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美研究人员发现非瘟活病毒检测方法


现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2020/8/29 19:24:48 关注:406 评论: 我要投稿

  7月28日,美国农业部农业研究局的研究人员在《viruses》杂志上刊发了一篇文章,文章称研究人员发现了一种检测非洲猪瘟活病毒(ASFV)存在的新方法,该方法可最大程度地减少对活体供血猪只的需求。
  美国农业部农业研究局道格拉斯·格拉杜(Douglas Gladue)博士说:“我们已经鉴定出一种可用于分离和检测非洲猪瘟活病毒的细胞系。这是非洲猪瘟病毒诊断的关键突破和迈出的重要一步。”这个细胞系正是非洲绿猴细胞 MA-104 (ATCC#CRL-2378.1)。
  非洲猪瘟病毒流行株具有高度传染性,在家猪中具有很高的致死性,可导致高达100%的死亡率。目前世界范围内尚无可预防非洲猪瘟(ASF)的疫苗,疫情控制仍依赖于对感染或暴露于病毒环境的猪只进行隔离和扑杀的方法。对临床样本(主要是全血) 中的ASFV的诊断是通过实时聚合酶链式反应 (RT-PCR)进行的,该分子检测方法只可检测非洲猪瘟病毒基因组的一小部分,但无法检测活的传染性病毒。
  病毒分离对于确认病毒活性和病毒全基因组测序是必要的。目前,只能使用原代猪巨噬细胞进行ASF病毒的培养分离。原代猪巨噬细胞的生产非常耗时费力,需要从猪血中收集细胞或从猪肺中分离细胞。在大多数兽医诊断实验室中,这些培养物(原代猪巨噬细胞)通常不易获得。到目前为止,要进行有效的活体ASFV检测,每次诊断都要从活体供体猪中收集血细胞,并且这些细胞只能使用一次。据介绍,非洲绿猴细胞MA-104可以连续复制以创建细胞以备将来使用,还可以冷冻贮藏,从而减少了所需的活体供血猪只的数量。
  非洲绿猴细胞 MA-104常用于猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRS)的诊断和猿猴轮状病毒的培养。非洲绿猴细胞MA-104的倍增时间为72小时,没有特殊的培养基要求,并且易于冷冻。在非洲猪瘟疫情暴发情况下可能需要处理大量临床样品以确定它们是否含有传染性,非洲绿猴细胞MA-104则可以帮助解决这一难题。此外,非洲绿猴细胞MA-104形成清晰的血吸附能力将有助于ASF活病毒的快速诊断。与猪巨噬细胞做为底物相比,非洲绿猴细胞MA-104作为底物能对ASFV感染的细胞进行清晰染色是一个优势。
  猪巨噬细胞具有过氧化物酶活性,这会导致未感染病毒的细胞其背景色变高,从而增加了漏报阳性结果或确认假阳性结果的可能性,使用非洲绿猴细胞MA-104则可以避免这种情况。
  初步研究表明,研究人员能够从受感染的血液样本中分离出ASFV,这表明非洲绿猴细胞MA-104还是从田间样本中直接分离病毒的良好培养物。同时,研究人员证实非洲绿猴细胞MA-104 能够以与原代猪巨噬细胞相当的TCID 50 敏感性支持田间样品中的 ASFV 检测,可以替代原代猪巨噬细胞用于非洲猪瘟活病毒分离。据了解,这项研究技术的专利申请已于今年4月提交,目前该技术已获得许可,美国农业部农业研究局的科研人员将继续进行研究,寻找控制ASFV在全美传播的工具。
文章作者:郝祖慧 牧音     文章编辑:一米优讯     
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