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非洲猪瘟的环境监测
现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2019/6/21 21:12:15 关注：505 评论： 我要投稿
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监测是防控动物疫病的基础，是制定防控建设的一级依据。当前非洲猪瘟疫情严峻，通过进行猪场环境的监测，可以及时发现非洲猪瘟疫情隐患，有效切断病原传播途径，为非洲猪瘟防控决策提供科学依据。
非洲猪瘟病毒，具有庞大而复杂的基因组，拥有超强的体外生存能力，虽然宿主单一，只感染猪和野猪，但传播源和传播途径都十分复杂。因为非洲猪瘟病毒的这些特点，导致非洲猪瘟的防控工作实施难度大。
能否在感染之前，及时地把非洲猪瘟病毒“揪”出来，是能否有效避免非洲猪瘟病毒侵害的关键之一。在复产方面，猪场能否成功，清场后是否做到全面净化非洲猪瘟病毒，必须通过全面的环境监测来验证。
01
可能受到污染的环境
非洲猪瘟病毒是唯一的虫媒DNA病毒，可在钝缘软蜱中增殖，并使其成为主要的传播媒介。同时，它还可通过车、水源、料槽、去势、器具、软蜱叮咬等经口和呼吸道途径间接传播。
发病猪和带毒猪是非洲猪瘟病毒的主要传染源, 病猪各组织器官、体液、各种分泌物、排泄物中均含有高滴度的病毒, 因此病猪的唾液、鼻分泌物、泪液、尿液、粪便、生殖道分泌物以及破溃的皮肤、病猪血液等为主要的传染源。
非洲猪瘟病毒在环境中较为稳定，在空气中能保持活性数日，在血液、粪便和组织中可长期存活，冻肉中存活数年至数十年，未熟肉品、腌肉、泔水中可长时间存活。病毒具有明显耐冷不耐热的特点，低温暗室内存在血液中之病毒可生存六年，室温中也可存活数周。
02
非洲猪瘟病毒检测
2019年4月，农业农村部发布《关于加强养殖环节非洲猪瘟疫情排查的通知》，鼓励规模猪场和种猪场开展非洲猪瘟自检。现阶段主流检测手段有三种：荧光定量PCR检测、核酸等温扩增类和快速检测试纸条。
1.荧光定量PCR检测
荧光定量PCR检测的优点明显，敏感度高、准确率高，可用于环境样本的检测，也可多样品混合检测。但是同时其缺点也明显，操作复杂、成本高，需要配备专业人士和专业设备，花费时间也比较长，单个样本的检测时间超过一个小时。如果操作失误，对检测结果影响大，同时有可能造成检测实验室污染。
由于荧光定量PCR检测设备条件的限制，一般只鼓励具备一定规模的猪场配置，进行日常筛查工作。农业农村部也鼓励规模猪场、种猪场配置检测仪器设备，规范使用经农业农村部批准或经中国动物疫病预防控制中心比对符合要求的检测方法，自行开展非洲猪瘟检测，提高排查工作的针对性和有效性。
2.核酸等温扩增技术
核酸等温扩增技术是一类核酸体外扩增技术，其反应过程始终维持在恒定的温度下，通过添加不同活性的酶和各自特异性引物来达到快速核酸扩增的目的。
核酸等温扩增技术是近几年来兴起，能在某一特定的温度下扩增特定的DNA或者RNA。与传统PCR技术相比，由于不需要升温降温，能够在恒定温度下实现扩增，对仪器的要求大大简化，反应时间大大缩短，更能满足快速简便的需求，具有特异性高、分析速度快、成本低、突变率低的优势。
由于这项技术所具备的优势，可以实现便携式的快速核酸检测，在非洲猪瘟形势下无疑更有利于不具备构建规范实验室条件的猪场检测非洲猪瘟。
3.快速检测试纸条
快速检测试纸条操作简单，成本低，无需配备价格昂贵的设备，但是准确性不及荧光定量PCR检测，同时一般只适合用于全血或内脏组织等的检测，需要注意采样对象和方法。
快速检测试纸条适合用于猪场进行初步筛查，一般进行多次采样检测，一旦检测到非洲猪瘟病毒阳性，要及早处理怀疑病猪，并尽早将样本送到实验室进行确诊。
03
猪场非洲猪瘟病毒监测
为及早进行对非洲猪瘟病毒的筛查，避免猪场猪只受到病毒感染，猪场需要对猪场环境进行监测。
针对容易接触到猪场外部环境的地方，如猪场大门口、运猪台、人员进出通道等，需要经常性消毒，有条件的猪场，定期抽取环境样本进行荧光定量PCR检测。
一般猪场可以利用快速检测试纸条，定期对场内猪只进行抽查，有异常状况，迅速进行针对性监测。
怀疑发病，可采集怀疑病猪的血清样品和病原学样品，病原学样品主要包括抗凝血、脾脏、扁桃体、淋巴结、肾脏和骨髓等。如环境中存在钝缘软蜱，也应一并采集。
样品的包装和运输应符合农业农村部《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》等规定。规范填写采样登记表，采集的样品应在冷藏密封状态下运输到相关实验室。
取样应小心谨慎，并按照适当的方法避免对动物造成过度的应激或伤害，或对采样人员造成伤害。应无菌收集并注意避免交叉污染，并始终使用新的针头以避免疫病传播。所有等待检测的样品都应该被认为有感染性并应进行相应处理。
根据农业农村部要求，经养猪场户自行检测或兽医社会化服务机构受委托检测为疑似非洲猪瘟病毒核酸阳性的，应当依法报告当地畜牧兽医部门，并按要求规范做好样品送检和确诊。在样品确诊前，养猪场户要严格做好生猪隔离和风险物品管理，不得擅自处置。
已清场的猪场，如果准备复养，必须首先做好全面消毒，然后多处多点抽取环境样本送往实验室，通过荧光定量PCR检测样本，确认样本无病毒存在，再引入哨兵猪进行观察。哨兵猪饲养不低于45天，而且不得调出。最后对哨兵猪进行血清学和病原学检测，确认非洲猪瘟病毒阴性，且观察期间没有临床异常，养殖场才能进行补栏复产。
来源：《动物防疫一线》2019年第3期
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| 文章作者：王章权 防疫一线 文章编辑：一米优讯 |
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