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摘要：为了解我国部分地区猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征和猪伪狂犬病3种常见疫病的流行情况，采用ELISA、聚合酶链式反应（PCR）和反转录PCR（RT-PCR）等方法，对2019年11个省（自治区）172个猪场送检的3 550份猪血清样品进行猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）及伪狂犬病野毒（PRV-gE）抗体检测，对9个省（自治区）72个猪场送检的371份病料进行抗原检测。结果显示：CSFV、PRRSV、PRV-gE抗体阳性率分别为82.75%、84.08%、31.86%，抗原阳性率分别为2.62%、26.15%、1.67%。保育猪群CSFV抗体平均阻断率最低，为44.62%，抗体整齐度差，CV为58.26%，且CSFV抗原主要在哺乳仔猪和保育猪病料中被检出，检出率分别为3.57%、3.00%；除育肥猪群外，其他各阶段猪群的PRRSV抗体S/P平均值为1.0~2.0，抗体整齐度整体较差，且平均抗原阳性率较高（26.15%），其中保育阶段猪群病原检出率最高（37.68%）；育肥猪、母猪、公猪的PRV-gE抗体阳性率分别为36.82%、35.31%、15.65%，病原主要从死胎/木乃伊胎和哺乳仔猪病料中被检出，检出率分别为8.70%和2.99%。结果表明，PRRSV对我国猪场不同阶段猪群均有较大威胁；保育猪群CSFV抗体水平不理想，暴发疫情风险较高；公猪、母猪及育肥猪群普遍存在PRV感染，尤其是母猪。提议各猪场采取免疫、监测、净化等综合措施，加强这3类常见猪群疫病的防控。
猪瘟（classical swine fever，CSF）是由猪瘟病毒（classical swine fever virus，CSFV）引起的一种烈性传染病，临床上主要导致母猪繁殖障碍，商品猪实质器官出血、坏死和死亡率高等。CSFV毒力的强弱导致感染猪群的临床病变、发病周期及死亡率均存在差异。猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）可导致猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）。PRRS临床上主要引发种猪繁殖障碍，商品猪呼吸道症状和高死亡率。PRRSV能逃避机体的免疫清除，侵害猪肺泡巨噬细胞系统，导致机体免疫抑制从而继发其他病原感染。此外，PRRSV可在猪体中形成持续性感染。伪狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）可导致伪狂犬病（pseudorabies，PR），临床上主要引发母猪繁殖障碍，商品猪呼吸道症状、神经症状和高死亡率。自2011年以来，我国多个省份陆续报道猪场出现PRV变异毒株。但目前发现，PRV变异毒株主要是基因型的改变，血清型仍只有1个。据杨汉春等报道，2018年我国PRRS呈现散发和常发态势，CSF以零星散发为主，PR仍有散发。为了解目前我国这几种常见疫病的流行情况，对2019年不同省（自治区）的送检样本进行血清学和病原学检测，分析其流行特点，以期为猪场相关疫病防控提供参考。
材料与方法
送检样品
2019年我国11个省（自治区）172个猪场送检的3550份猪血清样品，9个省（自治区）72个猪场送检的371份猪肺脏、脾脏、肾脏、肝脏、淋巴结及脑等组织病料（表1）。送检样品猪场均免疫了CSF和PR疫苗，部分猪场免疫了PRRS疫苗（不同省份占比为13%~33%）。
血清抗体检测
按照3种病毒相应的ELISA抗体检测试剂盒说明书进行操作，检测结果判定标准见表2。
病料病原检测
CSFV与PRRSV，采用RNA试剂盒提取并进行RT-PCR检测；PRV，采用DNA提取试剂盒提取并进行PCR检测，然后用1%琼脂糖凝胶电泳检测，如出现目的条带判定为阳性，反之为阴性。
数据统计分析
检测结果应用Excel 2013软件进行统计学分析处理。
结果与分析
血清抗体检测
总体情况。血清抗体检测结果（图1）显示：CSFV、PRRSV抗体阳性率分别为82.75%、84.08%，均超过了国家要求的70%的最低标准，但因免疫了疫苗，所以无法区分是免疫抗体还是感染抗体；PRV-gE抗体阳性率为31.86%，表明PRV野毒感染率较高。
CSFV抗体水平。从图2和图3中可知：保育猪群的CSFV抗体平均阻断率最低，为44.62%，且抗体整齐度差，CV为58.26%；阳性个体中，阻断率＞40%的占54.39%，＞70%的仅占20.46%，表明保育猪群CSFV抗体水平整体不理想。公猪和母猪的平均CSFV抗体阻断率较高，分别为78.66%和75.47%，且抗体整齐度较好，CV分别为24.47%和26.79%；阳性个体中，阻断率＞40%的分别占93.91%和92.04%，＞70%的分别占80%和74.16%，表明种猪群CSFV抗体水平整体较好。后备猪群的平均CSFV抗体阻断率为68.07%，CV为33.97%；阳性个体中，阻断率＞40%的占86.55%，＞70%的占59.23%，表明后备猪群CSFV抗体水平好于保育猪群和育肥猪群。
