摘要:为了解北京市鸡毒支原体(Mycoplasma galliscepticum,MG)和滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)感染情况,2019年从北京市10个区127个养鸡场(户),采集3910份鸡血清样品,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行MG和MS感染抗体检测。结果显示:北京市10个区均有不同程度的MG和MS感染,场群阳性率分别介于78.95%~100%、68.42%~100%,样品阳性率分别介于59.35%~93.13%、50.0%~94.53%,平均场群阳性率分别为89.0%和86.6%,平均样品阳性率分别为79.0%和75.6%;第三季度的场群阳性率和第二季度的样品阳性率最高,第四季度场群阳性率和样品阳性率最低(P<0.01);110~180日龄的MG样品阳性率、251~320日龄的MS样品阳性率最高,462日龄以上均最低(P<0.01);规模化商品鸡场的MG和MS场群阳性率和样品阳性率均最高(P<0.01);蛋鸡的MG和MS样品阳性率均高于肉鸡(P<0.01)。结果表明,北京市MG和MS感染较为严重,第二、三季度高发,110~320日龄鸡群、规模化商品鸡场和蛋鸡群感染尤其严重。结果提示,应采取包括加强生物安全管理、种鸡净化、疫苗预防和药物治疗在内的综合管理措施,有效控制该地区MG、MS的流行。
鸡毒支原体(Mycoplasma galliscepticum,MG)和滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是禽类支原体中最具致病性的两个种。MG又称鸡败血支原体,主要引起鸡、火鸡的慢性呼吸道疾病。MG不同菌株的感染性和致病性不同,感染后的主要临床表现为流鼻涕、流眼泪、咳嗽,严重时呼吸困难或张口呼吸,可听到湿性啰音。临床上,MG常常与某些细菌、病毒协同感染,导致呼吸道疾病症状加剧,死亡率升高。MS可感染鸡和火鸡,不同菌株的致病力有所不同,可引起亚临床型上呼吸道感染,以及关节炎和传染性滑膜炎,导致生长发育迟缓及胴体降级,甚至会激发免疫系统抑制。MS感染能使产蛋鸡群的产蛋量和蛋品质下降。目前MG和MS在养殖场(户)中普遍存在,两种病原感染的直接致死率并不是很高,但很难彻底治愈,往往因治疗不力而继发大肠杆菌感染,导致患病鸡体自身黏膜屏障保护力降低,造成免疫失败,继而诱发禽流感和新城疫等疫病,给养殖业造成很大经济损失。MG和MS 除可水平传播外,还可垂直传播。为掌握北京市MG和MS感染情况,2019年从北京市10个区127个养鸡场(户)采集鸡血清样品,采用 ELISA方法进行血清学调查,以期为制定MG和MS感染的控制措施提供依据。
材料与方法
采样
在北京市10个区,按两阶段抽样方法:第一阶段,按95%的置信水平,90%的预期场阳性率,10%的可接受误差,计算抽样场(户)数量。每季度应抽30个场(户),实际每季度平均抽32个场(户),根据养殖场(户)列表,采用系统随机抽样方法选定抽样场(户)。第二阶段,同样按95%的置信水平,90%的预期场内流行率,10%的可接受误差,计算场内抽检鸡只数量。每场(户)应平均抽30只。考虑实际情况,每场平均抽31只,根据鸡只序号,采用系统随机抽样方法选定鸡只。实际随机抽取了127个养鸡场(户)共 910份鸡血清样品,其中规模场3220份、散养户690份。样品涵盖不同日龄的鸡只。
检测方法
对采集的血清样品,采用上述抗体酶联免疫检测试剂盒(敏感性98%、特异性100%)检测。检测步骤及判定标准按试剂盒说明书进行。
数据分析
用Excel整理数据,运用SPSS 23软件进行统计学卡方检验分析。
结果与分析
总体情况
随机抽取的127个养鸡场(户)3910份血清样品中,共检出MG抗体阳性场(户)113个,场群表观阳性率为89.0%,真实阳性率为90.8%(95%CI:85.7%~95.9%);抗体阳性血清3087份,表观样品阳性率为79.0%,真实阳性率为80.6%(95%CI:79.3%~81.8%);检出MS抗体阳性场(户)110个,场群表观阳性率为86.6%,真实阳性率为88.4%(95%CI:82.8%~94.0%),抗体阳性血清2956份,表观样品阳性率为75.6%,真实阳性率为77.1%(95%CI:75.8%~78.5%)。具体结果见表1。
不同区情况
北京市10个区均有不同程度的MG和MS感染。其中:MG场群阳性率均在78%以上,最高的达100%,样品阳性率均在59%以上,最高的达93.13%;MS场群阳性率均在68%以上,最高的达100%,样品阳性率均在50%以上,最高的达94.53%(表2)。
