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摘要 马立克氏病是一种重要的免疫抑制病，严重影响养鸡业的健康发展。通过对一例发生马立克氏病继发H9亚型禽流感的蛋鸡群 的症状进行分析、剖检变化及实验室诊断，提出了治疗和预防措施，为马立克氏病和H9亚型禽流感的防治提供参考。
关键词 马立克氏病；H9亚型禽流感；继发感染；诊断；治疗
中图分类号 S858．31 文献标识码A 文章编号0517-6611(2008)30-13165-02
Diagn~is and q[]matment ofMarek’S Disease Secondary It9 Subtype Avian Influenza in Layer Flocks
ZHONG Deng-ke et al (Anhui Key[al~ralory of Poultry Disease Prevention and Surveillance，A,flaui Science and Technology University，Fengyang，An—
hui 233100)
Abstract Marek’S disease is nil important immunosuppressive disease．which seriously afects廿le healthy development of the poultry industry．Symptom
analysis，autopsy change and laboratory diagnosis of a ease of Marek’S disease secondary 1-19 subtype avian influenza in layer flocks were introduced．qhe
control and prevention lneasul~s were put forward，which ofered references for the control of Mm’ek’S disease and H9 sub type avian infl uenza．
Key words Marek’S disease；H9 subtype avian infl uenza；Secondary infection；Diagnosis；Treatment
鸡马立克氏病(MD)是由一种疱疹病毒引起的淋巴组织 增生性肿瘤性疾病，也是一种高度接触性传染病。该病呈世界性分布，我国于20世纪70年代初发现有该病存在，随后在 各地普遍流行，通过疫苗接种基本控制了该病的广泛流行。 但近年来，由于超强毒株的出现，鸡群免疫状态不良和免疫 操作不确实等因素，该病免疫失败情况较多。由于该病破坏 法氏囊、胸腺、脾脏等免疫器官，引起严重的免疫抑制，发病 鸡群容易感染新城疫、禽流感、鸡白痢、球虫病、大肠杆菌病等，使病情恶性循环，更加严重[1-3]。在临床实践中遇到某 商品蛋鸡群于160日龄左右发生鸡马立克氏病，继发感染H9 亚型禽流感，现将诊治情况报道如下：
1 发病情况及临床症状
2008年3月，安徽省凤阳县某商品蛋鸡场饲养的3 000 羽160日龄左右罗曼蛋鸡，先后出现呼噜、罗音、咳嗽等明显 的、轻重不一的呼吸道症状，采食、饮水和产蛋率大幅度下 降，排黄色或绿色稀粪；部分鸡卧伏，呈劈叉姿势，腹部膨大， 按压可摸到肿大的肝。鸡群逐渐出现营养不良、消瘦、精神 沉郁呈昏睡状态，发病持续时间长，发病鸡多因衰竭而死亡， 累计死亡率较高。发病鸡群开产时间延迟，产蛋率上升慢， 产蛋高峰不明显。耐过鸡群仍有零星死亡且持续不断，并出 现具有神经症状的病鸡。全场鸡群于1日龄接种了马立克 氏病HVT疫苗，7日龄接种了新支二联苗，14日龄接种了法 氏囊病疫苗，23日龄接种了新支二联苗，35日龄接种了法氏 囊病疫苗，45日龄接种了H5亚型禽流感灭活疫苗，105日龄 接种了新支二联苗。发病期间，曾投给恩诺沙星、矿物质、维生素添加剂7 d，未见明显疗效。
