|
摘要：2018年3月27日，山西省某养殖场蛋鸡出现发热、腹泻、头颈后仰等症状，并陆续死亡，至3月31日，共死亡蛋鸡699只，袭击率为86.08%（699/812）。经国家禽流感参考实验室检测，确诊该疫情为高致病性H7N9流感。为查明病因，了解疫情分布，通过现场剖检、实验室诊断、问卷调查、周边排查等方式，对该起疫情进行了流行病学调查，寻找可能的风险因素，进而提出防控建议，评估防控效果。经调查，病原通过人员、车辆、野鸟带毒传入养殖场的可能性较大，又因养殖场未进行H7N9流感疫苗免疫，从而导致疫情暴发。通过紧急处置，疫情得到有效控制，未发生扩散。本起疫情提示，对家禽使用与当地流行毒株匹配疫苗进行免疫，建立有效免疫屏障，同时加强人员、车辆和野鸟的生物安全控制，对预防H7N9流感具有十分重要的意义。
H7N9流感病毒是甲型流感病毒中的一种，属正黏病毒科甲型流感病毒属，为有囊膜的分节段单股负链RNA病毒，除可感染禽外，还可感染人、猪、马、水貂和海洋哺乳动物等。H7N9流感病毒在我国流行初期对禽类的致病性较弱，使感染禽类不表现明显临床症状，但随着毒力变化，对禽类致病性增强，可引起禽类严重发病死亡，对我国养禽业造成重大影响。
2018年3月30日，山西省临汾市洪洞县某养殖户报告其饲养的蛋鸡出现大量异常死亡。经国家禽流感参考实验室确诊，证实该起疫情为H7N9流感暴发。为查明病因，了解疫情分布，通过现场剖检、实验室诊断、问卷调查、周边排查等方式，对该起疫情进行了流行病学调查，寻找可能的风险因素，进而提出防控建议，评估防控效果。
方法
病例定义
可疑病例。个体水平：2018年3月27—31日，疫情养殖场出现的病死蛋鸡；场群水平：3月27日—4月30日，洪洞县出现禽类死亡数量异常增多的养殖场户。
确诊病例。经国家禽流感参考实验室检测为H7N9流感病毒核酸阳性的可疑病例。
调查方式
现场问卷调查。采用问卷调查方式，对场内基本情况、鸡群免疫情况、病死情况、饲养管理情况、调运情况等进行调查。通过现场入户调查和全县养禽场户逐户排查，了解疫情空间分布和周边易感动物分布。
现场剖检。剖检病死和发病蛋鸡，观察病理变化。
实验室诊断
血清学检测。采集鸡血清进行血凝抑制（HI）试验，检测H5、H7亚型抗体。采用H5亚型抗原、H7亚型抗原进行检测，批号分别为2017042、2017007。判定标准为：HI效价≤3log2，判为阴性；等于4log2，为可疑，需重复试验；≥5log2，为阳性。
病原学检测。采集鸡咽/泄殖腔拭子、组织样品进行H5、H7亚型流感病毒荧光定量PCR病原学检测。采用广州维伯鑫生物科技有限公司生产的H5、H7亚型流感病毒实时荧光RT-PCR检测试剂盒进行检测，批号分别为AIVH520180211P、AIVH720171220P。H5亚型判定标准为：Ct≤30并出现特异性扩增曲线，为阳性；30＜Ct＜37并出现特异性扩增曲线，为可疑，需重复试验，如仍是可疑，判定为阳性；Ct≥37为阴性。H7亚型判定标准为：Ct≤30并出现特异性扩增曲线为阳性；30＜Ct＜35并出现特异性扩增曲线为可疑，需重复试验，如仍是可疑，则判定为阳性；Ct≥35为阴性。
数据来源与分析
通过养殖场主口述，结合现场排查，获得蛋鸡死亡时间、死亡数量、扑杀时间等相关数据；用Excel进行整理，并绘制流行病学曲线。
调查结果
