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鸡马立克氏病疫苗鸡胚免疫技术的应用
现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2023/7/26 11:28:03 关注：655 评论： 我要投稿
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摘 要：
鸡胚免疫技术特指在孵化后期对鸡胚进行免疫接种，使得雏鸡一出生便获得主动免疫的技术。作为一种肿瘤性疾病，鸡马立克氏病（Marek’sdisease,MD）可引起鸡淋巴增生、各种器官和肌肤发生肿瘤病灶等。近年来，随着鸡养殖行业规模化、集约化的发展，鸡群饲养密度的不断增加，鸡马立克氏病的发生概率逐年攀升。此外，该病广泛流行于全世界，传染性强，危害大，与亚洲鸡瘟和传染性法氏囊病被列为阻碍养鸡行业发展的三大疾病，严重影响着我国养鸡业的健康发展。目前，对鸡马立克氏病尚无有效的治疗药物，主要依靠疫苗接种防治此病，故实现鸡马立克氏病的有效免疫具有重要意义。本文详细介绍鸡马立克氏病的特点及综合防控措施，系统剖析鸡胚免疫技术的优缺点及其在各个领域的应用情况，旨在为相关从业人员提供参考。
关键词：鸡;马立克氏病;免疫;
鸡马立克氏病是一种传染性极强的淋巴组织增生性肿瘤病，对禽类健康危害较大，发病症状多样，急性型MD（神经或肿瘤）控制不好会愈发严重，发病率、死亡率极高，给养鸡业带来巨大经济损失。目前，对鸡马立克氏病没有针对性的治疗药物，依靠疫苗接种能有效控制此病，因此鸡马立克氏病成为第一个可以通过疫苗预防的致癌性疾病。同传统的雏鸡免疫接种相比，采用鸡马立克氏病疫苗单独或联合胚胎免疫接种17～18日龄的鸡胚，能够填补免疫空白期，免疫效果要好于雏鸡免疫，是控制鸡马立克氏病早期感染的有效方法之一。这种方法被国内外广泛认可，成为防治马立克氏病的新途径。本文就鸡马立克氏病的概述、综合防控措施、鸡胚免疫技术及应用进行阐述，旨在降低马立克氏病的发病率，保证养鸡企业及养殖户的经济效益。
1 鸡马立克氏病概述
MD是由鸡马立克氏病病毒（Marek’s disease virus,MDV）感染引发的一种传染性高的T细胞增生性肿瘤性疾病，MDV会不断攻击T细胞、B细胞、巨噬细胞等免疫细胞[1]，造成免疫抑制和T细胞淋巴瘤，进而引起机体继发感染多种疾病。本病主要感染鸡，普通火鸡、山鸡、鹌鹑、越雉等禽类虽可感染，但罕见发病。不同品种的鸡均可感染，但易感性、感染率有差异，我国地方品种鸡易感性较高，来航鸡的易感性较其他品种的鸡低，肉鸡发病率高于蛋鸡。鸡的易感性不受日龄限制，但日龄越大，易感性越低，临床多发生于5～8周龄的鸡，发病高峰多见于12～30周龄的鸡；另外，感染日龄不同，鸡发病程度也有很大不同，2周龄的感染鸡发病率较高，成年鸡感染后一般只带毒、排毒而不发病，因此控制或预防早期感染对防止鸡马立克氏病的发生至关重要。
典型MD主要侵害神经系统，死亡率较低。常见的急性型MD主要侵害鸡内脏器官等，淋巴细胞增生产生淋巴瘤，一般发病率在10%～15%，流行时高达70%，死亡率会迅速增加。临床上，发病鸡表现出食欲不振、呼吸困难、抑郁，腿、翅膀和脖子发生瘫痪，最后严重者死亡。病理剖检可见内脏器官、肌肉、皮肤上有单个或多个大小不等的灰白色或黄色瘤样结节性病灶；此外，还观察到脾脏、肝脏、肾脏和坐骨神经肿大。本病具有高度接触传染性，一旦养殖场鸡群发病，患病鸡和带毒鸡是主要传染源，其次是病鸡和带毒鸡的分泌物、排泄物及其污染的饲料、饮水等，这些都可能成为污染源。
