20世纪80年代,肽被完整吸收的观点及其生理作用开始被人们重视。随着活性肽吸收理论的提出及其生理活性的发现,使其成为当今医药、食品、生物界的研究热点。据报道,活性肽可以作为饲料添加剂预防和治疗畜禽的疾病,有助于解决畜禽产品的安全问题,可避免传统抗生素的耐药性问题,在畜牧业有广阔的应用前景。
研究表明,生物活性肽属于多功能因子,具有多种生物学功能,如抗病毒、抗癌、抗血栓、抗高血压、免疫调节、激素作用、抑菌、降胆固醇等作用。本试验研究了2种人工合成生物活性肽,由上海九川公司通过对原有多肽的改良及产品序列的筛选,应用FMOC多肽固相合成原理,采用固相合成柱手工合成。旨在了解两种合成活性肽应用于肉鸡是否具有影响其生长性能、生理代谢和抗氧化功能的生物活性,从而为活性肽产品在动物生产中的开发应用提供理论依据。
1材料与方法1.1 试验材料 新合成的2种生物活性肽,由上海九川生物公司提供。2种活性肽属于短链的直链肽,肽I由9个氨基酸构成,肽Ⅱ由7个氨基酸构成,结构组成排列不同。
1.2 试验分组及饲养管理 选取体重相近的健康1日龄AA肉仔鸡1 620只,随机分为9个处理,每个处理6个重复,每个重复30只鸡。
空白对照组饮用自来水,饲喂基础饲粮(;杆菌肽锌对照组饮用自来水,于基础饲粮中添加200 mg/kg杆菌肽锌;试验组分别于饮水中添加不同剂量生物活性肽,2种活性肽均设置低(10 μg/kg体重)、中(20 μg/kg体重)、高(40 μg/kg体重)3个剂量。
混合肽组(20 μg/kg体重,2种合成多肽按1:1比例混合),所有试验组均饲喂基础饲粮。按照肉仔鸡常规饲养管理方法饲养试验鸡,各组饲养管理条件一致。饲养分为1~21日龄,22~42日龄2个阶段。
2结果2.1 生物活性肽对肉鸡生长性能的影响 1~21日龄,肽Ⅱ中剂量组日均耗料量、日增重均高于空白对照组合杆菌肽锌对照组(P>0.05),肽Ⅱ中剂量组日均耗料量显著高于肽I低剂量组(P<0.05)(表1)。1~21日龄饲料增重比,肽Ⅱ高剂量组显著低于空白对照组(P<0.05),其余各试验组均略低于空白对照组(P>0.05)。各试验组之间及其与杆菌肽锌对照组间耗料量、日增重、饲料增重比均无显著差异(P>0.05)。
可见,饮水供给10~40 μg/kg体重肽I和肽Ⅱ均有提高1~21日龄肉鸡平均日增重趋势,对耗料量未产生显著影响,肽Ⅱ以40 μg/kg体重的饮水供给可显著降低饲料增重比。结果表明,肽Ⅱ以40μg/kg体重的饮水供给对提高肉鸡生长性能效果较好。
22~42日龄日均耗料量各组间均无显著差异性(P>0.05)(表2)。各试验组肉鸡的日均增重不同程度高于对照组。肽I中、高剂量组和肽Ⅱ低、中、高3个剂量组均显著高于杆菌肽锌对照组和空白对照组(P<0.05),其中肽I高剂量组日均增重最大,较杆菌肽锌对照组和空白对照组分别提高了9.29%、10.57%,肽I低剂量组与2个对照组及混合肽组无显著差异(P>0.05);肽I高、中剂量组均显著高于肽I低剂量组(P<0.05);肽Ⅱ低、中、高3个剂量组之间差异不显著(P>0.05)。
