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猪群监测新方法——唾液检测法
现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2011/4/7 9:58:53 关注：347 评论： 我要投稿
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血清学检测在猪群免疫监测和疾病诊断中发挥着重大作用，但由于血液采集对技术要求较高，必须具备专用的血清分离设备(如离心机等)，且操作程序复杂，况且一旦发生溶血或污染，对检测结果影响较大，人们一直期望有新的检测方法诞生。
唾液学方法是其中较有发展前景的方法之一。
唾液学方法的优点是采集的唾液可以直接冷冻，唾液中的各种酶类(如唾液淀粉酶、碱性蛋白酶)和抗菌物质可以使样品保存更长时间。
采集唾液的方法简单，所以唾液学方法对猪只机体无任何损伤，不会造成猪只应激，值得推广。
另外，唾液中的抗体以分泌型抗体为主，对于免疫功能的解释具有特殊的意义。
唾液采集方法：
唾液采集的方法非常简单，利用猪只的好奇心理以及嗜好咀嚼的特性，采用纱布球采集唾液。将纱布制作成纱布球固定于金属线前端，猪只会主动咀嚼纱布球，唾液将通过虹吸现象进入纱布球内。将纱布球内的唾液挤压出，释放至样品袋内，再将样品袋内的唾液转移至离心管内。
检测方法：
采集的唾液必须进行预处理，方可进行抗体或病原等项目的检测。
1040转/分钟，离心1分钟，去除杂质，留取上清。
按照常规程序进行ELISA（酶标记免疫吸附测定）或PCR（聚合酶链反应）检测。
结果判定：
1.唾液中的病原检测若呈阳性，说明机体正在排毒。
2.由于唾液中的抗体和血液中的抗体不是同一个概念，必须避免使用对血清抗体的理解来解释唾液中抗体的作用。血清中的抗体大部分为循环抗体，某些循环抗体的抗病活性较低，只能与抗原起机械结合作用，而分泌型抗体的产生速度是血清循环抗体产生速度的两倍，分泌型抗体除具有机械结合作用外，尚具有对抗原的主动捕捉作用，补体的经典和补充途径激活作用，ADCC（抗体依赖细胞介导的细胞毒性作用）作用以及凝集作用。
为了便于理解唾液中的抗体作用，可以采用相对抗体(相对量抗体)的概念。
相对抗体：
指按照同一方法检测出抗体量的相对大小，往往指同一实验室、同一类试剂盒、同一类样品所得出结果的相对大小(百分比表示)。相对抗体的修正参数必须建立在大量检测数据的基础之上，这些数据必须包括完全阴性值、低抗体滴度值、中抗体滴度值和高抗体滴度值，样本以大样本量为宜，标准差至少在30以上。
相对抗体的概念解决了不同实验室之间、不同试剂盒之间和不同类型样品之间(如血液与唾液)的测定值的可比性问题，相对抗体值的大小亦不受试剂盒阴阳性对照值大小的影响。而绝对量抗体则不具备此类特性。
10份唾液中均检出猪瘟病毒抗体，OD值(阻断ELISA)和相对抗体如下表所示(见表1)。10份唾液中均检出环状病毒抗体，OD值和相对抗体如下表所示(见表2)。10份唾液中均检出猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体，OD值和相对抗体如下表所示(见表3)。
唾液中出现分泌型抗体，说明机体近期被病原感染或近期接受弱毒疫苗的免疫接种;分泌型抗体的出现，也同时说明机体具备对某病原的实质性抵抗能力。
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