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非洲猪瘟弱毒株肆虐下，猪群正确采样的方法
现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2021/10/6 15:13:56 关注：680 评论： 我要投稿
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非瘟肆虐后，检测、拔牙成了养猪业的最后一根救命稻草，且备受认可，很多猪场都保了下来，虽然存活率有高有低。但弱毒株肆虐以来，检测、拔牙变得“不灵了”，在各种会议、报道中备受质疑，很多场现在一旦得病，马上选择清场，真的有必要这样吗？拔牙检测真的不灵了吗？
下面就通过笔者的两个亲自案例，阐述弱毒株发病场猪群拔牙检测中采样环节的重要性，只要采样时机和采样方式得当，弱毒株发病场一样可以逐步稳定。
1 限位栏采样是怎样练成的
半年前，笔者到两广地区一个大的集团公司驻场。该场设定规模为7200头母猪的繁殖场，在1年前发病，采取了极端的清场措施；3个月时间，全场大清洗、消毒，环境样检测阴性后，重新引种3500头后备母猪。不幸的是，引种后2个月再次发病，检测为弱毒株感染，开始采取检测、“拔牙”操作，但效果不佳，单元平均保猪比例低于50%，主管又有想要清场的想法。
经过笔者的拜访交流，让其重拾信心。笔者经过严格的洗消流程进场后查看现场情况，发现其采样操作存在严重漏洞，致使出现假阴性的情况，很多猪只明显在发病，但采样检测结果竟然是阴性，导致正在大量排毒的猪竟然还留在猪群中，到最后淘汰的比例惊人。
为了快速验证笔者所采取的方案是否有效，隔离期间笔者与主管沟通，计划第2天在三线4单元开展验证。该单元初期有249头母猪，等笔者到场时只剩199头，且发病没有停止的态势。笔者提议，第2天上午逐头将唾液样本采出进行检测，当时主管们承诺没有问题，结果第2天等了一上午，拿出来44个样本，被问及是否已经全部采集并做成了合样，却被告之只采了44头。为什么？下午笔者隔离结束进入车间，查看现场采样操作发现存在以下几个方面的问题：
（1）采样操作是在饲喂之后进行的，猪只闪躲，采样难度大，现场看了采了10头猪，采样人员已是满头大汗。
（2）采样生物安全过度，每采一头猪换一身隔离服、换一双手套。隔离服并没有接触猪，为什么要频繁更换？
（3）采样样本，一头母猪放置一个EP管内，每个EP内事先装有1mL稀释液，然后实验室10头猪一个混样。这么大比例的混检，会大概率地出现假阴性。
2 采样在喂料之前还是之后
每当问及这个问题的时候，很多养猪人都说喂料之前采，因为喂料之前猪只口腔没有饲料残渣，不会影响检测结果。但事实并非如此。
喂料之后采样并不是怕口腔中的饲料残渣干扰检测结果。因为经实践证明，饲料携带ASFV（非洲猪瘟病毒）的可能性太小。之所以不在喂料之后采样是因为喂料之后，猪只对食物的欲望下降，采样员拿个棉签蹲到猪只前面，它会往后退，这样后面还需要一个人把猪往前推，甚至需要爬到栏位上去采样，这样就会出现笔者看到的场景：采样员采集十几头后满头大汗。
正确的采样应该是怎样的？应该是喂料之前。而且为了减少大单元采样应激的威胁，建议几个人每人一排，在喂料之前，逐头快速采集。此时，当采样员拿着棉签蹲在猪只前面，猪会以为其手中拿着的是食物，别说猪只配合采集鼻腔液，有的猪甚至会咀嚼棉签，高效、保质地完成样品采集，这才是发病期间我们所期望的。
3 采样生物安全过度了
相比于采集一头猪只换一身隔离服、换一双手套，笔者见过更夸张的采样生物安全制度：猪场老板要求员工，使用止血钳夹着棉签，每采一头消毒止血钳30min，而这个猪场只有三把止血钳。也就是说，采集10头疑似母猪，需要一个人工作5h。笔者当时和这位猪场老板说：“如果我是你的员工，有些时候我会选择不告诉你，有的猪不吃料，有的猪发烧，因为采样实在太麻烦了。”
那么，应该如何做好采样生物安全？之所以要采集一头猪样本换一身隔离服、换一双手套，是因为我们害怕采样的某一头阳性，通过采样员交叉感染另外一头采样猪只。如此，只要采样棉签足够长，采样时足够仔细，是不是可以减少更换衣物和手套的频率呢？
