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猪群PEDV、TGEV、GARV感染状况调查与防控策略
姜鑫1，范学伟1，王鉴波2，李晓娟1，陆子秀1，李树东1
（1.黑龙江农业经济职业学院，黑龙江牡丹江157041；2.牡丹江市动物卫生监督所，黑龙江牡丹江157041）
近年来，全国各地猪场不同程度暴发产房仔猪病毒性腹泻，给猪场造成的损失巨大，特别是规模化猪场损失更是惨重。本研究团队选择黑龙江省暴发产房仔猪腹泻猪场进行调查与分析，选择发病猪场外引后备猪、场内的基础母猪和育肥猪三个群体对其分泌物进行病原检测追踪，探明猪场内部猪群PEDV、TGEV、GARV带毒和排毒状况，明确猪场腹泻感染源头和感染途径，为猪场防控新生仔猪病毒性腹泻提供参考依据。
01
猪群调查
1.1材料与方法
对猪场后备母猪、基础母猪、育肥猪3个群体分别选取50头采集口鼻拭子、肛门拭子。将口鼻拭子、肛门拭子群内混样，5头混成1个检测样本，每个群体制作成10份混样，总计30份混样。采用实时荧光定量PCR检测方法对30份混样进行核酸检测。
1.2RNA提取
利用核酸提取试剂盒对30份样品进行RNA核酸提取，分别获得50μL核酸模板。
1.3PEDV/GARV/TGEV核酸检测
取PEDV/GARV/TGEV检测试剂盒，解冻，离心，扩增。设置扩增程序如表1。
结果判定：被检测样品检测结果中FAM通道Ct值≤40，扩增曲线为典型的S型扩增曲线，且ROX内标通道Ct值≤35，报告PEDV核酸阳性；被检测样品检测结果中HEX通道Ct值≤40，扩增曲线为典型的S型扩增曲线，且ROX内标通道Ct值≤35，报告GARV核酸阳性；被检测样品检测结果中CY5通道Ct值≤40，扩增曲线为典型的S型扩增曲线，且ROX内标通道Ct值≤35，报告TGEV核酸阳性。
1.4检测结果
检测结果见表2。
1.5分析与讨论
后备猪检测结果PEDV有效样本10份，GARV有效样本10份，TGEV有效样本9份；基础母猪检测结果PEDV、GARV、TGEV有效样本9份；育肥猪检测结果PEDV、GARV、TGEV有效样本9份。
猪场3个群体口鼻分泌物进行PEDV、TGEV、GARV检测，结果都检测到一定比例的阳性样本（见图1），后备猪PEDV、TGEV、GARV阳性比例高于基础母猪和育肥猪，后备猪阳性比例高，说明后备猪进生产群有较大传播风险；3个群体PEDV、TGEV、GARV感染且正在通过分泌物向场内排毒，造成场内病毒循环；基础母猪排毒造成产房环境污染，如果猪群PEDV、TGEV、GARV特异性免疫力差，新生仔猪难以获得母源抗体，加上新生仔猪先天性免疫力低下，母猪通过乳汁排毒和被母猪排泄物污染的产床双重压力下，势必会造成新生仔猪直接接触到病毒而感染。
检测数据中TGEV和GARV均检测到较高的阳性比例，说明TGEV和GARV是造成新生仔猪腹泻重要因素。值得注意的是许多文献报道TGEV感染，造成新生仔猪表现腹泻和呕吐症状；GARV多引起10日龄以上的顽固性腹泻且病死率一般30%~40%。本次检测的猪场仔猪腹泻只发生在出生后2—3日龄，未见呕吐等症状，且场内其他阶段猪群没有任何临床发病表现，可以说明引起新生仔猪腹泻的病原不是强毒，只引起先天性免疫力低的新生仔猪发病。
检测数据显示基础母猪群体带毒且排毒的可能性非常大，这要调查猪场是否有过顽固性腹泻的发病史。如果没有发病史则后备猪引种带来的传播风险最大，如果猪场有发病史在防控体系不完善的情况下，有可能是母猪中带毒猪排毒造成新生仔猪腹泻。
育肥猪PEDV、TGEV未检测到阳性样本，在育肥猪分泌物中检测到1份GARV阳性样本，但是育肥猪群没有发病症状，说明中大猪对GARV有较强的抵抗力。
02
总结
采集猪场引进后备猪、场内基础母猪、育肥猪的30份口鼻和肛门拭子进行PEDV、TGEV、GARV病原调查与分析，证明引进后备猪和场内基础母猪两个群体感染PEDV、TGEV、GARV且向环境中排毒，造成病毒场内循环并造成产房环境污染；带毒猪是猪场新生仔猪病毒性腹泻的主要传染源。加强管理及时筛选并淘汰带毒猪、阻断病毒循环、增强全群的特异性免疫力，是控制猪场新生仔猪病毒性腹泻的重要手段。
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