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摘要：试验旨在研究发酵饲料对生长育肥猪生长性能与免疫力的影响。选取100头健康、体重（23.21士2.13）kg生长育肥猪（公、母各半），随机分为2组，每组5个重复，每个重复10头猪。对照组为基础日粮，试验组为90%基础日粮+10%乳酸菌发酵饲料。试验期30d。结果显示，试验组生长育肥猪的末重、平均日增重、平均日采食量均显著高于对照组（P<0.05），料重比显著低于对照组(P<0.05)试验组生长育肥猪的粗蛋白、能量、干物质、粗纤维、粗脂肪表观消化率均显著高于对照组(P<0.05)。试验组生长育肥猪血清总蛋白（TP）、球蛋白(GLB)含量显著高于对照组(P<0.05)，尿素氮(BUN)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)，葡萄糖（GLU）含量以及谷丙转氨酶(ALT)活性显著低于对照组(P<0.05)。与对照组相比，试验组生长育肥猪血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)含量显著升高(P<0.05)，白细胞介素-1β（1L-1β）、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著降低(P<0.05)；总杭氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶(SOD)活性显著升高(P<0.05)，结合珠蛋白(HP)、丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05)。研究表明，发酵饲料可有效提高生长育肥猪的生长性能，增强机体蛋白质、脂肪合成与代谢能力，调节机体免疫功能。
乳酸菌繁殖代谢的过程中会产生多种有机酸、酶、多糖等物质，有效降低禽畜饲料pH值，提高禽畜饲料的营养价值。研究发现，使用乳酸菌发酵禽畜饲料可有效降解禽畜饲料中抗营养因子，调节肠道菌群，提高机体对饲料营养成分的吸收率，提高禽畜的免疫水平。研究发现，乳酸菌发酵饲料对增强禽畜的生长性能具有显著效果。副干酪乳酸杆菌作为乳酸杆菌中的主要分支之一，其产酸、耐酸、抑菌等能力较强，能够提高仔猪的生长性能，改善机体的免疫力。本研究以副干酪乳酸杆菌发酵饲料，研究乳酸菌发酵饲料对生长育肥猪的生长性能与免疫力的影响，为乳酸菌固态发酵饲料的应用提供参考。
1材料与方法
1.1试验菌种
乳酸菌制剂为前期分离的副干酪乳酸杆菌菌株，活菌数为4×1010CFU/g。
1.2试验日粮
试验所用基础日粮根据NRC(2012)20~50kg猪生长所需营养配制。以基础日粮为底物，加入基础日粮0.8倍的水，副干酪乳酸杆菌接种比例为1/10000，混匀，密封发酵，制成乳酸菌发酵饲料。发酵温度为37℃，发酵48h，饲料中副干酪乳酸杆菌数为1.656×1010CFU/g。试验日粮由90%基础日粮+10%发酵饲料制成。试验日粮组成及营养水平见表1。
1.3试验设计及饲养管理注:1.预混料购自杭州宝积生物科技有限公司，2.营养水平均为计算值。
选取100头健康、体重(23.21士2.13)kg生长育肥猪(公、母各半)，随机分为2组，每组5个重复，每个重复10头猪。对照组育肥猪饲喂基础日粮，试验组育肥猪饲喂90%基础日粮+10%乳酸菌发酵饲料。
试验期30d。试验期间，试验猪自由采食、饮水，按照养殖场规定定期对生长育肥猪进行免疫接种。
1.4测定指标及方法
1.4.1生长性能
试验开始和结束，对试验生长育肥猪进行称重，每天收集并记录采食量，计算平均日增重、平均日采食量、料重比。
平均日增重=(末重一初重)拭验天数(1)
平均日采食量=总采食量/试验天数(2)
料重比=平均日采食量/平均日增重(3)
1.4.2养分表观消化率
试验最后2d，在日粮中添加0.3%三氧化二铬作为指示剂，每日采集试验生长育肥猪100g粪便样品，连续采集2d混合，-20℃保存，用于测定饲料和粪便中干物质、粗蛋白质和总能的含量，计算养分表观消化率。
养分表观消化率=(食入营养物质量-对应粪中营养物质量)/食入营养物质量×100%（4）1.4.3血清指标1.4.3.1血清生化指标
每个重复随机选取5头猪，静脉采血5mL用于检测血清，血清于-80℃冰箱中保存。血清中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素氮(BUN)、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）,葡萄糖(GLU)、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、葡萄糖(GLU)、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）按照试剂盒(南京建成生物工程研究所)说明书进行测定。
1.4.3.2免疫指标
采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定结合珠蛋白(HP)、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A(IgA),免疫球蛋白M（IgM）、白细胞介素-1β（1L-1β）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量。试剂盒购自美国BETHYL公司。
