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摘要：本实验所采用的清凉冲剂，是以石膏为主要成分的中药复方。实验动物选择体重基本一致的农大三号雏鸡60只，随机平均分为2组。实验从第7日龄起，至49日龄时止，周期共计6周。其中实验组饲喂中药煎剂（浓度为1g/ml），喂药量与饲料量比为1：1000；对照组不喂药，两组均正常饮水。在第7，21，35，49日龄时，两组分别剖杀5只，取胸腺、法氏囊、脾脏等免疫器官，称量并计算免疫器官指数；每周进行心脏采血,用血凝抑制法(HI)测定各组血清NDV抗体水平；采用腹腔巨噬细胞功能测定法，计算其吞噬百分率和吞噬指数。实验结果显示：与对照组相比，免疫器官指数、NDV抗体水平以及腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数各项指标实验组均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。说明清凉冲剂可以有效增强鸡的免疫功能。
关键词：清凉冲剂 免疫功能 鸡
清凉冲剂是以石膏为主要成分的抗热应激中药方剂，其作用机理是通过增强散热和提高机体免疫水平这两个方面来达到抗热应激的目。石膏又名白虎，是中医清热泻火治气分实热证的要药，在20世纪80年代前主要是通过研究石膏有无退热作用，来对其作用机制进行探讨。在近年的研究中发现，石膏亦能够非特异性增强动物细胞及体液免疫水平。
本研究将观察服用清凉冲剂后，鸡免疫器官指数、NDV抗体水平以及腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数各项指标的变化，来探讨含有石膏成分的清凉冲剂对鸡免疫功能的影响。从而为清凉冲剂的开发奠定一定的理论基础。
1. 材料与方法
1.1材料
1.1.1 药物及主要试剂
清凉冲剂，主要成分以石膏为主，藿香等中草药为辅。采用传统中药煎煮方法将中草药制成水煎液，并浓缩成1g/ml，作为实验药剂。鸡新城疫克隆C30活疫苗（SPF）、鸡新城疫低毒力活疫苗（Lasota 系）(辽宁省益康生物制品厂产品)，购自中国兽药监察所。5 %的鸡红细胞悬液，由笔者所在实验室自行制备。
1.1.2 实验动物与饲养管理
农大3号1日龄公雏，购自北京昌平区鸡场。雏鸡饲喂北京震亚饲料厂生产的蛋雏鸡全价料（ME＝12.18MJ/kg，CP＝18.45％），自由采食与饮水。光照时间1～3日龄为23小时/天，从4日龄起，每天减少2h，直至8小时/天时为止。鸡舍内温度1～3日龄为30～33℃，4～7日龄为28～30℃，以后每周降低2℃，直至18～20℃为止。
1.2实验方法
1.2.1免疫器官指数的测定和计算
在7、21、35和49日龄，实验组和对照组各随机抽取5羽试验鸡，称重后迅速处死并完整剥离每只鸡的胸腺、脾脏和法氏囊，称重。按照下述公式计算每只鸡的胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数：免疫器官指数= 免疫器官重(mg)/体重(g)。[5]用MINITAB Release 10.1软件进行平均数运算和方差计算，分析各实验组各个指标之间的差异显著性。（下同）
1.2.2NDV血清抗体水平的测定
鸡新城疫的免疫采用鸡新城疫克隆C30活疫苗（SPF），于7日龄滴鼻点眼首免，1头份/只；21，35日龄时用鸡新城疫低毒力活疫苗（Lasota 系）饮水进行二免和三免，2头份/只。分别于7、14、21、28、35、42和49日龄采血分离血清，实验组与对照组分别随机抽取10只鸡。按常规方法用96孔“V”形血凝板进行血凝抑制试验（HI），测定NDV血清抗体的血凝抑制效价，以log2表示。
1.2.3鸡腹腔内巨噬细胞吞噬功能的测定
取49日龄实验组和对照组鸡各5只。检测前1天每只鸡腹腔注射质量分数为0. 5 %的淀粉生理盐水1.0ml，检测时每只鸡腹腔注射体积分数为5 %的鸡红细胞悬液1.0 ml；30min后颈静脉放血致死鸡只。经腹膜注入生理盐水3.0ml , 轻揉腹部, 然后吸出腹腔洗液1.0 ml，平均滴于2 片载玻片上，37℃温育，PBS漂洗，除去未贴片细胞，晾干，丙酮-甲醇（1∶1）固定，姬姆萨染色，每片油镜下计数200 个巨噬细胞所吞噬的鸡红细胞数。[6,7,8]按下列公式计算吞噬百分率和吞噬指数：
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