基本情况
饲养情况。该养殖场位于临汾市洪洞县龙马乡，为自家庭院养殖；3栋鸡舍位于住宅东侧，鸡舍间距为4m；发病舍位于北侧，中间为空舍，南侧舍未发病（图1）。该养殖场养殖环境差，无粪污清理设施、通风设施。疫情发生前，全场共存栏蛋鸡1794只，其中发病鸡舍812只（315日龄）、未发病鸡舍982只（260日龄）。养殖场主个人负责饲喂。
引种情况。2017年5月15日，该场从洪洞县某养殖场引进商品蛋鸡海兰褐1000只至北侧鸡舍（发病舍）；2017年7月10日，从山西省某养殖场引进商品蛋鸡海兰褐1000只至南侧鸡舍。
免疫情况。2017年9月23日，该场对两栋鸡舍免疫了H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株+Re-8株）；2018年3月5日，对南侧鸡舍免疫了H5+H7亚型二价灭活苗（H5N1Re-8株+H7N9Re-1株），而未对北侧鸡舍免疫。
饲料和饮水情况。该场蛋鸡饲料一直由当地某饲料部供应，最近于3月20日购进1.5t；所用水源来自自打井。
人员和车辆进出情况。2018年3月20日，运料车到过该场；3月25日，鸡蛋销售商到过该场。同村另一养殖场（Y场，排查时发现H7亚型流感病原学阳性）场主与该养殖场场主来往密切，3月6—26日共进场8次，且未进行任何消毒便进入鸡舍。
活鸡调出、调入和鸡蛋销售情况。该场近期无活鸡调出、调入，3月25日销售鸡蛋112.5kg。
发病死亡情况
2018年3月27日，北侧鸡舍部分成年蛋鸡出现精神萎靡、食欲减退、体温升高、腹泻等症状，并零星死亡。至3月31日，共死亡蛋鸡699只，袭击率为86.08%。
时间分布。自2018年3月27日养殖场内出现死亡病例，到3月31日介入调查并进行扑杀期间，单日死亡数量呈现持续增长态势（图2）。
群间和空间分布。从养殖场内部看，疫情具有明显的空间和群间分布特征。发病死亡蛋鸡全部为位于北侧鸡舍，为315日龄蛋鸡；南侧鸡舍未发病，为260日龄蛋鸡。养殖场只有简单的手动喷雾消毒器，无规范的消毒灭源制度，外来人员、车辆进入场内及鸡舍无消毒措施，每月不定期对鸡舍消毒1~2次。从发病情况看，具有明显的聚集性，发病场（X场）和排查阳性场（Y场）为相邻场（图3），其余5个蛋鸡场均为阴性场。
疫情诊断
临床症状。发病鸡精神萎靡、食欲减退、呼吸困难、体温升高；部分病鸡肉髯水肿，呼吸伴有啰音，排绿色、黄绿色稀便；病程短，死亡快，个别病例无症状突然死亡。
剖检变化。病死鸡气管不同程度出血；肝脏有灰白色坏死灶，质脆易碎；胰腺肿大、出血；腺胃和肌胃交界处呈点状出血；十二指肠出血或坏死；盲肠扁桃体肿大、出血；泄殖腔出血。
实验室诊断。采集23份血清学样品（发病舍11份、未发病舍12份），53份病原学样品（发病舍20份咽/泄殖腔拭子、11份脏器，未发病舍20份咽/泄殖腔拭子、2份脏器），分别进行H5、H7亚型抗体检测和病原学检测。所有血清样品H5亚型抗体全部为阳性；发病舍H7亚型血清样品抗体全部为阴性，未发病舍全部为阳性。所有病原学样品均为H5亚型阴性；发病舍病原学样品H7亚型阳性率为93.55%（29/31），未发病舍病原学样品全部为阴性（表1略）。4月3日，国家禽流感参考实验室确诊病原为H7N9流感病毒，其HA与NA基因与2018年3月引发陕西省H7N9感疫情的病原同源率较高，分别为99.8%和99.9%。