1.4.3.3抗氧化指标
测定总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛（MDA），操作方法按照试剂盒(合肥莱尔生物科技有限公司)说明书。
1.5数据统计与分析
采用SPSS22.0进行分析，t检验进行多重比较。结果以“平均值士标准差”表示，P<0.05表示差异显著。
2结果与分析
2.1发酵饲料对生长育肥猪生长性能的影响(见表2)由表2可知，试验组生长育肥猪的末重、平均日增重、平均日采食量均显著高于对照组(P<0.05)，料重比显著低于对照组(P<0.05)。
2.2发酵饲料对生长育肥猪养分表观消化率的影响(见表3)注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P<0.05)，相同字母或无字母表示差异不显著(P>0.05)；下表同。
由表3可知，试验组生长育肥猪的粗蛋白、能量、干物质、粗纤维、粗脂肪表观消化率均显著高于对照组(P<0.05)。
2.3发酵饲料对生长育肥猪血清生化指标的影响(见表4)由表4可知，试验组生长育肥猪血清TP、GLB含量显著高于对照组(P<0.05)，血清BUN、TC、TG、GLU含量以及ALT活性显著低于对照组(P<0.05)。两组生长育肥猪血清ALB含量和AST活性差异不显著(P>0.05)。
由表5可知，与对照组比，试验组生长育肥猪血清IgG、IgA、IgM含量显著升高(P<0.05)，IL-Ip、IL-6、TNF-α含量显著降低(P<0.05)，T-AOC及SOD活性显著升高(P<0.05)，HP、MDA含量显著降低(P<0.05)。2.4发酵饲料对生长育肥猪血清免疫、抗氧化指标的影响(见表5)
3讨论
3.1发酵饲料对育肥猪生长性能的影响
乳酸菌是动物肠道中的重要菌群，对维持动物健康水平、调控机体免疫功能方面具有重要影响。乳酸杆菌广泛存在于动物体表与体内，在动物体内可以竞争性抑制有害微生物侵袭与侵染，通过分解动物消化道内难以吸收的成分并生成各种消化酶，增强动物对营养物质的消化吸收能力;将动物消化道与饲料中的非蛋白氮吸收并生成各种氨基酸和维生素;提高动物机体的免疫能力。研究发现，在禽畜日粮中加入乳酸菌可通过促进猪的肠道发育，调节猪的肠道菌群，促进猪对饲料中营养成分的吸收，有效提高猪的生长性能。本研究发现，使用发酵饲料生长育肥猪对饲料的消化率与利用率更高。
3.2发酵饲料对育肥猪血清生化指标的影响
血清生化指标能够在一定程度上反映机体的代谢水平和器官功能。肝脏是合成血清总蛋白的场所，血清TP可作为机体的蛋白质吸收水平指标，而由浆细胞分泌的球蛋白可作为机体的免疫能力的判断指标之一。本研究发现，发酵饲料组猪血清TP、GLB含量明显高于对照组，表明发酵饲料能够提高生长育肥猪合成蛋白质能力。血清TC可反映肝脏对脂肪代谢水平。本研究发现，发酵饲料组生长育肥猪的血清TC含量明显低于对照组，表明发酵饲料可增强生长育肥猪的脂肪代谢能力。血清BUN是机体蛋白质代谢最终产物，当动物体内蛋白质代谢良好，血清BUN应处于低水平或下调状态。本研究发现，发酵饲料组生长育肥猪的血清BUN含量明显降低，表明发酵饲料可促进生长育肥猪的蛋白质代谢。血清ALT和AST可以反映机体肝脏功能，其活性过高时表明肝脏细胞可能受到损伤。本研究发现，发酵饲料组生长育肥猪血清中AST和ALT活性较低，表明发酵饲料可在一定程度上保护生长育肥猪的肝脏，进而增强蛋白质合成与吸收能力，提高生长育肥猪的生长性能。
3.3发酵饲料对生长育肥猪血清免疫指标的影响HP是一种急性期反应蛋白，与禽畜感染、炎症、免疫功能等与免疫力相关的疾病关系密切，猪血清HP含量越高，表明机体状态越差。本研究发现，发酵饲料组猪血清HP含量较低，表明机体更健康。免疫球蛋白作为机体免疫功能的特异性指标，可有效反映机体的免疫能力。发酵日粮可改善生长育肥猪体内的免疫球蛋白水平，提高免疫力。本研究发现，使用发酵饲料后，生长育肥猪血清内的HP、IgG、IgA、IgM含量均得到明显改善。IL-6可诱导免疫B、T细胞增殖分化，作为一种炎症标记物参与机体的免疫；TNF-α由巨噬细胞产生，能够激活淋巴细胞，是一种作用力极强的抗感染细胞因子。Bleau等研究表明，乳酸菌培养液中具有大量的胞外多糖，可显著提高巨噬细胞对外源病毒、细菌等吞噬能力，降低IL-6和TNF-α含量。本研究发现，发酵饲料组猪血清IL-1p、TNF-a,IL-6含量均更低，表明发酵饲料可明显降低炎症反应，提高机体免疫力。
当动物机体受到损伤或刺激后，动物机体内清除自由基的酶促系统发生针对性反应，以维持动物机体氧化与还原的动态平衡。MDA是动物机体氧化反应的终产物，MDA水平上升表明机体内氧化反应激烈程度增强，从而损伤动物机体细胞。SOD是参与动物机体内氧化一还原反应的重要抗氧化酶，T-AOC是反映动物机体抗氧化系统功能状况的综合性指标。体内T-AOC、SOD、GSH-Px活性升高可增强机体抗氧化能力。李薛强等发现，发酵饲料可显著提高母猪血清中T-AOC、GSH-Px活性，与本试验结果相似。
4结论
本研究发现，发酵饲料可有效提高生长育肥猪的生长性能，增强机体蛋白质、脂肪合成与代谢能力，调节机体免疫功能。
来源：饲料研究
作者：储德胜
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