摘要:为探讨不同接种途径对枫叶鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的影响,选择非免疫种鸭所产的1日龄体质量均等的360只健康枫叶雏鸭(A组),平均分为4组(饮水组、滴口组、肌注组、对照组);选择免疫种鸭所产的360只雏鸭(B组),也平均分为4组(饮水组、滴口组、肌注组、母源抗体监测组)。在雏鸭5日龄时,除对照组和母源抗体监测组外,对其他组雏鸭进行免疫接种,分别于免疫后5、10、15d,用ELISA方法检测雏鸭抗体效价,并进行攻毒保护试验。结果显示:A组的肌注组平均抗体效价(0.588±0.018)>饮水组(0.560±0.015)>滴口组(0.541±0.009),雏鸭攻毒保护率依次为91.1%、85.6%、78.9%;B组的肌注组平均抗体效价(0.513±0.021)>饮水组(0.484±0.051)>滴口组(0.466±0.014),攻毒保护率依次为72.2%、66.7%、60.0%,均低于A组。结果表明:无论有无母源抗体干扰,肌内注射的免疫效果最好,其次是滴口,饮水的免疫效果较差;母源抗体可干扰疫苗的免疫效果。因此,需根据使用疫苗种类和实际情况,选择最合适、最有效的免疫途径,同时做好母源抗体监测,选择最佳免疫时间。本研究为鸭场免疫途径的选择提供了参考。
免疫是防控动物疫病的重要措施,若免疫措施不到位或方法不准确,会导致免疫效果不佳或失败,从而引发动物疫病,造成严重经济损失。鸭病毒性肝炎(duck virus hepatitis,DVH)是引起雏鸭高致死性的传染病,一直严重影响鸭养殖业发展。对于DVH,目前尚无有效的治疗药物,免疫接种是最有效的预防措施之一。目前DVH免疫有多种途径,而不同接种途径对DVH抗体的影响研究报道较少。本研究对DVH弱毒活疫苗3种接种途径(肌注、饮水、滴口)进行试验,对比不同接种途径对枫叶雏鸭DVH抗体的影响及保护率,以期为鸭场免疫途径的选择提供参考。
材料
试验动物
非免疫种鸭所产的1日龄体质量均等的健康枫叶雏鸭360只(试验A组),规范免疫种鸭所产的1日龄体质量均等的健康枫叶雏鸭360只(试验B组),按照常规饲养至5日龄进行试验。
方法
试验分组及免疫方案
试验分组。将试验A组的360只雏鸭随机分为4组,分别为饮水A组、滴口A组、肌注A组、对照A组(不免疫),每组90只;将试验B组的360只雏鸭也随机分为4组,分别为饮水B组、滴口B组、肌注B组、母源抗体监测组,每组90只。母源抗体监测组,分别在雏鸭1、3、5日龄时测定母源抗体效价,其他试验组均在5日龄时进行试验。
免疫方案。饮水组:免疫前2h,给雏鸭停水,使其处于饥渴状态,然后按照使用说明书,将DVH弱毒苗用干净的井水稀释,同时混合均匀。每只雏鸭饮用1mL的疫苗量,直至饮完。饮用后为避免疫苗在体内被稀释,继续停水1~2h。滴口组:按照说明书,将DVH弱毒苗稀释混匀,进行滴口免疫,保证每只雏鸭疫苗量为1mL。肌注组:按照说明书,在雏鸭腿部肌肉注射DVH弱毒苗1mL/只。
抗体水平检测和攻毒保护试验
试验A组。雏鸭免疫后常规饲喂。各组在免疫后5、10、15d,分别随机各取30只雏鸭进行心脏采血,用ELISA方法检测免疫后的抗体效价,计算平均值,同时注射DVH病毒0.1mL/只进行攻毒试验。观察至免疫后20d,记录每组雏鸭发病死亡情况。出现精神沉郁,呈昏睡状,或者出现共济失调症状,判定感染发病;出现上述症状后死亡,判定为感染死亡。
试验B组。除母源抗体监测组外,其他各组试验方法同A组对应一致。母源抗体监测组在1、3、5日龄时,各抽取30只雏鸭检测抗体。
