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导语
本文针对小猪常年发生腹泻的规模猪场，进行了不同区域、不同来源的饮用水细菌计数检测，并在分离到细菌后选取了1种常见肠道致病菌进行了4种消毒药物的杀灭试验。结果表明，在该场不同来源和不同区域的饮用水中均存在总菌含量高，部分区域饮用水存在沙门氏菌、大肠杆菌含量高的问题。消毒药物对分离沙门氏菌的杀灭试验表明，试验中选取的消毒药物只有1种存在一定的杀灭效果，另外3种均没有杀灭作用。说明市面上消毒药物质量存在良莠不齐的现象。
对于生猪而言，水是不可缺少、无可替换的营养物质，具有体温调节、营养运输、生化反应、润滑和保护等功能。充足的饮水对于维持猪的健康和福利水平非常重要。优质的水源和供水充足是保证猪场正常生产必不可少的条件。猪场的饮用水既要充足又要符合卫生要求，二者缺一不可。不少猪场无自来水供应，多采用井水或周边河水。但若猪场采用没有经过净化和消毒的水，这样的水细菌含量较多，猪群直接饮用会造成一系列疾病，尤其是消化道疾病表现会更加严重。本文对规模猪场生猪饮用水进行了细菌分离检测，并从市面上选用几种消毒药物对分离的沙门氏菌进行了杀灭效果检测。现报告如下：
1 材料
主要试剂
药敏纸片购于杭州天和微生物，巧克力营养琼脂购于江门凯琳，麦康凯营养琼脂购于杭州微生物，沙门氏菌显色培养基购于上海欣中生物，4种消毒药物购于长沙某兽药店，主要包括戊二醛、复合酚、碘液及高效氯制剂。
样本来源
采自湖南省某1000头母猪的规模猪场（该场断奶小猪、以及哺乳仔猪仔猪常年存在腹泻情况。用药可缓解，但时好时坏，不能彻底解决），猪场饮水样本分别为河水源的保育舍引用水、自来水源的保育舍饮用水、河水源的保育舍饮用水及自来水源的产房饮用水。
2方法
2.1 猪场水样大肠杆菌、沙门氏菌及细菌总量的计数检测
2.1.1 大肠杆菌、沙门氏菌细菌计数
将不同水样摇匀后各取1mL样本离心浓缩到100µL悬液，然后取10µL分别接种到麦康凯营养琼脂、沙门氏菌显色培养基，有氧培养48h后，进行平板菌落计数。
2.1.2 总菌数的检测
将不同水样摇匀后直接取10µL接种到巧克力营养琼脂，有氧培养48h后，进行平板菌落计数。
2.1.3 4种消毒药物对分离沙门氏菌的杀灭效果检测
将纯化后的沙门氏菌TSB培养液，分装于5管1.5mL灭菌离心管中，每管1mL然后于4管中分别加入含戊二醛、复合酚、碘液及高效氯制剂的4种消毒药物，各种药物的用量按药物说明中栏舍消毒时的浓度进行添加，剩下的1管未加消毒药的原液做为对照组。5管菌液均放于37℃恒温箱培养2h后，加药处理管分别做10-4、10-5倍稀释，对照管做10-5、10-6稀释。稀释完毕后分别吸取菌液10µL接种沙门氏菌显色培养基，37℃恒温箱培养24h。最后进行细菌计数。
3结果
3.1 不同水样细菌计数结果
将不同水样进行处理后分别接种到巧克力营养琼脂、麦康凯营养琼脂、沙门氏菌显色培养基，有氧培养48h后，进行平板菌落计数。结果见表1。由表1可见各样本总菌数均达到3000CFU/mL以上，沙门氏菌除自来水源保育舍饮用水外，菌素在200CFU/mL以上，大肠杆菌除自来水源保育舍饮用水样本外，其他样本大肠杆菌含量较低。
表1 不同水样细菌计数结果
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水样编号
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大肠杆菌数量/CFU/mL
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沙门氏菌数量/CFU/mL
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总菌数/CFU/mL
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1
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＜10
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≈200
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≈3500
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2
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≈350
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＜10
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≈3200
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3
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＜10
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≈6500
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≈15000
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4
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＜10
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≈600
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≈20000
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注：水样编号1为河水源保育舍饮用水，水样编号2为自来水源保育舍饮用水，水样编号3为河水源产房饮用水，水样编号4为自来水源产房饮用水
3.2 4种消毒药物对分离沙门氏菌的杀灭试验结果
将纯化后的沙门氏菌TSB培养液，分装于5管1.5mL灭菌离心管中，每管1mL然后于4管中分别加入含戊二醛、复合酚、碘液及高效氯制剂的4种消毒药物，第5管不加任何药物，然后将5管菌液放于37℃恒温箱培养2h后，进行细菌计数。结果见表2。由表2可见，消毒药物处理组，除加入1号消毒药物处理组的细菌含量有较大减少外，其他药物处理组均没有明显效果。
表2 消毒药物对分离沙门氏菌的杀灭效果情况
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细菌分装编号
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处理
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处理后沙门氏菌含量/CFU/mL
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1
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加入1号消毒药物
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1200×105
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2
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加入2号消毒药物
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15600×105
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3
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加入3号消毒药物
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14000×105
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4
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加入4号消毒药物
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13600×105
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5
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未加任何消毒药物
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15000×105
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注：1号药为戊二醛，2号药为复合酚，3号药为碘液，4号药为高效氯制剂
4 讨论
猪场饮用水的管理，通常包括水压、水温、以及水的清洁度的管理，多数猪场只关注到了水压的问题，对水温和水的清洁度的关注不够。天热时水温过高可导致生猪饮水量降低，天冷时水温过低除可导致生猪饮水量降低外，还可导致生猪饮水后腹泻率增加。水的清洁度如果不够，细菌含量超标，则可引起各种问题，最为常见的就是消化系统发育不健全的哺乳仔猪腹泻率增加，胃肠道功能紊乱的断奶仔猪更容易腹泻，甚至出现死亡率增加。
本文就大型规模猪场常年腹泻性疾病难以控制的问题， 使用不同来源饮用水的2条生产线，采集了各种来源的水样，进行大肠杆菌、沙门氏菌以及总菌落的细菌计数。本试验细菌计数采用麦康凯培养基、沙门氏菌显色培养基、以及巧克力营养琼脂进行细菌有氧培养，可以清楚地鉴别出大肠杆菌、沙门氏菌，并可使饮用水中的各种非厌氧菌均能被鉴定。因此，本文得出的结论能说明该场饮用水中这几类细菌的含量问题。
从本文的细菌计数结果可见，该场各来源的饮用水均存在细菌含量过高的问题，尤其是沙门氏菌的含量过高，这可能是小猪发生腹泻的原因，这在猪场通过对饮用水和管道进行消毒后，再结合使用一些抗生素，腹泻得到有效控制得到了证实。另外，从本文于市面上选用的消毒药物对沙门氏菌的杀灭试验来看，发现除含戊二醛的这个产品外，其它3种并无明显的杀灭效果，这可能是由于本试验选用消毒药物质量不过关的缘故。因此，各猪场在选用消毒药物时，有必要进行质量的评估，这在多数猪场并没有得到关注。
文/朱卓鹏 卿任科 李润成 湖南农业大学
胡呈才 长沙普莱柯生物科技有限公司
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