鸡马立克氏病的病毒（MDV）是一种细胞结合性疱疹病毒，主要存在于细胞核，少量存在于细胞外间隙或细胞浆中[2]。MDV以无囊膜的裸病毒和有囊膜的完全病毒两种形式存在，裸病毒对外界抵抗力差，有囊膜的病毒则具有较强的适应力和抵抗力。MDV分为弱毒、强毒、超强毒和特超强毒4种不同毒力的致病毒株，其引起鸡的肿瘤率以及死亡率逐渐增强。研究显示，石梦雅[3]对2017～2019年间广西地区的养殖场MDV进行分子流行病学调查和基因序列分析，结果显示，所分离的毒株主要以中国强毒分离株为主，有中国超强或特超强毒株。MDV毒株毒力的增强，是导致临床免疫失败的原因之一。
2 鸡马立克氏病的综合防控措施
在国内，当前对鸡马立克氏病没有针对性的治疗药物，采用疫苗接种已成为预防该病最有效的方式。目前，已知国内广泛使用的马立克氏病活疫苗主要包括鸡马立克氏病CA126细胞活疫苗、CA126+SB1双价细胞活疫苗、Rismavac液氮苗、Rismavac+CA126双价细胞活疫苗以及马立克氏病-传染性法氏囊病二联多价活疫苗等[4]。近几年通过广泛的疫苗接种，鸡马立克氏病很少发生，整体控制较好。
为避免鸡马立克氏病在养殖场内发生，除接种疫苗外，做好鸡群的生物安全防控工作和加强综合防疫措施十分重要。对外，避免“引进”患病鸡或带毒鸡，坚持自繁自养；对内，一旦发现病鸡，应及时做好隔离、诊断、扑杀工作以及净化鸡群，对可能污染的环境及物品进行消毒与无害化处理，做好区域防疫管理，以防鸡马立克氏病原扩散。同时，关注鸡群的营养需求、定时对环境和用具消毒以及采取其他严格的管理措施。
3 鸡胚免疫技术
3.1 鸡胚免疫技术介绍
鸡胚免疫技术是指对具备组织学基础的鸡胚进行疫苗免疫，一般是指在孵化末期对鸡胚进行免疫，使其在出壳时或出壳后数日内获取特异性主动免疫力的一种手段。这种免疫接种技术因能避免雏鸡早期感染特定传染病受到国内外学者的关注。通过动态监测鸡胚期母源抗体变化，对18胚龄鸡胚进行疫苗接种正好可以避开母源抗体的峰值，减少母源抗体对后期免疫效果的干扰；经过多年研究，科学家发现在鸡胚孵化的中后期，18胚龄时，鸡胚的免疫器官胸腺、法氏囊、脾脏基本发育成熟，可以在外界抗原刺激下建立主动免疫。这些就为鸡胚免疫提供了理论基础。目前，鸡胚免疫只适合肉鸡接种，临床上鸡胚免疫接种的最佳胚龄是18胚龄的鸡胚，最适的接种途径为羊膜腔接种。
传统雏鸡免疫方式是在育雏期进行接种，雏鸡可能由于早期感染、母源抗体等多种原因，导致免疫失败，存在一定时间的免疫空白期。而鸡胚免疫使雏鸡一出生就获得特异性抵抗力，填补了免疫空白期，并且有免疫效果显著的优点。马巍陵等[5]研究表明，鸡胚免疫与雏鸡免疫相比，提高了血清中抗体滴度，提高了与抗病毒能力相关的细胞因子IFN-γ水平及与诱导活化免疫细胞相关的IL-4水平，确实有效提高了MD疫苗的免疫效果，使MD发病率更低。相比于传统的雏鸡免疫接种技术（喂食、饮水、气雾、滴鼻、注射等），鸡胚免疫接种具有填补免疫空白期、批量化、节省人力和物力的优点。
鸡胚免疫接种技术已经在30多个国家得到广泛应用，在美国已有80%肉鸡采用鸡胚免疫方式预防马立克氏病，因技术普及较晚，我国只有部分大型养殖企业采用鸡胚免疫马立克氏病疫苗，占比相对较少。随着科技快速发展，国内外均已研发出用于鸡胚接种的大型自动化设备，目前，意大利TKA公司生产的台式半自动鸡胚接种机与全自动接种收获设备，经试验验证与人工接种和收获相比具有较大优势，在国外受欢迎程度较高，能较好满足大型养殖企业的免疫需求，国外的凯荣、赛诺菲巴斯德等以及国内的温氏集团、新希望集团、立华牧业等大型养殖企业已采用鸡胚免疫技术的机械化操作，可实现高通量接种，大大减少了人力、物力的耗费；但是自动化鸡胚接种设备价格昂贵，大部分的养殖场无法承担高昂成本，仍采用人工鸡胚免疫方式。
3.2 鸡胚免疫接种的优势及缺点
3.2.1 鸡胚免疫接种的优势