结果与分析
试验A组
结果(表1)显示:不同免疫途径对雏鸭抗体效价有影响,对应的攻毒保护率也有所不同,平均抗体效价和攻毒保护率从高到低依次为肌注组、滴口组、饮水组,免疫15d后的攻毒保护率均到达93%以上,达到了理想的保护效果。而对照组没有检测到抗体,效价为0,表明试验结果成立。
试验B组
母源抗体监测组结果(表2)显示,免疫种鸭所产的5日龄以内雏鸭母源抗体水平较高,且随日龄增长,母源抗体呈下降趋势,与抗体消长规律相符合。其他试验组结果(表3)显示:经不同途径免疫后,存在母源抗体的雏鸭抗体效价和对应的攻毒保护率都慢慢升高,平均抗体效价和攻毒保护率从高到低依次为肌注组、滴口组、饮水组,但对应的抗体效价和攻毒保护率均低于试验A组,表明母源抗体对疫苗免疫抗体产生了一定的干扰。
讨论
通过试验数据对比发现,虽然母源抗体对疫苗免疫后抗体的产生有一定的干扰,但疫苗免疫后的抗体水平仍直线升高,说明该疫苗的保护效果较好,与丛秋实等的研究结果一致。无论有无母源抗体干扰,用DVH弱毒活疫苗(CH60株)免疫的最佳接种途径为肌内注射,其次是滴口,饮水免疫效果较差,但免疫15d后都能达到良好的攻毒保护效果。
DVH是一种传播迅速,可造成雏鸭高发病率和死亡率的病毒病,在自然感染情况下,只有雏鸭会发病,主要是20日龄以内,尤其3~10日龄的雏鸭。目前,常通过以下两种方法预防DVH:一是免疫种鸭,使雏鸭获得母源抗体而受保护;二是直接免疫雏鸭,使雏鸭主动产生抗体。本试验主要对免疫雏鸭的方法进行探讨,对于哪种方法保护效果最好,有待下一步研究。由于20日龄之后,雏鸭对DVH病毒的易感性会随之降低,所以本试验只做了免疫后20d内的研究。
临床上一般采用注射免疫,有些疫苗可通过滴口和饮水方式免疫。程安春等对饮水、皮下注射、滴鼻和喷雾等多种免疫途径进行了研究。而对肌内注射、饮水、滴口3种免疫途径效果是否有差异少有报道。本试验对比3种接种途径对枫叶雏鸭DVH抗体的影响及保护率差异,为鸭场免疫途径选择提供了依据。Hanson用致弱的DVH疫苗肌内注射接种,发现免疫效果较好。Hwang用DVH弱毒肌内注射雏麻鸭,3d后即产生较强的免疫力,而口服免疫6d后才可产生免疫保护,与本试验结果基本一致。
有研究表明,种鸭严格按免疫程序免疫后所产的健康雏鸭,其母源抗体能保护雏鸭预防DVH病毒的早期感染。体内存在母源抗体的雏鸭,经DVH弱毒疫苗免疫后,免疫效果确实受影响,且母源抗体量越高,产生的疫苗免疫抗体水平就越低,但随着母源抗体的减少,免疫抗体水平逐渐增强,这与本试验结果一致。
因此鸭场在制定种鸭或雏鸭免疫程序前,必须根据本场使用疫苗的种类和养殖场实际情况,选择最有效、最合适的免疫途径,同时还应注意疫苗免疫后产生有效抗体时间,以及雏鸭体内的母源抗体情况,避免与疫苗相互干扰。另外,如果雏鸭孵出后感染了DVH病毒,那么即使采取了免疫措施,免疫效果也会受到影响,因此除了加强免疫接种外,还应严格控制鸭苗的引进,加强饲养管理,完善卫生消毒制度。
结论
研究表明:不同接种途径对枫叶鸭DVH抗体产生确实有影响,肌内注射免疫效果最佳,其次是滴口,饮水效果相对偏低,但免疫15d后都能产生良好的保护效果,因此各场需根据使用的疫苗种类和实际情况,选择最合适、最有效的免疫途径;母源抗体可干扰疫苗的免疫效果,因此疫苗免疫时需做好母源抗体监测,以选择最佳免疫时间。
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