免疫效果评价
  免疫动物的血清抗体水平与抗强毒侵袭的免疫保护有一定的正相关性。因此,抗体监测能够间接反映免疫接种效果,可为制定合理免疫程序提供依据。对于已经实施了免疫接种的畜群,必需监测动物群体的抗体水平和免疫合格率,以评估动物群体的抗感染能力。同时,也要结合流行病学、临床症状、血清学指标、预防效果等对免疫效果做出综合性判断。
  接种口蹄疫疫苗时要求应免动物100%免疫,免疫抗体效价合格率达到70%以上。若免疫合格率较低,免疫效果不理想,未达到国家规定的抗体效价合格率水平,应当分析原因、采取措施、及时进行补免,提高免疫效果。
  五、结束语
  口蹄疫疫苗的应用,已使国内口蹄疫的疫情得到了有效的控制,大幅度地减轻了来自国内外疫情的威胁。《针对新传入我国口蹄疫流行毒株的高效疫苗的研制及应用》中农威特公司斩获国家科学技术进步二等奖,国家开展“亚洲1型口蹄疫免疫全面退出”工作,随着口蹄疫防控形势的逐步好转还开展了“非免疫无疫区建设”工作,我国口蹄疫控制策略获得世界动物卫生组织(OIE)颁证认可……事实证明,有步骤、有计划地实施口蹄疫疫苗免疫接种,可以增强动物抵抗口蹄疫病毒的能力,有效预防和控制口蹄疫的暴发和流行,切实保障畜牧业的发展,使人类朝着最终消灭口蹄疫的方向不断前进。
  中农威特销售公司 李克斌 田波 李永霞
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