导读:通常来说,家禽肠道稳定微生物群的建立在10日龄前完成,这些早期定植的微生物菌群不仅能够通过竞争性排斥来阻止病原菌定植,还能通过刺激肠道生长,促进免疫系统的发育成熟,进而改善肠道健康。因此,在家禽生产中益生菌的应用无论是混饲还是饮水方式添加均从雏鸡早期(1日龄)开始。随着胎内注射技术的发展,科研人员考虑是否有可能将益生菌如同马立克氏病疫苗一样通过鸡胚接种,尽早实现益生菌在肠道中的定植。目前相关研究者已取得了一定的进展,是否会成为益生菌应用新模式值得期待。
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2014年,Cargill公司欧洲研发中心的科研人员对可用于胚内接种的益生菌种类、接种胚龄、接种剂量等进行了研究。他们采用7种益生菌产品按照两种不同的剂量接种17.5日胚龄鸡胚,48小时后比较孵化率、体长、胫骨对称性、去卵黄胚胎重、肌胃细菌含量等指标,发现接种益生菌会导致孵化率下降约10%,接种含有产气荚膜梭菌的益生菌制剂会增加胚胎体长,含有乳酸杆菌的益生菌制剂则会提高胫骨不对称性。进一步检测孵化器空气和盲肠样品,从这两种完全不同的环境中均分离到具有活力的屎肠球菌和产气荚膜梭菌,且分别与鸡胚接种细菌相一致。随后,研究人员将这两种细菌接种鸡胚,与之同时出壳的未接种雏鸡饲喂含有这两种细菌的饲粮,3日龄采用106 cfu肠炎沙门菌攻毒。结果显示,无论是胚内接种还是饲粮中添加细菌,1~18日龄的体增重、采食量、饲料转化率、欧洲生长指数都比抗生素(阿普拉霉素)添加组差,但优于无任何添加组。基于以上结果,研究人员确定了胚内接种益生菌(屎肠球菌和产气荚膜梭菌)可以提前至17.5日胚龄,接种部位为羊膜腔,剂量为109cfu/个胚。
2018年,密西西比州立大学的科研人员采用Inovoject system进一步对接种益生菌种类进行了探索。他们将嗜酸乳杆菌、动物双歧杆菌、枯草芽孢杆菌以不同剂量接种18日胚龄羊膜腔,以21日胚龄孵化率和死亡鸡胚情况作为研究指标,结果发现,接种嗜酸乳杆菌和动物双歧杆菌不会影响孵化率,但枯草芽孢杆菌则会显著影响孵化率。
近期,为了解胚内接种的屎肠球菌是否能进入卵黄囊和雏鸡肠道,丹麦Chr. Hansen公司的科研人员同样采用Inovoject system将屎肠球菌M74以1.4×107cfu/个胚的剂量与马立克氏病疫苗同时接种18日胚龄羊膜腔。21日胚龄孵化率检测结果显示,对照组、单独接种马立克氏病疫苗组、屎肠球菌+马立克氏病疫苗组的孵化率差异并不显著。细菌计数显示,1日龄卵黄囊的屎肠球菌平均含量高达8.2×109cfu/g,7日龄为1.5×109cfu/g,1日龄肠道的屎肠球菌平均含量为3.5×108cfu/g,7日龄下降为1.1×107cfu/g,46日龄下降为6.0×10cfu/g。脉冲电场凝胶电泳鉴定屎结果显示,1和7日龄样品屎肠球菌分离率分别为88%和67%。3个日龄的盲肠样品屎肠球菌含量均高于肠道样品,说明屎肠球菌在鸡体内迁移时间较短,并且肠道上消化道高频率的消化液冲洗导致其在盲肠停留的时间更长。因此,研究人员认为胚内接种的屎肠球菌通过胚胎口腔吸收并进入肠道并定居,在雏鸡出壳后仍然存活于肠道组织,这种早期接触益生菌的方式有助于提高雏鸡在孵化场和育成期间的抗病力。
总的来说,益生菌胚内接种还需要从多方面进行深入研究,除了筛选适合的菌株外,与经济效益有直接关系的对孵化率和后代生长性能的影响是重点关注领域,让我们拭目以待。
文章来源:J. E. de Oliveira, E. van der Hoeven-Hangoor, I. B. van de Linde, et al. In ovo inoculation of chicken embryos with probiotic bacteria and its effect on posthatch Salmonella susceptibility[J]. Poultry Science, 2014, 93(4):818-829.
M. D. Triplett, W. Zhai, E. D. Peebles, et al. Investigating commercial in ovo technology as a strategy for introducing probiotic bacteria to broiler embryos[J]. Poultry Science, 2018, 97(2):658-666.
Line Skj?t-Rasmussen, Dorthe Sandvang, Alfred Blanch, et al. Post hatch recovery of a probiotic Enterococcus faecium strain in the yolk sac and intestinal tract of broiler chickens after in ovo injection[J]. FEMS Microbiology Letters, 2019, 366(7): i92-i96.
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