病因假设与分析
未免疫H7亚型禽流感疫苗
两栋鸡舍除免疫情况不同外，其他饲养条件基本相同。发病鸡舍未免疫H7N9流感疫苗可能是导致疫情发生的直接原因。
人员物理性带入病毒
疫情发生后进行监测排查发现，同村Y养殖场为H7亚型流感病原学阳性场。这两个养殖场场主来往密切，疫情暴发前20d内，有频繁互相串门行为，且进入养殖场前未采取消毒等生物安全措施。Y养殖场虽监测发现病原学阳性，但因其进行了H7N9流感免疫，所以未发生蛋鸡大量死亡。综合考虑这些因素，推测人员物理性带入病毒，引发疫情的可能性较大。
车辆引入病毒
疫情养殖场所在村的7个蛋鸡养殖场由同一个饲料商、同一辆运输车供应饲料。蛋鸡发病死亡前7d，饲料运输车曾进入该场，时间与高致病性禽流感的潜伏期相吻合。疫情养殖场对饲料运输车辆无任何消毒措施，且与另一H7N9病原学阳性场（Y场）有流行病学关联。综合考虑，通过饲料运输车辆交叉感染引入病毒的风险较高。
野生鸟类
该场周边是大片杨树林（图3），适宜鸟类繁衍栖息。鸡舍没有防鸟网等设施，野鸟可以随便飞入。在现场排查及疫情处置中，能看到鸡舍及庭院树上有成群野鸟栖息、飞行和采食鸡饲料现象。现场虽未发现有野鸟死亡，但不排除野鸟传入病毒的可能。
饲料和饮水
疫点所在村共有7个蛋鸡养殖场，均由当地同一饲料部供应饲料。除发病场（X场）与Y养殖场外，其他5个场的H7亚型流感病原学检测均为阴性。对发病场的饲料样品和水样品进行H7亚型流感病原学检测，均为阴性。因此，通过饲料和饮水传入疫情的可能性较低。
疫情处置
限制移动
划定该养殖场和Y养殖场为疫点；以疫点为中心，周围3km内的12个行政村为疫区。对疫点进行隔离，对疫区实行封锁；在疫区设置12个临时动物防疫消毒站卡，限制家禽及其产品移动。
扑杀、无害化处理
对疫点内家禽全部扑杀，共扑杀蛋鸡5675羽，全部进行焚烧后深埋处理。
紧急消毒
对疫点、疫区环境实施严格消毒，对污染物进行无害化处理，累计消毒95.9万m2。
紧急排查
对全县辖区内2511个家禽养殖场户开展疫情排查，共排查367.65万余只家禽。受威胁区内，采取到场问询和采样检测相结合的方式进行排查；受威胁区外，采取现场问询方式进行排查。未发现其他H7N9亚型流感疫情。
紧急免疫
对全县家禽免疫情况进行摸排，对已过保护期和未免疫的35.47万只家禽全部采用H5+H7二价灭活苗（H5N1Re-8株+H7N9Re-1株）进行紧急免疫。
讨论
局限性
该起疫情由于发病急、死亡率高，发病数不易统计，因此调查中用死亡数代替发病数，用于计算袭击率和绘制流行曲线。因疫情发生紧急，为将疫情释放风险降到最低，现场以处置疫情为首要任务，未对排查出的阳性场（Y场）进行进一步溯源调查。养殖场无完善的养殖档案，部分情况只是从场主口述中获取，存在一定的信息偏倚。
启示
兽医主管部门应加强对全县养禽场的强制免疫监管，督促养殖场户使用与当地流行毒株匹配疫苗进行免疫；同时要做好抗体监测，对不合格的群体及时补免，以建立起有效免疫屏障。
结论
通过现场调查、临床诊断、病理解剖和实验室检测，确定此次暴发为H7N9流感。病原通过人员、车辆、野鸟带毒传入的可能性较大；养殖场因未进行H7N9亚型流感疫苗免疫，从而导致疫情暴发。建议使用与当地流行毒株匹配疫苗进行免疫，同时加强人员、车辆和野鸟的生物安全控制。
|
