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摘要：为了解我国非洲猪瘟（ASF）相关技术专利研发重点，利用中国专利文摘数据库（CNABS）等专利数据库，结合“人工阅读去噪”筛选出295件ASF相关技术专利，并运用Excel软件对2006年1月至2020年7月专利的申请量、技术领域、申请人、研究核心等进行了分析。结果显示：我国专利总体申请量呈现增长趋势，并从2018年开始出现爆发性增长；ASF技术专利以快速、高效、特异地鉴定和监测ASF病毒以及有效、安全地预防和治疗ASF为研究的重点和热点；专利申请人涉及面广，涵盖企业、科研院所、高校和个人，其中企业申请总量最高，其次是科研院所和高校；研究核心各有侧重，科研院所和高校侧重于基础技术的探索和研发，而企业则偏重于技术和产业化的有效结合。随着我国ASF疫情防控重要性和紧迫性的日趋增加以及研究手段的日益更新，可以预期科研院所、高校以及企业等各申请人在该领域中的研究将会更加活跃。本文为我国ASF防控及其技术研发等提供了参考。
非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起猪的一种烈性高危传染性疾病。ASFV是非洲猪瘟病毒科、非洲猪瘟病毒属的大型双链DNA病毒。ASF于1921年首次在肯尼亚报告，在至今为止的近百年时间里，全球已有60多个国家发生了ASF疫情，甚至在部分国家和地区呈现出大暴发趋势。2018年8月我国辽宁沈阳确诊首例ASF疫情以后，ASF已经迅速蔓延至我国几乎所有省份。经统计，2019年我国的总体生猪产能与 2018 年相比降低了约40%，生猪出栏量及猪肉产量下降幅度超过了20%。作为科技创新以及技术研发信息重要来源的专利技术，能为ASF防控工作提供重要的情报。因此，基于尽快控制和扑灭疫病的紧迫性，本文梳理总结了我国ASF技术专利发展现状，并对重要申请人及其ASF技术专利进行详细分析，以期为我国ASF的疫病防控和技术研发提供有价值的参考。
ASF相关技术专利申请数量变化
在中国专利文摘数据库（CNABS）等专利数据库，选用关键词“非洲猪瘟、African Swine Fever virus、ASFV”检索从2006年1月至2020年7月的专利申请，并结合“人工阅读去噪”最终得到我国ASF技术相关专利共295件，然后运用Excel软件对专利的类型分布、每年申请量和发展趋势进行分析和梳理。
我国ASF相关技术专利主要涉及发明专利和实用新型专利两种，其中发明专利占主导地位，占90%。从每年的专利申请数量可以看出，我国ASFV技术专利总体申请量呈现增长趋势，并从2018年开始出现爆发性增长（图1-A），2018—2020年的申请总量远远超过2018年前的总量，占比高达81%（图1-B）。这可能与2018年我国首例ASF疫情的发现相关。从我国ASF防控形势以及我国颁布的相关政策来看，我国在ASF领域相关专利申请仍会保持增长势头。
ASF相关技术专利领域分布
以国际专利分类（IPC）为切入点，分析我国ASF技术专利的研究领域，寻找我国专利研究的重点和热点。表1中列出了ASF领域相关专利前10的IPC分类大组。分析整理发现，我国ASF技术专利以快速、高效、特异地鉴定和监测ASFV以及有效、安全地预防和治疗ASF为研究的重点和热点，体现了我国对ASF检测和防治专利保护的重视。
ASF相关技术专利申请人分布
我国ASF技术专利申请人涉及企业、科研院所、高校和个人，其中企业申请总量最高，其次是科研院所和高校（图2）。就各主体的申请量而言，中国动物卫生与流行病学中心及其分中心的申请量排名第一位，紧随其后的是扬州大学、华南农业大学，而以陕西诺威利华生物科技有限公司、杭州艾替捷英科技有限公司为代表的企业申请量也较多（图3）。从申请人的申请时间可以看出，重要申请人的专利申请时间与我国在该领域的总体申请量变化趋势保持一致，从2018年开始我国重要申请人的专利申请量呈现迅速增长趋势（图4）。
ASF技术专利研究核心
