|
猪群进行猪伪狂犬病净化后病毒gE抗体的检测与分析
张进隆1，唐文雅1*，王福厚1，贾志江1，杨红梅1，张潇文2(1.甘肃畜牧工程职业技术学院，甘肃 武威 733006；2. 西北民族大学，甘肃 兰州 730030)
摘 要：为了解猪伪狂犬病在规模化猪场的净化效果，采用ELISA对规模化猪场血清检测样品中猪伪狂犬病病毒gE抗体的水平进行判定。结果显示：净化前，3个规模化猪场共检测34份血清样品，其中猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性3份，抗体阳性率达8.8％。采取净化措施后，3个猪场共检测34份血清样品，未检出猪伪狂犬病病毒gE阳性抗体，净化措施取得明显的效果。
关键词：猪伪狂犬病；gE抗体；检测；分析
猪伪狂犬病是目前影响我国养猪生产的主要传染病之一，近年来，通过加强免疫接种及生物安全措施，猪伪狂犬病的发生和流行得到了有效控制，发病率和死亡率明显降低。该病在成年猪上一般为隐性感染，但可导致繁殖障碍，给猪场造成一定的经济损失，采取净化措施，可以根除隐性感染猪，提高猪场的经济效益。
１ 材料与方法
1.1 仪器与试剂
全自动酶标分析仪(北京普朗新技术有限公司，型号DNM9602)。
猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒(上海博研生物科技公司，批号20210311)。
1.2 血样采集与处理
选择3家规模化猪场作为试验猪场，随机选取34头猪作为备检猪，耳静脉或前腔静脉采血2 mL，不加抗凝剂，血液自然凝固，待血清析出后，分离血清，留待检测。
1.3 检测方法
采用ELISA检测。首先在酶标反应板每孔加样品稀释液40 μL，然后加血清10 μL，用封板膜封板后置37 ℃孵育30 min，用洗涤液洗板5次，加入酶标试剂50 μL，继续孵育30 min，洗板后每孔先加入显色剂A、B各50 μL，37 ℃避光显色15 min，每孔加终止液50 μL终止反应。以空白孔调零，450 nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。为了准确判定结果，设阴性对照、阳性对照。
1.4 净化方案
在执行生物安全措施的基础上，猪群按免疫程序进行免疫，一个月后检测疫苗抗体效价，出现阴性的，重新免疫，若疫苗抗体阳性，抗体水平合格，再进行猪伪狂犬病病毒gE抗体检测。如果gE抗体阳性，淘汰猪，如果gE抗体阴性，则无猪伪狂犬病野毒感染，建立健康示范群。
2 结果与分析
2.1 猪伪狂犬病净化gE前抗体检测结果
3家猪场共采集34份血清样品，采用ELISA检测猪伪狂犬病病毒gE抗体，1号猪场阳性数1个，抗体阳性率8.3％，2号猪场阳性数2个，抗体阳性率16.67％，3号猪场阳性数0个，平均阳性率为8.82％(表1)。
2.2 猪伪狂犬病净化后gE抗体检测结果
3家猪场共采集34份血清样品，采用ELISA检测猪伪狂犬病病毒gE抗体，阳性率为0(表2)。
2.3 分析与讨论
(1)猪伪狂犬病病毒免疫抗体检测不能区分人工免疫与自然感染，由于gE基因是猪伪狂犬病病毒的主要致病性基因，通过分支生物学技术，研发出gE基因缺失苗，猪接种该疫苗后，产生缺失基因的抗体，猪伪狂犬病病毒gE抗体的血清学检测很容易区分疫苗株与野毒株感染。
(2)通过gE抗体检测，淘汰处理阳性猪，消除传染源，从根本上净化猪伪狂犬病，实际净化效果表明，这一方法是可行的。
(3)加强免疫是关键：猪群全部使用猪伪狂犬病病毒 Bartha-K61株gE基因缺失弱毒疫苗免疫，同时结合抗体检测等结果，进一步调整免疫程序。
(4)ELISA技术具有特异性强、敏感、检测快速、适合群体检测等优点，在猪伪狂犬病病毒净化中，有很好的实用性。
参考文献
[1] 吴双燕，韦玉庆，韦玉姣．规模猪场伪狂犬病流行病调查及监测结果综合分析[J]．中国畜禽种业，2020，16(9)：8-9．[2] 刘芳，贾幼陵．完善我国动物疫病净化措施的必要性[J]．黑龙江畜牧兽医，2012(4)：15-17．[3] 孙华伟，张敬峰，赵永前，等．净化是防控猪场主要传染病的方向[J]．猪业科学，2015(10)：98-99．图片
项目来源：甘肃畜牧工程职业技术学院院列项目(2015GMGY003)作者简介：张进隆(1966— )，男，教授，博士，从事畜牧兽医教学工作*通信作者：唐文雅(1986— )，女，讲师，硕士，从事畜牧兽医教学工作；Email：634559768@qq.com
|
