|
家禽马立克氏病的诊断
现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2010/6/14 13:19:49 关注：667 评论： 我要投稿
|
|
MD诊断主要应与淋巴白血病和网状内皮组织增殖病相区别。目前诊断最可靠的方法仍然是临床综合诊断，特别是病理变化。用单克隆抗体做间接荧光检测、PCR和基因探针，可区分MDV的三种血清型毒株。
MDV是高度细胞结合性病毒，体内病毒感染和扩散是通过被感染细胞直接接触而发生的。在体外，细胞融合可加强细胞与细胞间感染传播，这通常是通过细胞间桥来实现的。病毒与细胞间的相互作用有三种类型：生产性感染、潜伏感染和转化感染。
所有三种血清型的细胞结合性原种和脱离细胞的火鸡疱疹病毒原种都来自生产性感染的细胞培养物。
生产性感染（productive infection）有三种类型。鸡羽毛囊上皮细胞中的MDV产生完全生产性感染，可产生大量有囊膜的、具有完全感染性的病毒粒子。通过琼脂扩散试验（AGP），病毒与相应抗血清形成沉淀线。
MDV在鸡体内细胞中主要是限制性生产性感染，大部分病毒粒子无囊膜，脱离细胞后不具感染性。在细胞培养物中可能有数量不定的有囊膜的病毒粒子， 并具有感染性。HVT可产生大量脱离细胞病毒，因此HVT可以冻干。生产性感染可使各种类型的细胞溶解，产生核内包涵体，导致细胞崩解，形成渐进性坏死。生产性感染又称溶细胞性感染。
潜伏感染（latent infection）是非生产性感染，病毒基因组拷贝很低，病毒有些基因可能被转录，但不翻译成蛋白质。三种血清型的病毒都可产生潜伏性感染。
转化感染（transforming infection）仅发生于MDV血清Ⅰ型病毒。转化性感染与潜伏性感染不同。潜伏性感染时，有MDV基因组存在，但非常有限度的基因表达，而转化感染期间病毒基因组大量表达，但不同的细胞系，其基因拷贝数随条件不同而有差异。转化感染细胞表达的DNA高度甲基化，但生产性感染细胞未发现此现象。转化感染细胞中可检测到特异性pp38基因表达。这是转化感染细胞的一个重要特征。MD肿瘤细胞中还可检测到一种 MDV肿瘤相关的表面抗原（MATSA），是一种宿主抗原，在MD鉴别诊断中具有重要意义。
（一）病毒分离 病毒分离可作为诊断参考，但更重要的是流行病学研究，如鉴别强毒、超强毒，研制相应疫苗，制定防治策略。应注意的是，同一鸡体内可能存在三种血清型的病毒。
分离病毒的病料一般用肝素化全血、血液白细胞、羽毛尖、羽毛囊上皮、肾和脾细胞、肿瘤细胞等（待接种样品可在4℃保存24h），接种DEF和CK，一般盲传6代以上。但淋巴瘤和潜伏感染组织中，很少检测到含有MDV抗原的细胞。
分离物可用特异型单克隆抗体做间接荧光检测（IFA），也可用探针、PCR方法鉴定。
（二）抗体检测
1．琼脂扩散试验（AGP） MDV琼脂凝胶沉淀试验，要用8%的NaCl配制1%琼脂糖，即需要在高盐琼脂板上进行。本法常用于监测感染或疫苗接种免疫后的鸡群。
2．ELISA试验和PCR检测 用感染的完整细胞包被ELISA板。ELISA试验主要用于单克隆抗体研制和无特定病原鸡群的监测。
PCR和免疫组化技术可作为感染标准的鉴别诊断依据。PCR技术可检测MDVⅠ型毒株的病毒特异性DNA，用特异性抗体做免疫组化染色可检测MD转化细胞上表达的MDV抗原（如pp38），能排除禽白血病病毒或网状内皮组织增殖病病毒。
3．病毒中和试验、免疫荧光试验 主要用于流行病学调查和研究领域。