PRRSV抗体水平。从图4和图5中可知：育肥猪群PRRSV抗体S/P平均值最高，为2.32，且抗体较整齐，CV为35.65%；育肥猪群S/P＞2.5的占比最高，为46.3%，S/P＞3.0占比也最高，为3.24%。而其他各阶段猪群S/P平均值为1.0~2.0，且抗体整齐度较差。公猪CV最高，为88.66%；哺乳仔猪、保育及后备猪群次之，在65.00%~75.00%之间；母猪相对最低，为57.14%。
PRV-gE抗体水平。从图6中可知：育肥猪群PRV-gE抗体阳性占比最高，为36.82%；母猪群次之，为35.31%；公猪阳性比例最低，为15.65%。
病料病原检测
从表３可知：PRRSV抗原阳性率最高，为26.15%；CSFV次之，为2.62%；PRV最低，为1.67%。CSFV+PRRSV混合感染检出率为2.03%，CSFV+PRV及PRRSV+PRV均未检出。
从表４可知：保育阶段猪群病料的PRRSV检出率最高，为37.68%；CSFV主要在哺乳仔猪和保育猪群病料中被检出，检出率分别为3.57%和3.00%；PRV主要从死胎/木乃伊胎及哺乳仔猪病料中检测到，检出率分别为8.70%和2.99%。CSFV+PRRSV混合感染主要集中在哺乳仔猪及保育猪，检出率分别为5.00%和4.35%。
讨论
近年来，环保、疫病等因素导致我国养猪存栏大幅下降。猪场密度降低虽对猪病防控有积极作用，但从2019年3种常见猪病抗原及抗体检测结果可知，3种疫病对猪群仍有不同程度的威胁，尤其是PRRS，仍旧是猪场防控的重要对象。
从PRRSV检测结果可知，PRRSV抗体及抗原阳性率总体较高，相比CSFV和PRV，其对猪场威胁更大。母猪PRRSV抗体S/P＞2.5的样品占比较高，且死胎/木乃伊胎及哺乳仔猪病料抗原检出率较高，表明母猪群仍存在较高比例的PRRSV感染。保育猪PRRSV抗体S/P＞2.5的样品占比也较高，且病料PRRSV抗原检出率最高，表明保育阶段猪群仍是PRRS高发群体。据相关文献报道，仔猪体内PRRSV母源抗体在3周龄时下降加剧，至5周龄时下降显著，而仔猪免疫系统发育较晚，4~5周龄时才开始发挥作用。此外，保育前期猪群应激因素较多，如断奶、换料、转群及打针等，导致抵抗力下降，从而使猪群保育前期成为PRRSV感染高风险时期。育肥猪PRRSV抗体S/P＞2.5的样品占比最高，且病料抗原检出率也较高，表明育肥猪群PRRSV感染也较重，但由于育肥猪抗病力较强，所以临床发病程度轻于保育猪。由上述结果可知，2019年国内猪群PRRSV感染压力并未因外界环境因素改变而得到较大改善。我国PRRS流行比较复杂，除高致病性PRRSV毒株外，类NADC30毒株近年来流行也在加剧，而用于防疫的弱毒活疫苗毒株繁多（如TJM-F92、JXA1、VR2332、CH-1R等），导致疫苗毒株选择混乱，此外猪场间生物安全及饲养管理水平差距较大，因而增加了我国PRRS防控难度。猪场PRRS综合防控，首先要重视后备猪隔离驯化，加强饲养管理，提升猪场生物安全水平；其次要根据猪场自身PRRSV感染状态，选用合适的疫苗种类及免疫方案。
从CSFV检测结果可知，公猪和母猪抗体水平相对更好，后备猪次之，而保育猪最差，与之前相关报道结果一致。这主要是因为保育猪群CSFV抗体易受母源抗体、应激及PRRS引起的免疫抑制等不利因素影响。CSFV抗原主要从保育猪及哺乳仔猪病料中被检出，检出率较往年有明显下降。CSFV阳性病料共9份，其中7份是CSFV+PRRSV混合感染，且主要集中于保育猪，这可能与PRRSV感染导致机体免疫抑制密切相关。CSF防控是猪场的基础防疫，其防控效果与疫苗质量、免疫程序及免疫抑制性疾病控制存在较大关联。此外，猪场务必重视母猪群CSF防控，定期进行抗原及抗体监测，并结合临床及时调整免疫程序，母猪群的CSF防控对猪场生产及CSFV净化均具有重要意义。
从PRV检测结果可知，公猪、母猪及育肥猪群体仍存在较高的感染率。据相关报道，PRV野毒感染在我国多个地区仍较严重，PRV-gE抗体阳性率＞30%，场阳性率达30%~70%。近年我国猪群PRV野毒感染率一直维持在较高水平，这与PR疫苗质量、免疫程序、免疫抑制病流行、生物安全及流行毒株变异等有较大关联。至今为止，疫苗免疫仍是当下PR防控的重要手段。后备猪群应做好隔离监测，种猪定期进行抗体检测，确保留种的后备猪为PRV阴性；对于已转阳的猪场，可通过阴性后备猪逐渐更新、提升猪场生物安全水平等措施，有效降低PRV感染风险，这也有助于PRV阳性猪场逐渐转阴及阴性猪场保持。
本次抗原检测的样品主要由发病猪场提供，抗体检测样品多为猪场常规抗体检测时采集。受非洲猪瘟影响，2019年的样品送检量虽然较往年大幅下降，但在一定程度上也能反映当下猪场3种疫病的免疫水平及感染状态，可对猪场疾病防控提供参考。国内猪病种类多，流行情况相对复杂，猪场需根据猪群疾病实际感染压力，科学免疫，同时提升猪场生物安全及饲养管理水平，保证猪群安全稳定生产。
结论
检测表明，PRRS对我国不同阶段猪群威胁较大，是猪场防控的重要对象；保育猪群CSF免疫保护效果不理想，暴发疫情风险较高；公猪、母猪及育肥猪群体普遍存在PR流行，尤其是母猪群。因此，各猪场应采取免疫、监测、净化等综合措施，加强这3类常见疫病的控制。
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