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摘要：为了解北京市鸡毒支原体（Mycoplasma galliscepticum，MG）和滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae，MS）感染情况，2019年从北京市10个区127个养鸡场（户），采集3910份鸡血清样品，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行MG和MS感染抗体检测。结果显示：北京市10个区均有不同程度的MG和MS感染，场群阳性率分别介于78.95%~100%、68.42%~100%，样品阳性率分别介于59.35%~93.13%、50.0%~94.53%，平均场群阳性率分别为89.0%和86.6%，平均样品阳性率分别为79.0%和75.6%；第三季度的场群阳性率和第二季度的样品阳性率最高，第四季度场群阳性率和样品阳性率最低（P<0.01）；110~180日龄的MG样品阳性率、251~320日龄的MS样品阳性率最高，462日龄以上均最低（P<0.01）；规模化商品鸡场的MG和MS场群阳性率和样品阳性率均最高（P<0.01）；蛋鸡的MG和MS样品阳性率均高于肉鸡（P<0.01）。结果表明，北京市MG和MS感染较为严重，第二、三季度高发，110~320日龄鸡群、规模化商品鸡场和蛋鸡群感染尤其严重。结果提示，应采取包括加强生物安全管理、种鸡净化、疫苗预防和药物治疗在内的综合管理措施，有效控制该地区MG、MS的流行。
鸡毒支原体（Mycoplasma galliscepticum，MG）和滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae，MS）是禽类支原体中最具致病性的两个种。MG又称鸡败血支原体，主要引起鸡、火鸡的慢性呼吸道疾病。MG不同菌株的感染性和致病性不同，感染后的主要临床表现为流鼻涕、流眼泪、咳嗽，严重时呼吸困难或张口呼吸，可听到湿性啰音。临床上，MG常常与某些细菌、病毒协同感染，导致呼吸道疾病症状加剧，死亡率升高。MS可感染鸡和火鸡，不同菌株的致病力有所不同，可引起亚临床型上呼吸道感染，以及关节炎和传染性滑膜炎，导致生长发育迟缓及胴体降级，甚至会激发免疫系统抑制。MS感染能使产蛋鸡群的产蛋量和蛋品质下降。目前MG和MS在养殖场（户）中普遍存在，两种病原感染的直接致死率并不是很高，但很难彻底治愈，往往因治疗不力而继发大肠杆菌感染，导致患病鸡体自身黏膜屏障保护力降低，造成免疫失败，继而诱发禽流感和新城疫等疫病，给养殖业造成很大经济损失。MG和MS 除可水平传播外，还可垂直传播。为掌握北京市MG和MS感染情况，2019年从北京市10个区127个养鸡场（户）采集鸡血清样品，采用 ELISA方法进行血清学调查，以期为制定MG和MS感染的控制措施提供依据。
材料与方法
采样
在北京市10个区，按两阶段抽样方法：第一阶段，按95%的置信水平，90%的预期场阳性率，10%的可接受误差，计算抽样场（户）数量。每季度应抽30个场（户），实际每季度平均抽32个场（户），根据养殖场（户）列表，采用系统随机抽样方法选定抽样场（户）。第二阶段，同样按95%的置信水平，90%的预期场内流行率，10%的可接受误差，计算场内抽检鸡只数量。每场（户）应平均抽30只。考虑实际情况，每场平均抽31只，根据鸡只序号，采用系统随机抽样方法选定鸡只。实际随机抽取了127个养鸡场（户）共 910份鸡血清样品，其中规模场3220份、散养户690份。样品涵盖不同日龄的鸡只。
检测方法
对采集的血清样品，采用上述抗体酶联免疫检测试剂盒（敏感性98%、特异性100%）检测。检测步骤及判定标准按试剂盒说明书进行。
数据分析
用Excel整理数据，运用SPSS 23软件进行统计学卡方检验分析。
结果与分析
总体情况
随机抽取的127个养鸡场（户）3910份血清样品中，共检出MG抗体阳性场（户）113个，场群表观阳性率为89.0%，真实阳性率为90.8%（95%CI：85.7%~95.9%）；抗体阳性血清3087份，表观样品阳性率为79.0%，真实阳性率为80.6%（95%CI：79.3%~81.8%）；检出MS抗体阳性场（户）110个，场群表观阳性率为86.6%，真实阳性率为88.4%（95%CI：82.8%~94.0%），抗体阳性血清2956份，表观样品阳性率为75.6%，真实阳性率为77.1%（95%CI：75.8%~78.5%）。具体结果见表1。
不同区情况
北京市10个区均有不同程度的MG和MS感染。其中：MG场群阳性率均在78%以上，最高的达100%，样品阳性率均在59%以上，最高的达93.13%；MS场群阳性率均在68%以上，最高的达100%，样品阳性率均在50%以上，最高的达94.53%（表2）。