22~42日龄各试验组肉鸡的饲料增重比均不同程度低于对照组。与空白对照组比较,除肽I低剂量组外(P>0.05),其余各试验组均显著降低(P<0.05),其中肽Ⅱ、肽I高剂量组饲料增重比分别比空白对照组低12.08%、11.25%;与杆菌肽锌对照组比较,肽I和肽Ⅱ高剂量组饲料增重比显著降低(P<0.05),分别降低了10.13%和10.97%,其他试验组略有降低(P>0.05)。肽I高剂量组饲料增重比显著低于肽I低剂量组(P<0.05),略低于肽I中剂量组(P>0.05)。肽Ⅱ低、中、高3个剂量组之间差异不显著(P>0.05)。
可见,饮水供给20、40 μg/kg体重肽I和10~40 μg/kg体重肽Ⅱ均可显著提高22~42日龄肉鸡平均日增重,降低饲料增重比。
2.2 生物活性肽对肉鸡血清生化指标的影响21日龄时,各组间肉鸡血清白蛋白、总蛋白含量及42日龄血清总蛋白含量、碱性磷酸酶活性均差异不显著(P>0.05)(表3)。42日龄时,肽I高剂量组和肽Ⅱ中、高剂量组及混合肽组肉鸡血清白蛋白均显著高于杆菌肽锌对照组及空白对照组(P<0.05),其中肽Ⅱ中剂量组最高,较杆菌肽锌和空白对照组分别提高了17.87%和13.38%;7个试验组之间差异均不显著(P>0.05)(表3)。21日龄时,肽I中、高剂量组和肽Ⅱ高剂量组碱性磷酸酶活性显著高于其他试验组及杆菌肽锌和空白对照组(P<0.05),其中肽I高剂量组最高,较杆菌肽锌和空白对照组分别提高了44.60%和47.51%。可见,40 μg/kg体重肽I和20、40 μg/kg体重肽Ⅱ及混合肽具有显著提高42日龄肉鸡血清白蛋白的作用,20、40 μg/kg体重肽I和40 μg/kg体重肽Ⅱ可以显著提高21日龄肉鸡血清碱性磷酸酶的活性。
2.3 生物活性肽对肉鸡血清抗氧化功能的影响21、42日龄时,各试验组肉鸡血清超氧化物歧化酶活性均显著高于杆菌肽锌和空白对照组(P<0.05),且均以肽Ⅱ中剂量组最高;肽I中剂量组略高于肽I高剂量组(P>0.05),显著高于肽I低剂量组(P<0.05);肽Ⅱ三个剂量之间差异不显著(P>0.05)(表4)。
21日龄,肽I中、高剂量组和肽Ⅱ中、高剂量组显谷胱甘肽过氧化物酶活著高于空白对照组(P<0.05),其中肽Ⅱ中剂量组最高,较空白对照组提高了22.79%;肽I中剂量组、肽Ⅱ中、高剂量组显著高于杆菌肽锌对照组(P<0.05);肽I中剂量组略高于肽I高剂量组(P>0.05),显著高于肽I低剂量组(P<0.05);肽Ⅱ中、高剂量组之间差异不显著(P>0.05),均显著高于肽Ⅱ低剂量组(P<0.05)。42日龄时,各试验组略高于对照组,但各组间差异均不显著(P>0.05)(表4)。
21日龄时,血清丙二醛含量除肽I低剂量组(P>0.05),其余各试验组均显著低于杆菌肽锌和空白对照组(P<0.05),其中肽Ⅱ高剂量组最低,较杆菌肽锌和空白对照组分别降低了28.68%和31.72%;肽I中剂量组略低于肽I高剂量组(P>0.05),显著低于肽I低剂量组(P<0.05);肽Ⅱ低、中剂量组之间差异不显著(P>0.05),均显著高于肽Ⅱ高剂量组(P<0.05)。42日龄时,肽I中、高剂量组显著低于空白对照组(P<0.05),其余各组间均差异不显著(P>0.05)。