2 剖检病理变化
病鸡鸡冠和肉髯苍白，腹部膨大；肝、脾、肾和卵巢等脏 器均有不同程度地肿大或肿瘤结节，肝肿大尤为明显，有的 颜色淡如猪脂，肿瘤组织呈弥漫性浸润，肝表面粗糙呈细小 的颗粒状，肝脏肿大3倍，几乎占据了整个腹腔，有的肝脏发生多发性肿瘤，切面平滑，呈灰白色。气管粘膜充血、水肿、 内有多量粘液，有的形成干酪样栓子，胸腺出血，部分鸡卵子 游离于腹腔，出现卯黄性腹膜炎、卵胞出血、液化、输卵管炎 症，内有多量粘性分泌物。瘫痪病鸡的坐骨神经、臂神经丛单侧性增粗，呈黄白色水肿样，横纹消失。
3 实验室检验
3．1 病料触片镜检无菌取病、死鸡的心、肝、脾触片，干燥 固定后分别做革兰氏染色、镜检，结果未观察到细菌。
3．2 细菌分离培养无菌将上述病料分别接种于普通肉 汤、鲜血琼脂和麦康凯琼脂平板培养基，37℃培养24 h后观 察，结果未见菌落生长。
3．3 琼脂扩散试验采集30只病、死鸡的羽髓，按1：5的比 例加无菌生理盐水研磨，反复冻融3次，4 000 r／min离心l5 min，取上清液作为待检抗原，与马立克氏病的标准阳性血清 进行琼脂扩散试验，放入37℃恒温箱24～48 h后观察结果。 同时采集30份鸡血，分离血清作为待检血清，与马立克氏病 的标准抗原进行琼脂扩散试验，放入37℃恒温箱24~ 48 h 后观察结果。结果显示，待检抗原3O份中有28份为阳性，占 93．3％；待检血清30份中有11份为阳性，占36．7％。
3．4 新城疫、禽流感(H5、H9)血凝抑制试验将上述30份 鸡血清，进行血凝抑制试验(HI)检测新城疫、H5和H9亚型 禽流感抗体。结果表明，新城疫和H5亚型禽流感抗体水平 较整齐，均值分别达到28和26，而H9亚型禽流感抗体水平参差不齐，低的22，高的达211。
4 诊断
该蛋鸡群自购人后接种过马立克氏病HvT疫苗，新城 疫疫苗和H5亚型禽流感灭活疫苗，但发病鸡群临诊表现仍 有鸡马立克氏病典型症状和明显的病理病化，且MDV抗原 检测结果阳性，说明MD疫苗免疫失败导致野毒感染。但该 发病鸡群同时还有呼吸道症状和产蛋率大幅度下降，这不符 合单纯马立克氏病感染规律，说明有其他疾病混合感染，而 临床有呼吸道症状和产蛋率下降疾病现象最常见为ND或 H9亚型禽流感。抗体检测发现，鸡群NDV和H5亚型禽流感抗体水平整齐度较好，基本维持在28和26，且均达到保护水平，应为疫苗免疫后所获得的保护抗体；而H9亚型禽流感抗体整齐度不好，低的22，高的达29，且没有接种过H9亚型禽流感疫苗，说明该鸡群感染了H9亚型禽流感。
根据流行病学调查、临床症状和病理变化观察以及实验 室诊断，初步判断此次鸡群发病为马立克氏病继发H9亚型 禽流感感染所致。
5 防治措施
马立克氏病和H9禽流感目前尚无有效的治疗方法，除 了做好生物安全措施外，疫苗免疫是防治的关键，该鸡群在 确诊后，已进行了H9亚型禽流感疫苗紧急免疫接种。鸡群 投服电解多维等以提高抵抗力，投服强力霉素等抗生素以防 止继发细菌感染，并对所有发病鸡用庆大霉素肌注，氟哌酸 原粉饮水，全群在饲料中拌用吡哌酸拌料，连喂7 d。并采取以下措施：① 改善饲养条件。加强鸡舍通风换气，降低鸡群饲养密度。②发现病鸡立即隔离、淘汰，病死鸡作好无害化处理。③加强环境卫生和消毒。及时清理鸡粪，对鸡舍用百毒杀、碘制剂消毒液交替带鸡消毒，每日1次，连续消毒7 d。对用具、食槽、水槽、接触病鸡的人员、污染场地严格消毒。 ④尽可能减少各种应激因素的刺激。
经采取以上措施，在注苗后第6天开始，发病鸡数逐渐 减少；第12天后，除个别鸡死亡外，该鸡群病情基本稳定，没再出现新的发病死亡病例。
