摘要:为了解近年来河南省猪伪狂犬病(PR)流行情况,2017—2019年对河南省种猪场、商品代猪场、散养户和屠宰场,共1454场次的44059份猪血清进行了猪伪狂犬病病毒(PRV)gE抗体检测,对种猪场、商品代猪场、屠宰场和无害化处理厂,共807个场次的12824份猪组织样品进行了病原学检测,并对检测结果进行了时间、空间和群间分布分析。结果显示:2017—2019年河南省PRV gE抗体个体阳性率为27.89%,场群阳性率为53.51%;病原个体阳性率为2.47%,场群阳性率为11.65%。2017年和2019年的PRV感染率较为接近,2018年较高;冬春季节和夏季PRV感染率较高(P<0.05);豫西、豫北和豫中地区PRV感染率明显高于豫东和豫南地区(P<0.05);屠宰场和商品代猪场PRV感染率明显高于种猪场和散养户(P<0.05)。结果表明,河南省猪群PR流行具有一定的季节、区域和场群分布特点,可依据其流行特点,分区域、按场点,以种猪场为中心,分类指导、梯度推进全省PR净化工作。
伪狂犬病(pseudorabies,PR)是由伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)引起的一种高度接触性传染病。PRV主要通过口鼻、精液、胎盘等方式传播,可引起仔猪神经系统紊乱和高死亡率,育肥猪呼吸障碍和生长缓慢,以及母猪繁殖障碍等。采用gE基因缺失疫苗免疫,结合gE抗体检测是目前防控和净化PR的重要手段。但免疫并不能清除病毒,猪群一旦感染PRV便可终生带毒并不断排毒。由于PRV易变异,防控难度大,因此目前猪场野毒感染普遍存在,使PR防控和净化面临较大挑战。为掌握河南省PRV流行状况和规律,2017—2019年对河南省监测网点中的种猪场、商品代猪场、散养户、屠宰场和无害化处理厂采集样品进行了PRV监测,以期为河南省PR防控和净化提供数据参考。
材料
样品
2017—2019年,按照各年度河南省动物疫病监测与流行病学调查计划,采用估计流行率抽样策略,对种猪场、商品代猪场、散养户和屠宰场,共1454场次的44059份猪血清样品进行了PRV gE抗体检测,各场点样品数依次为15867、25283、605和2304份;对种猪场、商品代猪场、屠宰场和无害化处理厂,共807场次的12824份猪组织样品进行了PRV病原检测,各场点样品数依次为700、2025、4645和5454份。不同场点的病原检测样品种类不同,其中养殖场为活猪扁桃体样品,屠宰场为猪胴体扁桃体和淋巴结混合样品,无害化处理厂为病死猪脾脏、肺脏、扁桃体和淋巴结混合样品。
方法
抗体检测
采用gE-ELISA方法,计算S/N值,按照试剂盒说明书进行检测和结果判定。判定标准为:S/N<0.60为阳性,S/N>0.70为阴性,介于两者之间为可疑。
病原检测
组织样品经研磨处理后,提取核酸进行PCR检测。核酸提取、PCR检测和结果判定,均按照试剂盒说明书进行。样本检测FAM通道和HEX/VIC通道Ct值均≤40,且扩增曲线均呈典型的S型,判定为PRV核酸阳性。
数据分析
将检测数据录入Excel,按不同季节、区域和场点类别进行统计分析描述;应用SPSS软件,对统计结果进行差异性和相关性分析。
结果与分析
总体情况
2017—2019年,检出PRV gE抗体阳性场群778个,平均场群抗体阳性率为53.51%(778/1454),检出抗体阳性样品12286份,平均个体抗体阳性率为27.89%(12286/44059);检出PRV病原阳性场群94个,平均场群病原阳性率为11.65%(94/807),检出病原阳性样品317份,平均个体病原阳性率为2.47%(317/12824)。
时间分布