可见,10~40 μg/kg体重剂量的肽I、肽Ⅱ可显著提高肉鸡血清超氧化物歧化酶的活性、显著降低21日龄肉鸡血清丙二醛含量。20~40 μg/kg体重剂量的肽I、肽Ⅱ可显著提高21日龄肉鸡血清谷胱甘肽过氧化物酶的活性、显著降低42日龄肉鸡血清丙二醛含量。
3讨论3.1 生物活性肽对肉鸡生长性能的影响 采食量、日增重及饲料增重比是反映肉鸡生长性能的重要指标。王静研究结果表明,日粮中添加抗菌肽粗提品,可以显著提高14、21日龄肉鸡的活重,显著降低36~42日龄肉鸡饲料增重比,具有提高肉鸡生产性能作用。
本试验结果表明,饮水供给10~40 μg/kg体重肽I和肽Ⅱ均有提高1~21日龄肉鸡平均日增重趋势,40 μg/kg体重肽Ⅱ组1~21日龄饲料增重比显著降低。22~42日龄,饮水供给20~40 μg/kg体重肽I和肽Ⅱ均具有显著提高22~42日龄肉鸡平均日增重,降低饲料增重比的作用。可见,2种活性肽产品具有提高肉鸡生长性能的作用,这与其具有促进营养物质消化吸收的作用机制密不可分。
3.2 生物活性肽对肉鸡血清生化指标的影响血清生化指标是反映机体全身或局部代谢变化和机体生理功能的重要指标。张爱忠等研究不同水平小肽制剂对黑凤鸡血清生化指标的影响,结果表明0.5%的添加量使血清总蛋白含量显著提高。本试验结果表明,40 μg/kg体重肽I和20、40 μg/kg体重肽Ⅱ及混合肽具有显著提高42日龄肉鸡血清白蛋白的作用,20、40 μg/kg体重肽I和40 μg/kg体重肽Ⅱ可以显著提高21日龄肉鸡血清碱性磷酸酶的活性。
血清白蛋白是血清总蛋白的主要蛋白质成分,对体内代谢物质的运输、营养均起重要的作用,碱性磷酸酶是成骨细胞的一种外酶,它的表达活性表明成骨细胞分化的特征,21日龄肉鸡碱性磷酸酶活性的提高,促进肉鸡骨骼发育,表明活性肽具有促进肉鸡生长的作用,其对机体生理代谢有一定影响。
3.3 生物活性肽对肉鸡抗氧化功能的影响抗氧化酶反映机体抗氧化的能力,丙二醛的含量显示机体脂质过氧化的程度,间接地反映细胞氧化损伤的程度。都海明等研究发现,4 000 U/kg抗菌脂肽能显著提高肉鸡血清总抗氧化能力T- AOC及肝脏SOD水平,8 000 U/kg抗菌脂肽能显著提高血清SOD水平,能够显著降低肝脏丙二醛(MDA)水平。
本试验结果表明,10~40 μg/kg体重肽I、肽Ⅱ可显著提高肉鸡血清超氧化物歧化酶的活性,20~40 μg/kg体重肽I、肽Ⅱ可显著提高21日龄肉鸡血清谷胱甘肽过氧化物酶的活性,10~40 μg/kg体重肽I、肽Ⅱ可显著降低21日龄肉鸡血清丙二醛含量的作用,20~40 μg/kg体重肽I具有显著降低42日龄肉鸡血清丙二醛含量的作用。可见,本试验活性肽产品具有提高肉鸡血清抗氧化酶的活性,降低自由基含量,提高抗氧化能力,抵抗机体氧化损伤,其作用机理鲜见报道,有待进一步研究。
4小 结本试验结果表明,饮水供给肽I和肽Ⅱ均有提高肉鸡生长性能的作用,提高肉鸡血清白蛋白的含量及21日龄血清碱性磷酸酶的活性,提高肉鸡血清谷胱甘肽过氧化物酶的活性,降低血清丙二醛的含量,可以显著提高肉鸡血清超氧化物歧化酶的活性。可见,2种活性肽有提高肉鸡生长性能,提高血清抗氧化功能的作用,推荐添加量为20 μg/kg体重。
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