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中小规模猪场免疫程序制定探讨
杨红梅 ，刘根新，达 奎，贾万臣，张 玺，郭志明，孙月华
(甘肃畜牧工程职业技术学院，甘肃 武威 733006)
摘 要：通过调查分析甘肃省河西地区中小规模猪场的免疫接种程序和常发传染病，笔者所在项目组制定了合理的免疫程序，并进行了抗体检测。选择3家中小规模猪场中处于不同生长阶段的猪各60头，按所制定的免疫程序接种疫苗，1个月后采集血样并分离血清，监测猪瘟、猪口蹄疫、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸障碍综合征的病毒抗体。结果发现猪瘟病毒、猪口蹄疫病毒、猪伪狂犬病病毒gB基因缺失株的抗体合格率超过95％，猪伪狂犬病病毒gE基因缺失株抗体为0.00，猪繁殖与呼吸综合征的病毒抗体水平较低，但符合国家规定的标准，说明该免疫程序能帮助中小规模猪场有效地预防上述4种疾病。
关键词：猪瘟；猪口蹄疫；免疫接种程序；抗体监测随着我国规模化、集约化养猪的快速发展，猪群中常见传染病的种类和发病量不断增加，尤其是猪繁殖与呼吸障碍综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)、猪圆环病毒病、非洲猪瘟等免疫抑制性传染病，已经严重影响了养猪业的健康发展，降低了猪场的经济效益。因此，规模化猪场要有效预防传染病的发生，提高生产效益，制定合理的免疫程序，进行预防性免疫接种势在必行。
笔者通过调查分析甘肃省河西地区中小规模猪场免疫接种的程序和常发传染病，探讨并制定了适用于中小规模猪场的免疫程序，并进行抗体监测，根据监测结果完善免疫程序，使其更加合理，从而防制和减少中小规模猪场传染病的发生，提高经济效益。现将本次为河西地区中小规模猪场量身定制免疫接种程序的过程及结果汇报如下，以供养猪生产者在控制猪场常规传染病的过程中借鉴，从而最大限度地控制发病率和死亡率，提高生产经济效益。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 疫苗
猪瘟(classical swine fever，CSF)细胞苗来自广东永顺生物制药有限公司，猪乙型脑炎疫苗、猪细小病毒病疫苗由中农威特生物科技有限公司提供，猪口蹄疫(foot-and-mouth disease，FMD)多价苗由内蒙古金宇生物科技有限公司生产，猪圆环病毒2型灭活疫苗、猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea，PED)弱毒苗、PED灭活苗、大肠杆菌三价灭活苗、猪伪狂犬病(porcine pseudorabies，PR)基因缺失株疫苗均购自武汉科前生物股份有限公司，PRRS弱毒疫苗、支原体灭活疫苗从硕腾生物制药有限公司采购。
1.1.2 检测试剂盒
CSF病毒酶标抗体检测试剂盒、PR病毒gB酶标抗体检测试剂盒、PR病毒gE酶标抗体检测试剂盒、PRRS病毒酶标抗体检测试剂盒均购自上海博研生物科技有限公司；猪FMD病毒O型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒购自中国农业科学院兰州兽医研究所。
1.1.3 试验猪场和试验猪
选择3家有一定代表性的中小规模猪场，随后从这些猪场中各选择60头处于不同生长阶段的猪，按所制定的免疫程序接种疫苗，1个月后（仔猪二免）采集血样，分离血清后备用。
1.2 调查与分析
通过现场访谈和问卷调査，抽样调查了甘肃省河西地区具有代表性的中小规模猪场的免疫程序和常发病，并统计分析了调查资料。结果发现，河西地区85％的中小规模猪场有较合理的免疫程序，主要接种的疫苗为CSF疫苗、猪FMD疫苗、PR疫苗、PED疫苗、猪传染性胃肠炎(transmissible gastroenteritis，TGE)疫苗、仔猪黄白痢疫苗等；常发传染病主要是猪喘气病、猪链球菌病、PED、仔猪黄白痢、猪细小病毒病等，受威胁的传染病主要是PRRS、非洲猪瘟(African swine fever，ASF)、猪嗜血杆菌病等。