6 结论与讨论
通过采取以上综合性防治措施，此次疫情得到了有效的 控制，并取得了较好的防治效果。结合上述的初步诊断结果 和防治疗效，可以确诊此次鸡群发病为马立克氏病继发H9 亚型禽流感感染，马立克氏病为原发性疾病，H9亚型禽流感为继发性疾病。
该场鸡群马立克氏病疫苗免疫失败是引起该病暴发的 重要原因。据调查，该鸡场以前曾发生过马立克氏病，是老 疫区。马立克氏病的免疫保护产生较晚，经免疫15～21 d后 才能产生有效的免疫力，目前我国使用的火鸡疱疹病毒 (HVT)疫苗接种后的免疫保护率仅达50％ ～80％。而该场进雏前鸡舍又未经较长时间的空舍，再加上雏鸡舍与大鸡舍间隔距离较近，又不注意隔离，人员流通频繁，消毒措施跟不上，雏鸡早期容易受到野毒的攻击。野毒一旦先占领靶细胞后，疫苗毒株就不能很好地增殖，抗体的产生就不理想，易造成免疫失败而感染发病。早期感染可能是该场这批已免疫接种的蛋鸡暴发鸡马立克氏病的主要原因。因此，对于马立克氏病的防治，除了加强饲养管理和生物安全措施外，必须做好免疫接种工作，雏鸡出壳后1～3 d内必须注射马立克氏病疫苗。目前使用的有3种疫苗：人工致弱的I型(如 CV1988)、自然不致瘤的Ⅱ型(如SBI，Z4)和Ⅲ型HVT(如 FC126)。在马立克病常发区10～14日龄再加强免疫1次，以防止母源抗体干扰，弥补1日龄免疫缺陷。
鸡感染马立克氏病后，肌体的防御机制遭到破坏，引起免疫抑制，以致于免疫应答微弱，造成新城疫、禽流感、大肠杆菌和球虫等其他病原的易感性[4]。这是引起此次H9亚型禽流感感染的根本原因。因此，在临床上应加强免疫抑制性疾病的防治工作。对于马立克氏病病毒、传染性法氏囊病病毒和呼肠孤病毒等的感染，进行疫苗免疫接种是控制它们的主要方法，尤其是种群免疫。同时应加强包括免疫抑制性疾病在内的各类病毒性传染病的抗体监测工作，如果有免疫抑制性疾病的发生，必须对免疫程序加以调整。而对于禽白血病、网状内皮增生症等疾病，在目前还没有有效疫苗预防控制的情况下，只能凭实验室诊断，及时淘汰阳性鸡，从而达到良好的防制效果。同时，应适当应用药物控制继发感染。鉴于一些家禽免疫抑制性疾病感染对免疫功能的损害，易引起一些细菌性疾病的继发感染，因此在饲料中(如育雏阶段)添加一些抗菌药物(但禁用一些可能引起免疫抑制的药物)以防止禽群的细菌性继发感染[5-6]。
自2004年我国首次报道家禽中发生H5N1亚型高致病 性禽流感疫情以来，各级政府高度重视对高致病性禽流感的 防治工作，政府出资对使用H5亚型禽流感灭活疫苗予以补 贴，规模化养殖场和专业户对H5亚型禽流感灭活疫苗的接 种工作较为重视。但对于H9亚型禽流感灭活疫苗，由于没 有政府补贴，一些养殖户往往不太重视，疏于防范。如该案 例鸡场在制定免疫程序时由于没有考虑到H9亚型禽流感灭 活疫苗的接种问题，因此鸡群一旦有野毒入侵，往往导致疫 情暴发。禽流感的防制措施，关键是做好免疫接种，最好是 选择H5+H9二价油乳苗进行预防，也可在接种H5亚型的 同时接种H9亚型。由于该病的发病日龄越来越早，有时仅 靠对鸡苗本身接种已来不及，建议有关种鸡场加强对H9亚 型的免疫接种措施，除可保护种鸡本身的产蛋率外，尽可能 增强其商品鸡苗的H9亚型母源抗体，以获得早期的保护[7-8]。
生产实践中还必须注意，对感染H9亚型的鸡群注 射药物治疗要慎重，避免应邀而窒息死亡。对ND和H9亚 型}昆合感染的鸡群，如仅按ND诊断采用ND活疫苗紧急接种，有可能会造成极高的死亡率，故应特别慎重[9]。
参考文献
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沙：中国畜牧兽医学会禽病学分会，2OO6：364-369．
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