摘要:为了解云南省丽江市羊小反刍兽疫(PPR)的免疫状况和病毒感染情况,2017—2020年在全市范围内累计采集580个场点的4 002份血清学样品和2 556份病原学样品,分别采用ELISA方法和荧光RT-PCR方法进行抗体检测和病毒核酸检测,并对检测结果进行统计分析。结果显示:2017—2020年丽江市羊PPR个体免疫合格率为76.29%,群体合格率为83.67%;除2020年(69.23%)外,其他年份(75.33%~82.82%)均超过了农业农村部要求的最低合格标准(70%);种羊场、商品羊场、散养户和屠宰场的个体免疫合格率分别为91.20%、84.51%、76.67%和33.40%,所有样品均未检测到PPR病毒核酸阳性。结果表明:丽江市未在全市范围内形成PPR病原污染,在未引入新疫源的前提下,疫情发生风险较低;但整体的羊群免疫抗体合格率不高,且呈下滑趋势,尤其是散养及屠宰羊群缺乏足够的抗体保护。因此,应继续加强PPR强制免疫和监测,加大羊只引种检疫和调运监管力度,提升该病的整体防控能力。
小反刍兽疫(peste des petits ruminants,PPR)是由小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)感染山羊和绵羊等小反刍动物引起的一种急性、热性、高度接触性动物传染病,发病率和病死率高,被世界动物卫生组织(WOAH)列入须通报动物疫病名录,为我国一类动物疫病。该病1942年首次发现于非洲的科特迪瓦,2007年首次传入我国新疆地区,但未发生扩散,2013年再次传入我国并扩散至多个省份。2014年4月该病首次传入丽江市,经采取隔离、扑杀、消毒以及无害化处理、免疫等综合防控措施,有效控制了疫情。2016年PPR被列入国家强制免疫病种后,丽江市严格落实免疫防控措施,按照“应免尽免”的原则,每年通过“春防、秋防”开展PPR强制免疫工作,对所有羊群包括新生羔羊及新引进羊只实施免疫。为掌握丽江市PPR流行和免疫状况,评估免疫效果和疫情发生风险,2017—2020年,丽江市连续4年在全市范围内组织开展了血清学和病原学监测,以期为该病的综合防控及免疫退出评估提供数据参考。
材料与方法
样品
按照丽江市各年度动物疫病监测与流行病学调查计划,分别在每年春秋两季集中免疫结束后的4月和10月,在各县按照配额抽样方法,分别在规模场、散养户和屠宰场进行样品采集,尽量保证每年抽样的场群不重复,部分样品在省级定点监测和专项监测时采集。采样时详细填写流行病学调查表,涉及免疫时间、疫苗生产企业、羊只健康状况等信息。2017—2020年全市5个县区累计采集样品6 558份,其中血清学样品4 002份、病原学样品2 556份(表1)。
检测与结果判定
按照《小反刍兽疫诊断技术》(GB/T 27982—2011)所述方法检测。免疫抗体检测采用PPR抗体竞争ELISA试剂盒,病毒核酸检测采用PPR荧光RT-PCR检测试剂盒,试剂盒均购自青岛立见生物科技有限公司。试验操作和结果判定,按照各说明书进行。
结果与分析
不同年份情况
2017—2020年,全市共检测502个场群4 002份血清学样品,检出合格场群420个,群体合格率为83.67%,检出合格样品3 053份,个体免疫合格率为76.29%。除2020年免疫抗体合格率未达到国家要求的70%以上的标准外,其余年份均超过了国家最低标准,整体免疫合格率不高,呈波动性下降趋势(表2),但差异不显著(P>0.05)。共检测78个场点2 556份病原学样品,未检出PPRV核酸阳性。
不同类型场点情况
2017—2020年,丽江市不同类型场点的统计结果(表3)显示:不同场点类型的群体免疫合格率和个体免疫合格率均有显著差异(P<0.01),其中种羊场最高,商品羊场和散养户次之,均达到了国家要求的70%最低标准,而屠宰场最低,个体免疫合格率仅为33.40%。
讨论
PPR给我国养羊业带来了巨大危害。目前该病尚无有效治疗方法,疫苗免疫是预防和控制该病的主要手段。2017—2020年丽江市虽未检测到PPR病原学阳性样品,但免疫抗体水平整体不高,远低于近年报道的周边省份。免疫合格率也呈波动性下滑趋势,2020年的个体免疫合格率未达到国家规定的70%的最低标准。2014年丽江市首次发生PPR疫情后,全市组织完成了高密度的群体免疫,但此后仅对新出生羊及新引进羊进行补免,而PPR活疫苗的免疫有效期为26个月,因而导致免疫合格率下降。2019年根据国家动物疫病强制免疫计划,丽江市再次对所有羊只开展普免,免疫合格率又有所提高。2020年,受新冠肺炎疫情影响,人员流动受限,村防疫员不能及时对新出生羊及新引进养只进行补免,这可能是导致免疫抗体合格率有所下降的原因之一。此外,2020年合格率下降也与采样不科学有关,2020年规模场采样量降低,散养户采样量增加,整体采样量有所减少。
从不同类型场点情况来看,种羊场免疫效果最好,散养户和屠宰场免疫效果较差,尤其是屠宰场,抗体免疫合格率仅为33.40%,这可能与不同类型场点的生产管理、生物安全水平以及免疫制度落实情况有关。丽江市对于羊只调运,在出具动物产地检疫证明时,要求调运羊群PPR免疫抗体合格,因而调运相对频繁的种羊场和商品场,为确保免疫抗体合格,会及时补免,从而提高了免疫抗体合格率。而屠宰场收购的羊群多为农户出栏羊只或淘汰羊只,多数未进行补免,从而导致个体免疫合格率低。
丽江市连续4年未检测到病原学阳性样品,表明首次发生的PPR疫情,因处置措施得当并未形成病原扩散和定殖,因此在未引入新疫源的前提下,本区域再次发生PPR疫情的风险较小,今后需要重点加强引入羊群的检疫监管工作。
受地理环境、养殖方式及实验条件限制,本研究采用的是配额抽样方法,会存在采样主观性、选择性偏差等,导致结果与实际可能存在一定的误差,但整体上能反映丽江市PPR的免疫抗体水平及病原感染情况,可为当地PPR防控提供参考。
结论
总体来看,丽江市PPR整体防控效果较好,但免疫抗体合格率不高,且呈下滑趋势,尤其是散养户饲养羊群及屠宰羊群处于低保护状态,因而有散发疫情的风险。丽江市应继续加强PPR强制免疫和监测,加大羊只引种检疫和调运监管力度,规范屠宰环节羊群监管,积极探索动物疫病净化和区域化管理,提升该病的整体防控能力。
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