年度统计结果(表1~2)显示:2018年PRV gE抗体和病原个体阳性率均最高,2017和2019年的PRV gE抗体个体阳性率无显著差异(P>0.05);2019年PRV病原个体阳性率最低,各年度病原个体阳性率之间均存在差异(P<0.05);不同年度的gE抗体个体阳性率和病原个体阳性率呈正相关(Pearson相关系数为0.819)。不同年度的PRV gE抗体场群阳性率无显著差异(P>0.05),但病原场群阳性率存在差异(P<0.05),其中2018年最高,2019年最低。监测场群整体呈现,与2017年相比,2018年PRV感染加重,2019年有所控制的趋势。
季度统计结果(表3~4)显示:夏季PRV gE抗体个体阳性率和场群阳性率均最高,春季PRV病原个体阳性率和场群阳性率均最高,而秋季的病原阳性率显著低于其他季节(P<0.05)。不同季节的gE抗体和病原个体阳性率之间无显著相关性(Pearson相关系数为0.259)。整体来看,PRV感染具有一定的季节性特征,冬春季节和夏季感染较重(P<0.05)。
空间分布
不同区域(豫东、豫西、豫南、豫北和豫中)统计结果(表5~6)显示:豫东地区个体阳性率和场群阳性率均显著低于其他地区(P<0.05)。不同区域gE抗体和病原个体阳性率呈显著正相关性(Pearson相关系数为0.712)。整体来看,河南省PRV感染呈现一定的区域分布特点,豫西、豫北和豫中地区感染率明显高于豫东和豫南地区(P<0.05)。
群间分布
不同类别场点统计结果(表7~8)显示:屠宰场抗体个体和场群阳性率均最高,商品代猪场次之,种猪场和散养户较低;无害化处理厂病原个体和场群阳性率均最高,而种猪场未检出病原学阳性样品。整体来看,屠宰场和商品代猪场PRV感染率明显高于种猪场和散养户(P<0.05)。
讨论
年度统计结果表明,2019年河南省PRV病原阳性率与前两年相比有所下降,但gE抗体阳性率仍处于较高水平,说明河南省PR防控工作有待进一步加强。季度统计结果表明,河南省猪群PRV流行具有一定的季节分布特征,冬春季和夏季流行加重,这符合其冬春季节和产仔旺季多发的特征,需重视该季节的防控。区域统计结果表明,河南省PRV流行具有一定的空间分布特征,豫东和豫南区域PRV控制效果较好,而其他地区流行较为严重,这可能与不同区域生猪养殖规模化水平、饲养管理模式、防疫水平、环境中病原污染情况和活猪调运有关。因此,河南省猪群PR防控和净化可实行区域化管理,不同区域依据辖区内疫病流行情况制订相应的防控和净化措施,同时加强生猪调运管理,避免从高流行区域和场群引进生猪。
不同类别场点统计结果表明,屠宰场和商品代猪场的PRV感染抗体阳性率显著高于种猪场和散养户。屠宰场gE抗体阳性率高,可能与待宰猪转群、运输等应激因素有关。商品代猪场阳性率显著高于种猪场和散养户,可能与商品代猪场猪群流动性大以及与外界交流相对频繁有关。无害化处理厂的病原检出率显著高于其他场点,这符合其病死猪聚集地的特征;种猪场未检出病原阳性样品,与其生产管理和生物安全防护水平高有关;散养户病原检出率低,可能与其猪群流动性小以及与外界交流少有关。因此,猪场应坚持自繁自养和全进全出的饲养模式,实行封闭饲养,减少和避免各种应激因素;结合生产实际和监测结果选择合理的免疫程序;提高生物安全水平和规范消毒措施,从消灭病原、切断传播途径和保护易感动物等各方面降低疫病发生风险。
结论
监测表明:河南省猪群PRV感染范围较广,感染程度较严重,防控工作有待进一步加强。河南省PRV感染呈现一定的流行特征,春夏季节高发,商品代场饲养猪群和屠宰猪群感染率较高,豫东和豫南地区PR控制效果较好,而其他地区流行较严重。因此,建议河南省分区域、按场点,分类指导、梯度推进PR防控与净化工作。
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