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H7N9亚型禽流感病毒非结构蛋白-1真核表达载体的构建与表达


现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2014/3/19 22:47:27 关注:348 评论: 我要投稿

  近日,江苏省疾病预防控制中心病原微生物研究所,卫生部肠道病原微生物重点实验室研究人员发表论文,旨在构建甲型H7N9亚型禽流感病毒非结构蛋白NS1真核表达载体并转染293T细胞以表达其编码的蛋白。研究指出,成功构建了H7N9非结构蛋白NS1真核表达载体,该表达载体的构建为后期建立稳定表达NS1蛋白的细胞模型和NS1蛋白功能研究奠定基础。该文发表在2013年第10期《 南京医科大学学报(自然科学版)》杂志上。
  从南京分离株H7N9流感病毒[A/Nanjing/1/2013(H7N9)]提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增NS1全长基因,将其克隆至pMD18-T载体中构建pMD18-T-NS1质粒,以pMD18-T-NS1质粒为模板扩增NS1基因。双酶切NS1基因PCR产物与PXJ40-MYC后,连接构建真核表达载体PXJ40-MYC-NS1,经酶切及测序鉴定后将质粒转染到293T细胞中,通过Western blot鉴定NS1蛋白的表达。
  经双酶切、测序鉴定证实NS1基因的真核表达载体构建成功。Western blot法可见NS1基因编码蛋白的成功表达。
  相关链接:http://med.wanfangdata.com.cn/Journal/njykdxxb.aspx

文章编辑:现代畜牧网     
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