1.3 中小规模猪场免疫程序的制定
根据对河西地区具有代表性的中小规模猪场目前采用的免疫程序、常发传染病和受威胁传染病的调查结果，与项目合作单位共同探讨并制定了免疫程序，详见表1。
所有后备猪群接种疫苗后需抽样监测，监测合格后才能配种。
1.4 血清收集与抗体监测
1.4.1 待检血清
按以上免疫程序对所选择3家猪场的各 60头猪接种疫苗，接种1个月后（仔猪二免）对各家猪场按种公猪10份、母猪20份、仔猪15份和育肥猪15份的数量采集血样，合计180份血样，血样经自然析出或离心分离后收集血清，于－20 ℃保存备用。
1.4.2 抗体监测和结果判断
所有抗体监测实验方法和结果判定均按照ELISA检测试剂盒说明书操作进行。
3家猪场5种抗体监测结果见表2；不同生长阶段猪的5种抗体监测结果见表3。
2 结果与分析
按制定的免疫程序对3家猪场各60头处于不同生长阶段的猪接种疫苗后，经抗体监测结果显示，免疫猪的CSF、FMD、PR-gB的抗体合格率超过95％，PR-gE抗体均为0.00％，PRRS的抗体水平较低，但符合国家规定的标准，说明所制定的免疫程序能对猪瘟、猪口蹄疫、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸障碍综合征产生良好的免疫效果。尽管如此，也应注意是否存在猪瘟、猪伪狂犬病等疫病的野毒株感染情况，这需要结合病原学检测及临床症状进行综合评估，并根据评估结果采取相应措施。
根据对处于不同生长阶段的猪体内抗体的监测可发现，种公猪、母猪、仔猪和育肥猪按所制定的免疫程序接种疫苗后，公猪的猪瘟、猪口蹄疫、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸障碍综合征的抗体阳性率达100％；母猪的猪瘟、口蹄疫、猪伪狂犬病(PR-gB)的抗体阳性率达96％以上，猪繁殖与呼吸障碍综合征的抗体阳性率达91.67％；仔猪和育肥猪的猪瘟、猪口蹄疫、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸障碍综合征的抗体阳性率略低于种公猪和母猪的，但均符合要求。
在预防猪繁殖与呼吸障碍综合征上，我国以前常采取强制免疫的措施，但大部分猪场存在隐性带毒情况，不接种疫苗也能保持疫情平稳，但一旦接种反而会促使发病。2017年农业农村部取消PRRS强制免疫，部分猪场停止免疫接种，导致部分猪场的PRRS病毒抗体水平不高。建议先进行抗原检测，后确定免疫程序，开展抗体监测，完善免疫程序。
3 讨论
本试验按表1中免疫程序进行免疫，一个月后监测抗体，免疫猪的CSF、FMD、PR-gB的抗体合格率超过95％，PR-gE抗体均为0，PRRS的抗体阳性率约90％。陈南颖等对部分规模化猪场主要疫病抗体与监测分析中部分规模化猪场抽样进行抗体监测发现，CSF抗体阳性率最高为97.78％，FMD抗体阳性率最高为97.78％、PR-gB抗体阳性率最高为100％、PR-gE抗体阳性率最高为0、PRRS抗体阳性率最高为97.78％。李伟等猪O型和A型口蹄疫二价合成肽疫苗免疫抗体的检测评估研究表明，首免后30 d，猪O型及A型口蹄疫抗体合格率分别为100％、95％,二免后15 d、45 d抗体合格率均可达到100％,二免后90 d、120 d抗体台格率仍在95％以上。姚敬明等猪伪狂犬病基因缺失株疫苗免疫试验证明，种猪免疫抗体合格率达100％,仔猪49日龄前抗体合格率达100％, 75日龄后抗体逐渐降低。农业农村部印发的《2013年国家动物疫病强制免疫计划》和《2021年国家动物疫病强制免疫计划》分别要求高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征、猪瘟免疫抗体合格率应常年保持在70％以上，口蹄疫免疫抗体合格率应常年保持在70％以上，综上所述本文中的免疫程序对中小规模养猪有一定的指导意义。