病毒分离不能作为主要诊断标准，因为鸡常常带毒而不发病，诊断应以流行病学、病理学和肿瘤特异标记等为本病的特异诊断准则，其诊断主要依据：
（1）龄期，多发生在4～16周龄。4周龄以下的鸡常见到心脏上有白色小结节，易误诊为肿瘤，这种情况多发生在2周龄的鸡，而白血病多发生在16周龄以上的鸡。
（2）神经病变，外周神经淋巴组织增生性肿大，特别是颈部迷走神经病变；臂和坐骨神经丛肿大，往往是单侧性的，仔细比较二侧神经可作出判断。
（3）16周龄以下鸡发生多组织的淋巴肿瘤。大于16周龄的MD病鸡可见胸腺和法氏囊萎缩，在没有法氏囊肿瘤的情况下出现内脏淋巴瘤。
（4）MD肿瘤病理学检查可见大小不一的淋巴细胞。
（5）MD肿瘤相关表面抗原（MATSA抗原）和IgM染色的膜免疫荧光，以及用免疫组化方法染色检测PP38抗原表达，对MD肿瘤都具有诊断意义。
（6）皮肤肿瘤和虹膜褪色，瞳孔不规则也是诊断的重要依据。
组织学或细胞学方法可提高诊断的准确性。
MATSA 是一种与活化的T细胞相关的宿主抗原，有诊断价值。5%～40%的MD淋巴瘤细胞为MATSA抗原阳性。此外，IgM染色的膜免疫荧光也有诊断价值，5% 的MD淋巴瘤细胞中有IgM存在。应用免疫组化方法染色可在一小部分MD淋巴瘤细胞中检测到pp38抗原表达，也可作为诊断标准。MD细胞表面标记还有 Ia（Ⅱ类组织相容性复合物）抗原呈阳性。大多数细胞表达CD4抗原，这有助于区别MD淋巴瘤和网状内皮组织增殖病淋巴瘤。而淋巴细胞性白血病，不仅发病龄期上有较大差别，且它通常侵害法氏囊，其肿瘤细胞上有B细胞标记，也可检测淋巴白血病病毒特异基因组或抗原，从而与MD区别开来。
|
|
|
| 文章编辑：现代畜牧网 |
| 【进入社区】【进入专栏】【推荐朋友】【收藏此页】【大 中 小】【打印此文】【关闭窗口】 |
|
|
| 发表评论 (当前没有登录 [点击登录]) |
|
|
信息发布注意事项：
为维护网上公共秩序和社会稳定，请您自觉遵守以下条款：
一、不得利用本站危害国家安全、泄露国家秘密，不得侵犯国家社会集体的和公民的合法权益，不得利用本站制作、复制和传播下列信息：[查看详细]
（一）煽动抗拒、破坏宪法和法律、行政法规实施的；
（二）煽动颠覆国家政权，推翻社会主义制度的；
（三）煽动分裂国家、破坏国家统一的；
（四）煽动民族仇恨、民族歧视，破坏民族团结的；
（五）捏造或者歪曲事实，散布谣言，扰乱社会秩序的；
（六）宣扬封建迷信、淫秽、色情、赌博、暴力、凶杀、恐怖、教唆犯罪的；
（七）公然侮辱他人或者捏造事实诽谤他人的，或者进行其他恶意攻击的；
（八）损害国家机关信誉的；
（九）其他违反宪法和法律行政法规的；
（十）进行商业广告行为的。
二、互相尊重，对自己的言论和行为负责。
三、本网站不允许发布以下信息，网站编辑有权直接删除：[查看详细]
（一）、重复(恶意灌水)发布的信息；
（二）、在本栏目内发布例如供求信息、代理招商、会展、求职招聘等含有广告宣传性质、不符合网站栏目的信息内容；
（三）、与本网站主体定位不相关的信息等等。
四、本网站有权删除或锁定违反以上条款的会员账号以及该账号发布的所有信息。对情节恶劣的，本网将向相关机构举报及追究其法律责任！
五、对于违反上述条款的，本网将对该会员账号永久封禁。由此给该会员带来的损失由其全部承担！ |
|
|
| 声明：本网刊登的文章仅代表作者个人观点，文章内容仅供参考，并不构成投资建议，据此操作，风险自担。如果转载文章涉嫌侵犯您的著作权，或者转载出处出现错误，请及时联系文章编辑进行修正，电话：010-65283357。本网原创文章，转载请注明出处及作者。感谢您的支持和理解！ |
|