从图5可见，在该领域中专利申请量排名第一的中国动物卫生与流行病学中心及其分中心在ASFV鉴别、诊断以及ASF疫苗研发方面都做了大量研究。早期中国动物卫生与流行病学中心及其分中心将重点集中在ASFV鉴别和诊断上。王志亮团队早在2012年就将关注点放在了ASF的诊断上，在涉及的CN102967703A中，将表达的结构蛋白P72、K205R、P54、A104R免疫动物后分离获得ASFV抗原多因子血清并将其用于ELISA诊断。该团队通过获得血清而建立的ELISA检测方式有利于解决当时我国无法生产ASF诊断试剂盒的瓶颈，并且该检测方式有助于ASF的诊断、监测。而吴晓东团队则是聚焦于核酸层面的检测，提供了一种ASFV P72基因的焦磷酸测序技术，通过设计ASFV特异性引物及焦磷酸测序引物，进行PCR和电泳扩增检测特异性引物扩增片段长度，然后进行焦磷酸测序反应并根据PCR扩增及焦磷酸测序结果判定样品中是否存在ASFV。到2019年，中国动物卫生与流行病学中心及其分中心的专利申请量激增，同时在ASF鉴别和诊断方面的技术也在不断更新。针对ASFV强弱毒的鉴别，CN110878377A中公开了以ASFV的P72、MGF和CD2V基因序列为基础，设计引物与探针并建立的检测技术。为了达到快速精准鉴别ASF的目的，CN110129485A提供了联合等温扩增技术、CRISPR-Cas12a酶以及特异性切割ASFV P72基因序列的向导RNA切割体系，通过荧光信号即可观察的检测系统。为进一步提高检测的快速性和特异性，CN110453012A、CN110438265A公开了基于重组酶介导的等温扩增法检测多种基因型ASFV的检测技术。而CN110735006A则提供了ASFV的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法，其不仅特异性高并且样品抽提以及检测最快能在2 h完成。除此之外，中国动物卫生与流行病学中心及其分中心在疫苗制备方面也有了突破，童光志团队针对ASF以及猪繁殖与呼吸综合征实现“一针防两病”的目的，制备了表达ASFV蛋白的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒并研发了全新的ASFV疫苗，以此为思路，其先后研发了表达ASFV p30、p12、p17、p54蛋白与重组猪繁殖与呼吸综合征病毒。同时，在CN110551695A以及CN110093324A中，也基于病毒疫苗的疫病防治思路，分别获得了ASFV SY18分离株的四基因缺失弱毒株以及获得了中国流行株Pig/CN/HLJ/2018的MGF360-505R缺失和CD2V与MGF360-505R联合缺失的基因缺失病毒并将其用于ASF疫苗的制备。除了病毒疫苗以外，步志高团队还关注了ASFV的T细胞抗原多肽，筛选出了ASFV p30、p54、p72以及CD2v重要结构蛋白的细胞免疫抗原优势表位，为ASFV多肽载体疫苗的研发提供了保障。
除了中国动物卫生与流行病学中心及其分中心以外，以中国检验检疫科学研究院、深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心、天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心、中国农业科学院兰州兽医研究所等为代表的科研院所也在ASF技术研发中有了新的技术发展，其中中国检验检疫科学研究院提供了保藏号为CGMCC No.14316的能稳定表达ASFV P54蛋白的稳定单克隆vero细胞系。该细胞系稳定性好，培养条件简单并能应用于产业，能将其作为有效的细胞模型或病毒感染模型而应用，这在ASFV致病机理研究以及检测方面有广泛的应用前景。此外，除了前述的应用血清进行病毒检测以外，深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心还着眼于IgY、单克隆抗体的研发，并将其用于病毒鉴别当中。在以华南农业大学以及扬州大学为代表的高校中，华南农业大学的研究内容注重于病毒鉴别，而扬州大学的研发技术内容则更多涉及疫苗研发，尤其是扬州大学以腺病毒为基础进行了大量研究，例如利用重组腺病毒表达质粒pAD?CP204L或者pAD?E183L转染HEK293细胞获得了直接感染真核细胞的重组腺病毒，这为研究基于表达CP204L以及E183L的腺病毒载体疫苗打下了坚实基础。此外，陕西诺威利华生物科技有限公司、杭州艾替捷英科技有限公司等技术研发企业则更多集中在病毒分离、病毒检测装置以及试剂盒研制方面。
小结
整体来看，我国ASF相关技术专利近年来呈爆发式增长，表明我国该领域的研发具有足够的实力和巨大的潜力。申请人涉及面广，涵盖科研院所、高校以及企业等多个主体；研究核心各有侧重，科研院所和高校侧重于基础技术的探索和研发，而企业则偏重于技术和产业化的有效结合。从我国重要申请人以及研发技术可以看出，我国ASF技术专利正在不断得到创新和改进。随着我国ASF疫情防控重要性和紧迫性的日趋增加以及研究手段的日益更新，可以预期科研院所、高校以及企业等各申请人在该领域中的研究将会更加活跃。
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