不同季度情况
不同季度MG和MS样品阳性率差异极显著（MG：χ2=7487.67，P<0.01；MS：χ2=5829.32，P<0.01）。第四季度的MG和MS场群阳性率和样品阳性率最低，第二季度样品阳性率最高，第三季度场群阳性率最高。具体结果见表3。
不同日龄情况
不同日龄鸡群均有MG和MS感染，样品阳性率差异极显著（MG：χ2=2148.00，P<0.01；MS：χ2=2265.00，P<0.01），MG样品阳性率110~180日龄最高，462日龄以上最低；MS样品阳性率251~320日龄最高，462日龄以上最低（表4）。
不同养殖类型情况
统计显示，不同养殖类型MG和MS样品阳性率差异极显著（MG：χ2=6328.45，P<0.01；MS：χ2=3920.05，P<0.01），规模化商品鸡场的MG和MS场群阳性率和样品阳性率均最高。具体结果见表5。
不同种类情况
不同鸡群种类间的MG和MS样品阳性率差异极显著（MG：χ2=4963.06，P<0.01；MS：χ2=2202.27，P<0.01），其中蛋鸡的MG和MS样品阳性率均高于肉鸡，但MG场群阳性率低于肉鸡，MS场群阳性率高于肉鸡（表6）。
讨论
本次调查发现，2019 年北京市MG样品阳性率为80.6%，场群阳性率为90.8%；MS样品阳性率为77.1%，场群阳性率为88.4%，表明北京市鸡群普遍存在MG和MS感染，且感染程度较严重。
本次调查数据与国内报道的其他地区数据有较大差异。黄招玲等2013年对福建省4个规模场进行MG血清学调查，发现平均阳性率为47.22%。马爽等检测了来自华北、华中、华南、东北、西北、华东地区11个省（区、市）的21962份血清，发现MG抗体阳性率为30.23%~54.67%。孟冬霞等2011年对山西省15个鸡场不同种类、不同日龄未免疫鸡的2850份血清，用MG血清平板凝集试验进行了血清学调查，发现平均阳性率为24.35%。羊扬等对广西地区3个黄羽肉鸡养殖公司10个鸡群的300份血清进行MS检测，发现抗体阳性率达96.3%。Sun等对2010—2015年来源于国内16个省（区、市）的鸡血清进行MS抗体检测，发现抗体阳性率达63.2%。齐新永等2014年对上海市240份血清检测MG感染抗体，发现规模化蛋鸡和林地散养鸡的抗体阳性率分别为97.8%和93.3%，肉鸡上市前抗体阳性率达94%。以上数据说明，全国各地的MG和MS感染严重，但北京市更严重。可能原因有以下几点：（1）种鸡场未采取MG和MS净化措施，使病原垂直传播给后代，造成后代鸡群感染率较高；（2）部分鸡场生物安全设施较差，控制措施实施率低，导致病原水平传播从而引起鸡群阳性率高；（3）ELISA方法敏感性较高，会出现部分假阳性；（4）抽样人员抽样时可能采取了便利抽样方式，影响了随机抽样的结果。
本次调查发现，第四季度的MG和MS样品和场群阳性率均最低，第二季度样品阳性率和第三季度场群阳性率最高。每季度的样品采集时间分别为1、4、7、10月的上旬。检测表明，MG和MS一年四季均可发生，但第二、三季度高发。这与马爽等2010—2015年全国鸡群发病情况调查发现的MS春季易暴发的结果一致。
从不同日龄的检测结果来看，各种日龄的鸡均可感染MG和MS，但MG阳性率110~180日龄最高，MS阳性率251~320日龄最高，而MG和MS阳性率均为462日龄以上最低。这可能是因为随着年龄增加，机体免疫力增强，鸡群感染概率减小。下一步将重点关注110日龄以下鸡群的感染情况，以寻找采取措施的最佳时期。
从不同养殖类型的检测结果来看，种鸡场、规模化商品鸡场和散养户的MG和MS感染率均较高，其中规模化商品场最高。这可能与商品场饲养密度过大有关。种鸡场MG和MS样品阳性率在70%以上，场群阳性率在89%以上，提示种鸡场应制定净化方案，开展净化监测。在引种时务必严格把关，严禁从疫区引种，从源头上杜绝疫病的进入；加强种鸡群MG和MS监测及净化，逐渐降低鸡群中MG和MS感染率。
各养鸡场（户）应加强生物安全防护意识，建立并完善适合本场的生物安全体系。MG疫苗应用较广泛的有F株、6/85株和ts-11株；国内尚无MS疫苗上市，国外已经有灭活苗和活疫苗用于生产，但价格较高，有条件的鸡场可进行疫苗接种。同时可以选择使用对支原体敏感的药物进行早期治疗。总之，建议采取包括加强生物安全、种鸡净化、疫苗预防和药物治疗在内的综合管理措施。
结论
调查表明，北京市不同类型鸡场以及不同种类、不同日龄鸡群的MG和MS感染均较严重，感染范围较广，10个区均有不同程度的感染，每年第二、三季度更易暴发，提示北京市应采取综合管理措施，加强MG和MS的净化和防控。
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