不同季度情况
不同季度MG和MS样品阳性率差异极显著(MG:χ2=7487.67,P<0.01;MS:χ2=5829.32,P<0.01)。第四季度的MG和MS场群阳性率和样品阳性率最低,第二季度样品阳性率最高,第三季度场群阳性率最高。具体结果见表3。
不同日龄情况
不同日龄鸡群均有MG和MS感染,样品阳性率差异极显著(MG:χ2=2148.00,P<0.01;MS:χ2=2265.00,P<0.01),MG样品阳性率110~180日龄最高,462日龄以上最低;MS样品阳性率251~320日龄最高,462日龄以上最低(表4)。
不同养殖类型情况
统计显示,不同养殖类型MG和MS样品阳性率差异极显著(MG:χ2=6328.45,P<0.01;MS:χ2=3920.05,P<0.01),规模化商品鸡场的MG和MS场群阳性率和样品阳性率均最高。具体结果见表5。
不同种类情况
不同鸡群种类间的MG和MS样品阳性率差异极显著(MG:χ2=4963.06,P<0.01;MS:χ2=2202.27,P<0.01),其中蛋鸡的MG和MS样品阳性率均高于肉鸡,但MG场群阳性率低于肉鸡,MS场群阳性率高于肉鸡(表6)。
讨论
本次调查发现,2019 年北京市MG样品阳性率为80.6%,场群阳性率为90.8%;MS样品阳性率为77.1%,场群阳性率为88.4%,表明北京市鸡群普遍存在MG和MS感染,且感染程度较严重。
本次调查数据与国内报道的其他地区数据有较大差异。黄招玲等2013年对福建省4个规模场进行MG血清学调查,发现平均阳性率为47.22%。马爽等检测了来自华北、华中、华南、东北、西北、华东地区11个省(区、市)的21962份血清,发现MG抗体阳性率为30.23%~54.67%。孟冬霞等2011年对山西省15个鸡场不同种类、不同日龄未免疫鸡的2850份血清,用MG血清平板凝集试验进行了血清学调查,发现平均阳性率为24.35%。羊扬等对广西地区3个黄羽肉鸡养殖公司10个鸡群的300份血清进行MS检测,发现抗体阳性率达96.3%。Sun等对2010—2015年来源于国内16个省(区、市)的鸡血清进行MS抗体检测,发现抗体阳性率达63.2%。齐新永等2014年对上海市240份血清检测MG感染抗体,发现规模化蛋鸡和林地散养鸡的抗体阳性率分别为97.8%和93.3%,肉鸡上市前抗体阳性率达94%。以上数据说明,全国各地的MG和MS感染严重,但北京市更严重。可能原因有以下几点:(1)种鸡场未采取MG和MS净化措施,使病原垂直传播给后代,造成后代鸡群感染率较高;(2)部分鸡场生物安全设施较差,控制措施实施率低,导致病原水平传播从而引起鸡群阳性率高;(3)ELISA方法敏感性较高,会出现部分假阳性;(4)抽样人员抽样时可能采取了便利抽样方式,影响了随机抽样的结果。
本次调查发现,第四季度的MG和MS样品和场群阳性率均最低,第二季度样品阳性率和第三季度场群阳性率最高。每季度的样品采集时间分别为1、4、7、10月的上旬。检测表明,MG和MS一年四季均可发生,但第二、三季度高发。这与马爽等2010—2015年全国鸡群发病情况调查发现的MS春季易暴发的结果一致。
从不同日龄的检测结果来看,各种日龄的鸡均可感染MG和MS,但MG阳性率110~180日龄最高,MS阳性率251~320日龄最高,而MG和MS阳性率均为462日龄以上最低。这可能是因为随着年龄增加,机体免疫力增强,鸡群感染概率减小。下一步将重点关注110日龄以下鸡群的感染情况,以寻找采取措施的最佳时期。
从不同养殖类型的检测结果来看,种鸡场、规模化商品鸡场和散养户的MG和MS感染率均较高,其中规模化商品场最高。这可能与商品场饲养密度过大有关。种鸡场MG和MS样品阳性率在70%以上,场群阳性率在89%以上,提示种鸡场应制定净化方案,开展净化监测。在引种时务必严格把关,严禁从疫区引种,从源头上杜绝疫病的进入;加强种鸡群MG和MS监测及净化,逐渐降低鸡群中MG和MS感染率。
各养鸡场(户)应加强生物安全防护意识,建立并完善适合本场的生物安全体系。MG疫苗应用较广泛的有F株、6/85株和ts-11株;国内尚无MS疫苗上市,国外已经有灭活苗和活疫苗用于生产,但价格较高,有条件的鸡场可进行疫苗接种。同时可以选择使用对支原体敏感的药物进行早期治疗。总之,建议采取包括加强生物安全、种鸡净化、疫苗预防和药物治疗在内的综合管理措施。
结论
调查表明,北京市不同类型鸡场以及不同种类、不同日龄鸡群的MG和MS感染均较严重,感染范围较广,10个区均有不同程度的感染,每年第二、三季度更易暴发,提示北京市应采取综合管理措施,加强MG和MS的净化和防控。
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