笔者建议：在固定的厂商定做20cm大头棉签，3头母猪（一个合样）采集后更换一双手套，一排猪只采样完毕后更换一件工作服。这样既能保证生物安全，又能最大程度提升采样效率。
4 究竟几头猪做一个混样
笔者现场处置的发病场，10个样本做一个混样为什么容易出现假阴性？当前驻场的检测仪器和试剂盒五花八门，加之进口试剂盒断货，检测的灵敏度是值得商榷的。举例：如果检测仪器、试剂盒和人员匹配程度不高的情况下，35个以下的病毒就显示阴性，而在检测的10头中只有1头样本中含有100个病毒，10个样本混样、稀释后，这个混样将大概率呈现阴性，然后就按照阴性的方案置之不顾，但实际上这10头猪中有1头就在散毒，感染面进一步扩大，所以假阴性比假阳性更可怕。笔者的建议：混样检测3个最为合理，且一旦合样阳性，3头猪复测或者直接1+2淘汰，简便、高效，最大程度降低病毒进一步扩大感染面的威胁。
在笔者的建议下，猪场快速调整了采样细节，快速对猪群进行了第一次逐头筛查，结果8%的阳性，间隔14d后进行第2次筛查，出现7%的阳性，后续发病快速稳定，该单元保猪比例达80%，相对之前的50%以下的保猪比例，差异极显著。
5 大栏采样是怎样练成的
非瘟肆虐之后，笔者去过很多的猪场，发现了一个很有意思的共性问题：发病猪场的兽医负责人总喜欢跟我说，猪场的发病当前只局限或者高发于限位栏，大栏已经半个月没有检测出阳性，但是现场查看的情况却是保育、育肥猪群扎堆、发烧，明显处于异常状态，为什么会这样？
笔者前不久刚刚处理了一个经典大栏病例：一个拥有5000头母猪的规模猪场，其繁殖场发病清群后，重新引入一批3000头后备母猪。由于繁殖场在清洗栏舍，该场就把这3000头后备母猪放置在周边的放养农户家，为了把鸡蛋多放几个篮子，一共在6个农户家存放这些猪只。但好景不长，其中有一户的大栏出现猪只厌食，检测为弱毒株感染，该单元全部处理，然后马上开展全群检测。有一个相隔很远的单元，放置的原种猪每栏6头，一共20栏，其中有一栏棉绳样显示阳性。兽医负责人跟我商量，是不是饲养员采样出现了问题，或者检测出了问题，可不可以先不淘汰，跟踪监测下再做决定。我知道，他是觉得淘汰这个原种猪单元代价太大，所以就同意了他的提议。
结果第2天该单元这个问题栏监测为阴性，第3天、第4天都是阴性，这个兽医负责人得意地给我打电话说自己的决策是正确的，要不然这120头猪就冤死了。我则表态还需要观察，结果第5天该单元这个栏死猪了，而且死猪呈现强阳性。这下，猪场所有管理人员全慌了，为什么一直都稳定，却突然出现ASF（非洲猪瘟）感染的死猪，难道是没有检测到？
对，就是没检测到，检测出阳性的第1天是因为发病猪精神状态良好，有啃食棉绳的欲望，第2天猪只沉郁不再对棉绳感兴趣，第3天、第4天就倒下了，根本咬不了棉绳，第5天出现死亡大家才醒悟。所以，为什么很多猪场很多天都监测不到大栏的发病，是因为棉绳采样采集的大多都是健康猪，疑似或者病猪对棉绳的欲望并不大，怎么办，难道进到栏内保定一头一头地采样检测？
解决大栏采样的最佳途径就是提升棉绳的诱惑力，笔者称之为“棉绳采样驯化”，在一个从未用棉绳采过样的单元，每个栏挂设一根干燥棉绳，往上浇葡萄糖粉水或者苹果醋（不知道为什么猪只如此痴迷苹果醋），这样就有一部分猪只过来啃咬，过1h后再往上浇葡萄粉水或者苹果醋，这样就让猪只形成一个共识：只要是棉绳就很甜。过1h后重新挂上干净棉绳。按照笔者的统计，此时将有85%以上的猪只过来咬棉绳，剩下不咬的猪只可能就是不正常的猪只，建议穿多层鞋套进到栏内采集其口腔液，棉绳样和棉签样的合样检测结果才能作为这个栏是否淘汰的参考。
通过这两个限位栏和大栏发生弱毒株的检测、拔牙成功案例，我们知道，并不是检测、“拔牙”不灵了，而是弱毒株的出现对检测、采样的门槛提高了。所以，深究每一个采样的细节才是我们需要修炼的“内功”。
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| 文章作者：游武进 今日养猪 文章编辑：一米优讯 |
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