本试验按表1中免疫程序进行免疫，一个月后监测抗体，公猪的猪瘟、猪口蹄疫、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸障碍综合征的抗体阳性率达100％；母猪的猪瘟、猪口蹄疫、猪伪狂犬病(PR-gB)的抗体阳性率达97％以上，猪繁殖与呼吸障碍综合征的抗体阳性率达91.67％；仔猪和育肥猪的猪瘟、猪口蹄疫、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸障碍综合征4种疾病的抗体阳性率略低于种公猪和母猪。覃军等规模化猪场主要疫病抗体监测与免疫效果分析研究表明，哺乳母猪、哺乳仔猪、保育猪、育肥猪和妊娠母猪的猪瘟抗体100％合格，哺乳母猪、哺乳仔猪、保育猪、育肥猪和妊娠母猪的猪口蹄疫血清抗体83.8％合格。贺俊畅等在规模化猪场猪瘟免疫程序制定探索中研究结果表明，母猪首免后4周监测抗体合格率达93％。本试验结果与文献中的基本相符，个别结果抗体阳性率偏高，与免疫后采样时间有一定的关系，综上所述说明本文中免疫程序较合理。
新生仔猪在接种疫苗时，要考虑是否受母源抗体的干扰。如果母猪在配种前和妊娠阶段接种了疫苗，且母猪相应疫苗的抗体水平较高，所产仔猪通过吃初乳可获得相应的抗体，不宜过早接种相应的疫苗。张一鸣的猪瘟苗免疫效果试验研究表明猪瘟STK细胞苗、ST细胞苗、猪瘟脾淋组织苗在仔猪二免后25 d（90日龄）进行抗体监测，抗体合格率达100％，贺俊畅等在规模化猪场猪瘟免疫程序制定探索中仔猪首免受母源抗体干扰研究结果表明，仔猪在25日龄首免，65日龄二免具有指导意义，本文表1中仔猪接种的猪瘟细胞苗免疫程序基本与其研究相符，并且二免一个月后测抗体，仔猪猪瘟抗体合格率在96.67％，进一步证明对中小规模养猪有一定的指导意义。
在制定免疫程序和实施免疫接种过程中，除把好疫苗质量关外，还需考虑不同种类的疫苗之间的协同作用、拮抗作用等。许建康的生猪同时注射猪瘟、口蹄疫二种疫苗试验免疫效果分析结果表明分点同时注射猪瘟活疫苗和猪O型口蹄疫灭活疫苗，28 d后采血测抗体，猪瘟抗体阳性率86.5％，猪口蹄疫抗体阳性率87％，邵国青曾指出，同时注射猪瘟、猪口蹄疫二种疫苗，能够增强二种疫苗的免疫效果，存在协同作用。本文借鉴参考文献中研究结果，免疫程序制定过程中育肥猪150日龄接种猪瘟细胞苗和猪口蹄疫多价苗，颈部左右两侧分别进行肌内注射，育肥猪140日龄接种乙脑疫苗和猪细小病毒病疫苗，颈部左右两侧分别进行肌内注射。免疫接种后临床上未见不良反应和这两种疾病的发生，还需进一步抗体监测以完善免疫程序。
4 结论
通过对河西地区中小规模猪场免疫接种情况、当地常发传染性猪病进行的调查、统计和分析，本试验重新制定了免疫接种程序，并在3家有代表性的规模化猪场不同生长阶段的猪上应用，通过血清抗体水平分析，证明该程序能有效预防猪瘟、猪口蹄疫、猪伪狂犬病和猪繁殖与呼吸障碍综合征。由于受疫情、经济、地域等条件的限制，免疫程序中其他疫苗免疫后血清中抗体未测定，有待进一步研究和探讨。中小规模猪场制定科学的免疫程序需要综合考虑猪场的饲养管理水平、生物安全、猪群的健康状况、药物使用情况等诸多因素，猪场的免疫程序并不是一成不变的，还要根据当地猪传染病的流行情况、猪群常发传染性疾病的状况以及抗原和抗体监测结果进行及时的调整，并进行不断的探讨和完善，才能真正做到提高中小规模猪场生产经济效益。
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基金项目：武威市2020年度第二批市列科技计划项目(编号：WW2002015)作者简介：杨红梅(1975— )，女，副教授，从事畜牧兽医教学和研究工作；E-mail：291919391@qq.com
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