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一份猪病病料采集方法及注意事项


现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2019/10/28 15:33:47 关注:61 评论: 我要投稿

  为了使广大养殖朋友更好的对猪场进行疾病控制,我们制定一份病料采集方法注意事项,供广大养殖朋友参考。
  采集病料前需要进行器械的灭菌消毒,使用一次性针头和注射器及真空采血管;采取一种病料,使用一套器械与容器;做好计划,如要采集足够的数量及采集的部位、种类等;还要准备采集后的用具等消毒、清洗液及容器等用品。
  一、血样采集
  具体步骤如下:
  1 准备好灭菌(至少是干净的,但必须保证干燥)干燥的带盖子的塑料试管或者青霉素瓶若干;准备好专业的采血针,或者一次性注射器(5-10毫升)。保证每个血样一个瓶子或一个针筒。
  2 采血。采血前,在相应的注射器或容器上做好标记。
  (1)耳静脉采血。本法为最常用的取血法之一(适用于中、大猪)。将猪保定后,或由助手以手扶住头部及耳部。选耳静脉清晰的耳朵,用75%酒精局部消毒,待干。用手指轻轻摩擦猪耳,使静脉扩张,用连有针头的注射器在耳缘静脉末端刺破血管,等血液漏出取血或将针头逆血流方向刺入耳缘静脉取血,取血完毕用棉球压迫止血。黑色皮肤猪耳静脉看不清,用手电筒在耳、腹面照射利于采血。
  (2)前腔静脉采血(适用于仔猪,小猪):猪前腔静脉,在第一对肋骨间的胸腔入口处的气管腹侧面,由左右两侧颈静脉和腋静脉汇合形成。该血管在一周龄猪直径约5毫米,成年猪约1厘米以上。采血部位在第一对肋骨与胸骨柄结合处直前,但由于左侧靠近隔神经,以右侧采血为宜。
  (3) 注意事项:
  选用合适的注射器及针头
  公母猪宜选用16号 50mm针头;30kg以上的中大猪,宜选用12号38mm针头;10-30kg小猪,可选用9号 25mm(一次性注射器常配的针头);10kg以下仔猪,应选择9号 20mm针头(一次性注射器所配的另一种规格的针头)。
  选准进针的部位
  一般来说,30千克以下的小猪应采两前肢与气管交汇处,种公母猪和30千克以上的中大猪可选颈部最低凹处。进针时又要掌握好一定的方向、角度和深度,要及时调整。血管被刺穿,会引起血肿,要立即停止采血,须换另一头猪采血。特别要注意的是对仔猪采血时,不能太猛、太深,以免伤及心包或心脏。
  特别指出,血液和血清是不同的概念!血清是血液的组成部分,它必须从血液中分离出来后,才能用于血清学试验,但是这种分离过程需要专业人员来操作。因此,采集的血样,最好在凝固后,直接送到检测单位,以保证血清学试验的正确进行。一般采血2~5毫升就足以满足实验室诊断的用量了。重点提示,用于血清学试验的血样,不能加任何抗凝血剂!
  3 血液保存:将采完血样的注射器活塞,微微拔出一些,使针筒内留有部分空气,然后盖好针头盖子,将注射器针头向上成30度角,斜放,等待血液完全凝固(大约10~30分钟),此过程中不能移动注射器,防止溶血。用真空采血器采集的血样,直接倾斜放置好。夏天在常温下放置一段时间,冬天要放置在25~37℃温水中一段时间,以利于血液中血清的析出。血样送检时,在保温箱加适量的冰块防止血液变质,送检过程中尽量防止剧烈振荡。
  注意事项:(1)擦拭采血部位的酒精未干,不要立即采血。血液混进酒精后易 造成溶血(使检测结果不准);(2)血液在运输过程中,防止坐摩托车、拖拉机等剧烈展荡,使血细胞破裂引起溶血(要注意血液防震)(3)血液存放的容器要洗净,确保干燥。
  二、组织样采集
  疑似猪瘟的病料采集:
  1 放血。先把猪放血处死,在从大腿内侧将皮肤、肌肉切开。
  2 解剖摘取扁桃体。从胸部中线偏右处,切断肋骨,打开胸腔,在气管与肺脏连接处向前5~10厘米位置,割断气管,并顺着气管向前割开,直至咽喉部,从后向前将气管割断一半,这时就可以在舌跟靠近上腭的左右两边看到两个淋巴结,即扁桃体。小心取下扁桃体放置于干净的保鲜袋中,并做标记。
