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PRRSV类NADC30感染状态下母猪血液内毒素水平变化规律
赵星岚，梁嘉婧，李亚杰，王硕，张梦然，胡文翔，吴晨晨*
（西北农林科技大学动物医学院，陕西杨陵712100）
猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）俗称猪蓝耳病，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种严重危害全球养猪业的疾病，妊娠母猪易感。近年来，我国陆续报道PRRSV类NADC30毒株的流行和类NADC34毒株的出现，给猪场PRRS防控带来新的挑战。
试验主要监测了感染猪蓝耳病的猪场和健康猪场，通过分析2个猪场内毒素水平的变化规律，进一步确诊内毒素对母猪繁殖性能的影响，以期明确猪只感染猪蓝耳病病毒后混合感染的细菌对猪场繁殖性能的影响，也为以后规模化猪场猪蓝耳病的监测提供科学依据和理论基础。
材料与方法
试验动物试验选择了西北地区生物安全基础较好的2个同等规模的母猪场，均是按照猪蓝耳病阳性稳定猪场进行管理，免疫程序基本一致。猪场1母猪血液检测检出PRRSV类NCDC30阳性，猪场2为猪场1的正常对照猪场，猪血液中未检测出任何猪蓝耳病病原。分别选取2个猪场妊娠3周、6周、9周、12周和15周的母猪，每场各6头进行前腔静脉采血，每头5mL。收集血浆进行猪蓝耳病抗原、抗体水平的监测以及内毒素、降钙素原和超敏C蛋白水平的分析，同时，实时记录母猪妊娠周龄的流产率等情况。
主要试剂采集猪血及血清检测实验操作中所使用到的相关化学试剂见表1。
主要仪器设备采集猪血及血清检测实验操作中所使用到的相关仪器设备见表2。
实验开始前20min从冰箱中将备检血清应用ELISA方法检测各个妊娠阶段母猪的猪蓝耳病抗体、内毒素（LPS）、降钙素原（PCT）和超敏C蛋白（hs-CRP）。
数据统计与分析实验数据由软件ELISACalc回归拟合计算程序计算获得，采用SPSS26.0软件中的One-WayANOVA进行分析，对比各个母猪场间同阶段数据的差异性。a,b,c代表不同字母的值差异显著（P＜0.05），利用软件GraphPadPrism5.0作图，所制作的图像以平均数（X）±标准差（SD）形式表示。
结果
猪场1与猪场2猪繁殖与呼吸综合征的病原、抗体检测结果图片
从表3结果发现，猪场1母猪与猪场2母猪，各个周龄妊娠母猪检测抗体水平均呈阳性；单一从猪场2的数据看，猪蓝耳病疫苗免疫后猪群抗体阳性率为100%，揭示免疫猪蓝耳病疫苗后猪群可以产生抗体，鉴于猪场1检测时已经确认该猪场有PRRSV类NADC30检出，据此不能完全判断猪场1的抗体阳性率100%是正常免疫导致的，可能存在PRRSV类NADC30感染后导致的抗体出现，需要进一步评估。
对送检的样本进行PRRSV类NADC30及PRRSV-欧洲株的检测（见表4），猪场1妊娠3周、6周、9周、12周、15周母猪的血清中均检测出PRRSV类NADC30病原，PRRSV-欧洲株未检出；猪场2作为对照组PRRSV类NADC30及PRRSV-欧洲株均未检出，提示目前的猪场1存在PRRSV类NADC30感染的情况。
妊娠母猪阶段流产率的统计
对猪场1妊娠母猪流产情况按照妊娠0—3周、4—6周、7—9周、10—12周、13周以上进行统计（见图1）。数据结果说明猪场流产主要集中在妊娠中后期的母猪，同时对于妊娠早期（6周前）的母猪也有一定的影响，流产率占比为16.62%。
对2个猪场的妊娠母猪的LPS的含量进行检测分析（见图2），数据证明革兰氏阴性菌在猪蓝耳病发病期间可能加剧了猪场母猪的发病流产的程度，与猪场2妊娠正常母猪对照群比较，差异也十分显著（P＜0.05），进一步证实革兰氏阴性菌会加剧猪蓝耳病感染后的流产程度。
对猪场1和猪场2的母猪群的hs-CRP的含量进行检测分析，发现2个猪场的母猪在妊娠3周龄、6周龄、9周龄、12周龄和15周龄血液hs-CRP的含量之间无显著性差异（P＞0.05）。对猪场1和猪场2的母猪群PCT的含量进行监测分析，发现猪场1流产母猪血液PCT的含量显著高于同群未流产母猪，同样流产母猪血液PCT的含量也明显高于猪场2的对照母猪群血液PCT的含量；与此同时，妊娠9周龄血液中猪降钙素原的含量显著高于同猪场其他妊娠周龄的母猪群（P＜0.05），这与LPS的检测结果的趋势一致，进一步证实革兰氏阴性菌会加剧猪蓝耳病感染后的流产程度。
讨论
在本案例中，通过前期的病原筛查已经确认了猪场1有PRRSV NADC30的阳性检出，同时猪群也出现明显的流产症状，这对于分析猪蓝耳病感染后的内毒素的变化提供了具有直接生产指导意义的数据分析基础，与此同时，在同地区的未检出PRRSV NADC30阳性的猪场2在猪场设计工艺、生物安全基础、饲养规模、饲养管理方式，生产节律以及免疫程序都是基本一致的，这也为本次科学分析内毒素在猪蓝耳病感染中的继发影响最大程度提供了客观的可比性。
一个有效的监测指标在生产实践过程中对疾病的早期发现、早期诊断具有明显的实际意义和经济意义，因此选择灵敏度高、稳定、快速、典型的监测指标一直是一线生产者、兽医等从业人员关注的重点。内毒素、超敏C蛋白和降钙素原这3个指标可以快速地进行猪场疾病的分型以及对疾病发展程度进行初步准确的判断，结合猪场的实际情况，以及后续的实验室检测结果，更加精准地进行疾病的防控。
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