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鸭霍乱的诊断和防治


现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2020/11/20 11:41:51 关注:1178 评论: 我要投稿

  摘    要:
  对某鸭场采样进行细菌分离鉴定、荧光PCR检测、药敏试验。发现鸭群感染多杀性巴氏杆菌, 该分离菌对恩诺沙星、新霉素高度敏感, 而对庆大霉素、氟苯尼考不敏感。
  关键词:
  鸭; 巴氏杆菌; 细菌分离鉴定; 荧光PCR;
  河南信阳地区气候湿润、河网密布, 适合鸭鹅等水禽的养殖, 鸭养殖量位居全省第一, 是当地农民致富增收的重要途径。
  2018年11月, 辖区内某鸭场鸭群突然发病, 2d内死亡300多只, 养殖户使用氟苯尼考、庆大霉素等药物治疗, 效果不佳, 病情有继续扩散的迹象。
  接到报告后, 本人迅速赶到现场, 观察症状并剖检, 采集样品并检测, 现将情况报告如下:
  1 发病情况
  该养殖户饲养麻鸭3000只, 45日龄, 在7日龄、21日龄已经免疫2次高致病性禽流感疫苗;现场除死亡300多只外, 眼观还有500多只发病。
  症状表现为:张口呼吸、瘫痪、跛行、不愿下水, 个别鸭只关节肿胀, 排铜绿色腥臭粪便。
  剖检后发现:病死鸭腹膜、皮下组织有小出血点, 心包增厚、心包内有不透明液体、心冠脂肪出血, 肺脏充血、有出血点, 肝肿大、质脆、呈棕黄色、肝表面有针尖状坏死点。
  2 样品采集及检测
  2.1 材料
  2.1.1 病料收集
  无菌取病死鸭的肺脏、脾脏、肝脏及分泌物、双拭子 (棉签采集口腔及泄殖腔后, 存放在含有PBS的离心管中) 等样品送达本实验室, 低温保存备检。
  2.1.2 主要检测试剂
  禽流感病毒通用型 (H5+H7) 实时荧光RT-PCR检测试剂盒 (北京世纪元亨动物防疫技术有限公司) 、血琼脂平板、麦康凯平板、胎牛血清、LB培养基、细菌生化鉴定管、药敏片 (以自制为主) 等购自郑州博赛生物工程有限责任公司;革兰氏染色试剂实验室自行配置。
  2.1.3 主要检测仪器
  生物显微镜 (日本Olympus公司) ;核酸提取仪、实时荧光PCR仪 (西安天隆) ;SPX-150B智能型生化培养箱 (上海琅轩实验设备有限公司) ;HH数显恒温水浴锅 (江苏金坛晶玻实验仪器厂) 。
  2.2 方法
  2.2.1 细菌的分离
  无菌采集病变明显部位, 划线接种于麦康凯平板、鲜血琼脂平板上, 37℃温箱中培养24h以上, 仔细观察培养菌落的形态, 选择生长较好菌落继续培养;取病料和病死鸭分泌物、挑取培养基菌落直接涂片进行革兰氏染色镜检。
  2.2.2 生化鉴定
  向LB液体培养基中添加5%胎牛血清, 随后接种纯培养物, 取少量培养物加入生化鉴定管中, 37℃温箱中培养24h后, 观察、记录结果。
  2.2.3 荧光PCR检测
  取双拭子样品, 采用禽流感病毒通用型实时荧光RT-PCR检测试剂盒检测样品中是否含有禽流感病毒, 参照试剂盒说明书进行操作。
  2.2.4 药敏试验
  参考文献[1,2,3], 利用纸片法测定分离的细菌对庆大霉素、硫酸新霉素、诺氟沙星、恩诺沙星、泰乐菌素、头孢曲松、硫酸粘杆菌素、氟苯尼考等8种药物的敏感性, 通过测定抑菌圈的直径 (Φ) 判定药物对波氏杆菌的敏感性:Φ≥20mm为高度敏感, 15mm≤Φ<20mm为中度敏感, Φ<15mm为耐药。
  3 检测结果与分析
  3.1 细菌分离
  组织分离物在麦康凯平板上无菌落生长, 在血液琼脂平板培养24h后, 形成中等大小菌落, 菌落呈光滑、圆整、半透明状, 未出现溶血现象;将分离物和培养菌落直接涂片, 革兰氏染色后在显微镜下观察, 可见两端钝圆的短杆状的球杆菌, 革兰氏阴性 。
  3.2 生化鉴定结果
  本试验分离的细菌可以发酵葡萄糖、不发酵乳糖, 氧化酶和触酶阳性, 产生硫化氢, VP试验阴性, 吲哚试验阳性。
  3.3 荧光PCR检测结果
  采集样品经荧光PCR检测, H5亚型和H7亚型禽流感病毒均为阴性。
  3.4 药敏试验结果
  分离菌株药敏试验结果, 见表1, 分离菌株对硫酸新霉素、恩诺沙星2种药物高敏, 对泰乐菌素、硫酸粘杆菌素、头孢曲松、诺氟沙星4种药物中敏, 对氟苯尼考、庆大霉素不敏感。
  4 防治
  巴氏杆菌病是由多杀性巴氏杆菌 (Pasteurella multocida) 引起的以畜禽败血症和炎性出血为特征的疾病, 多种动物均可患病, 急性可造成畜禽死亡, 给养殖场户带来较大损失。鸭群感染本菌后, 不同阶段发生不同疾病, 幼龄鸭为浆膜炎, 中青年鸭为鸭霍乱, 可以造成鸭只大量死亡。该病菌通常存在于患病动物的全身各组织、分泌物和排泄物中, 不良因素刺激、抵抗力下降、病菌侵入机体均可引起发病, 气候突变极易暴发, 给鸭饲养场带来很大的经济损失[4,5,6]。本研究采用细菌培养、镜检、生化及荧光PCR鉴定等手段在本地发生疾病的鸭群中分离到多杀性巴氏杆菌;鸭霍乱是本地区鸭群常见多发病, 养殖户用药较多, 引发耐药, 为防治该病, 笔者又采用药敏试验筛选出恩诺沙星、硫酸新霉素等2种高敏药物, 为该疫病防治提供重要参考。全场鸭群采用恩诺沙星和荆防败毒散拌料, 连续用药7d后, 很快控制住病情, 未再发现死亡病例。


  鸭霍乱是常见、多发的传染病, 病原菌可经患病动物的排泄物、分泌物等污染的饲料、饮水、用具和内外环境传播, 也可经消化道传给健康动物, 飞沫、咳嗽排出的带病菌也可传播本病。为防控该病, 建议鸭场采取综合性防控措施来防治该病:一是鸭群尽量做到全进全出, 防止外来病菌进入本场;二是加强饲养管理, 改善鸭群生长环境, 给予鸭群营养合理的饲料, 定期在饲料中添加保健性药物和抗应激药物, 提高抵抗力;三是要做好鸭舍的清洁卫生, 定期灭鼠、驱虫、驱鸟, 保持鸭舍的清洁卫生, 减少各种传播因素;四是为减少抗生素的使用, 定期可以选择针对本场流行菌株的疫苗对鸭群进行预防接种, 提高特异性免疫力。
  [1]胡泽兵.鸭霍乱的诊断和防治[J].家禽科学,2019(04):38-40.

文章来源:家禽科学杂志     文章编辑:一米优讯     
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