  3 解剖摘取肺门淋巴结。一只手握住气管切断处,使劲向外拉出肺脏,另一只手帮忙扯断肺脏与身体的连接,并将整个肺脏翻转过来,使背面向上,此时可在气管分为支气管,与肺脏连接处,找到分别位于左右两侧的两个肺门淋巴结,小心摘取,放置于另一个干净的保鲜袋中,并做标记。
  4 肺脏样品的采集。如有必要,此时可将割取部分肺脏样品,一般只要割取介于病变和正常组织之间的部分,放置于一个干净的保鲜袋中,并做标记,当然也可以将整个肺脏保存。
  5 解剖摘取腹股沟淋巴结。将两个后腿,向下向外压,就可以在两侧凹陷的腹股沟处中间部位,看到微微或明显隆起,即腹股沟淋巴结,小心割开皮肤和淋巴结表面的被膜,小心摘取,放置于一个干净的保鲜袋中,并做标记。
  6 解剖摘取脾脏。沿腹中线将腹部皮肤、肌肉和腹膜,小心切开并打开腹腔,在腹腔的左侧位于胃和回肠下面,找到脾脏,小心摘取,放置于一个干净的保鲜袋中,并做标记。
  7 解剖摘取肠系膜淋巴结。从腹腔的右侧位于肝脏和胃下面,找到肠系膜,在肠系膜靠近肠道的末端,可以看到很多结节,即肠系膜淋巴结,小心摘取,放置于一个干净的保鲜袋中,并做标记。
  8 流产胎儿。通常木乃伊胎不能作为检测样品。对于新鲜流产的胎儿,可作为检测样品。对于流产日龄较早的胎儿,可取整个胎儿保存;如果是晚期流产的胎儿,最好根据上述步骤,摘取相应组织,保存送检。胎儿的保存方法同上。
  疑似蓝耳病病例的病料采集:
  具体病料采集程序与猪瘟病料的采集基本一致(包括步骤1、3至6、8),需要强调的是,在蓝耳病的检测中,必须包括淋巴结和肺脏样本!如果是检测流产胎儿,那么,最好能剪取部分胎衣液或剪取胎衣样本,保存方法同上。
  疑似圆环病毒感染病例的病料采集:
  对于疑似圆环病毒感染的病例,病料采集包括步骤1、3至7。记住,在圆环病毒的检测中,必须包括淋巴结样品。
  疑似伪狂犬病病例的病料采集:
  伪狂犬病病毒可危害呼吸系统、繁殖系统或中枢神经系统,因此,病料采集包括步骤1至8。同时,最好能够采集神经系统的样品。具体步骤为用手手术刀片将猪的头皮剥去,露出头盖骨,然后用凿子(也可可用一字螺丝刀),轻轻凿开头盖骨,并清理骨头碎片,等整个大脑露出后,小心用手摘取,放置于一个干净的保鲜袋中,并做标记。特别提示,因为现在用的伪狂犬病疫苗绝大多数都是基因缺失疫苗,因此还需进行血清学抗体的检测。
  疑似乙型脑炎病例的病料采集:
  病料采集包括步骤1、5、8。注意,乙型脑炎病毒可感染人类,特别是儿童,导致严重的脑炎,因此取病料时,请务必带上乳胶手套,并小心操作。
  疑似传染性胃肠炎和流行性腹泻病例的病料采集:
  本病的病料采集,包括步骤1、5、7。同时需要采集肠道样品。从腹腔中剪取病变的小肠10~15厘米,从一侧将肠道剪开,轻轻刮去肠道内容物,然后放置于一个干净的保鲜袋中,并做标记。
  疑似流感病例的病料采集:
  按照上述方法采集肺脏和淋巴结即可。
  检测病料的运输注意事项:
  死亡的猪应尽快采集,夏天不应超过2小时,冬天不超过6小时(还要视具体温度)。采集猪的病料必须新鲜,尽可能减少污染。用于检验的内脏组织块不必太大。无论是运送新鲜的病料还是冰冻的病料,保证整个过程中,病料始终处于低温状态,十分重要。一个简单的方法是,用废弃的矿泉水瓶,灌水后,放置在冰箱中,制备冰块,在病料运输时,将足量的冰块和病料一起放置在泡沫箱中,用冰块包裹所有病料,如果冰块不够多,最好将冰块放置在病料的上面和下面。密封后,快速运送到检测单位。送检过程中要防止倾倒、破碎、避免样品泄漏,要注意有的样品不能剧烈展荡,要注意缓冲放置,所有样品都要贴上能标示采样猪的详细标签。
  注意事项:1 病料要新鲜 必须是选取新鲜及有病变部位的材料2 取材要有代表性 对每一器官,应在各个不同部位多取几块组织,并且病变部分应尽量附带一些周围的健康组织。
文章来源:执业兽医     文章编辑:一米优讯     
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