首先，鸡胚免疫能有效填补免疫空白期，使雏鸡在一出生或出生后很短的一段时间内获得主动免疫，极大填补了传统免疫给雏鸡带来的空白期，降低病毒感染的概率[6]；其次，鸡胚免疫效果均一。鸡胚的组织细胞分化程度低，对病毒具有较高的易感性，病毒繁殖量高，能够激发自主免疫。给鸡接种弱毒疫苗，疫苗病毒进入机体自我复制、迅速繁殖，不断刺激鸡群体内的淋巴细胞与白细胞等免疫细胞产生特异性免疫活性物质，从而建立一个自主免疫过程。多项试验研究表明，在鸡胚免疫后，免疫接种组在疫苗保护效力方面、抗体水平差异方面、试验攻毒保护率方面均高于未接种的对照组，这说明在鸡胚免疫后，出生的雏鸡体内已获得抗体[7,8]。
3.2.2 鸡胚免疫接种的缺点
首先，若接种的鸡胚质量较差或操作方法不当，致使部分细菌、衣原体或病毒能够从感染的母鸡传染给鸡胚；其次，鸡胚免疫局限性较大。目前，受限于国内外技术发展瓶颈，鸡胚疫苗在市场中的种类较少，可防控的疾病有限；最后，因不同品种品系间的差异、宿主遗传性和马立克氏疫苗保护效力等方面的差异，免疫失败的现象时有发生。据统计，在世界范围内已获得免疫的鸡群中，鸡马立克氏病仍有10%左右的发病率。对于亚型众多、变异较快的病毒，一种疫苗很难保证在疫期“从头到尾”的保护鸡群，由此可见，不能单纯靠疫苗免疫来保障鸡群的健康[6,9]。
3.3 鸡胚免疫技术的应用
目前，鸡胚的免疫接种技术随着长期广泛的应用而得到不断发展，并日益成熟，除疫苗领域外，鸡胚免疫也被尝试用于疾病防控、营养补充等多个领域。
3.3.1 疫苗领域
目前，市场上安全可行的鸡胚免疫疫苗是法氏囊、马立克氏病疫苗，接种后不影响鸡胚的孵化率和出雏率，而且可以使雏鸡同时获得这2种疾病的免疫力，降低发病概率。有专家认为鸡胚免疫疫苗是否合格的一个重要决定因素就是疫苗毒株对鸡胚的毒力。古飞霞等[8]曾尝试将多种商品化新城疫（ND）弱毒疫苗分别接种不同品种的18胚龄鸡胚，发现商品化ND疫苗对18胚龄鸡胚均有较强的致病性，显著降低了鸡胚的孵化率和健雏率，不能用于鸡胚免疫。但接种构建的重组疫苗会降低对鸡胚的致病性，增强保护效果。Dilaveris等[10]将新城疫疫苗NDW与可表达细胞因子IFN-γ的质粒共同接种18胚龄SPF鸡胚后，可显著降低NDW对鸡胚的致病性。
STEEL等[11]将表达新城疫和禽流感免疫源性的重组疫苗接种于18胚龄鸡胚，对NDV和H5N1保护效果分别达到了90%、80%。只要疫苗合适，鸡胚接种免疫完全可行。党海斌等[12]将柔嫩艾美耳球虫和堆形艾美耳球虫接种18胚龄鸡胚，结果显示球虫疫苗单一或混合接种都能诱导机体产生较强的免疫保护率。另外，未来随着分子生物学和免疫学技术的发展，含有佐剂的灭活病毒疫苗、亚单位疫苗、重组疫苗、DNA疫苗及非病毒鸡胚免疫疫苗等有望成为鸡胚接种试验的重要工具[13]。尤其是抵抗多数或全部疫病的多价鸡胚接种疫苗以及对鸡胚安全的重组或亚单位疫苗可能会用于家禽生产，将大大提高免疫效率。
3.3.2其他领域
鸡胚免疫可以促进雏鸡免疫系统的发育和成熟。李福生等[14]研究发现，用新城疫F系和I系疫苗气室接种8胚龄鸡胚，发现鸡胚不致死且能促进鸡胚免疫器官的发育成熟。国外学者[15]通过在鸡胚中接种空肠弯曲杆菌外膜囊泡，结果发现接种后的鸡群对胃肠炎有一定的抵抗效果。此外，对14胚龄鸡胚羊膜腔注射葡萄糖、果糖或核糖等糖类化合物，可以给鸡胚增加营养，显著促进鸡胚的后期发育，并且有助于提高体液免疫和细胞免疫功能和效率[16]。另外，随着鸡胚接种技术的发展，也会扩散应用到其他领域，如采用鸡胚接种技术还可以注射细胞素、可溶性佐剂和竞争性排斥的微生态制剂等，可以有效调节鸡体的免疫力，促进雏鸡肠道发育，大大提高其生长性能。
4 小结
鸡马立克氏病危害严重、传播能力强，给我国鸡养殖业带来巨大的损失。鸡胚免疫技术作为当前热门的预防鸡马立克氏病的一种有效技术手段，优势明显且在各个领域得以广泛应用，但不能单纯靠疫苗免疫来保障鸡群的健康。养鸡行业的从业者们应加强疾病的防控，以预防为主、治疗为辅有效确保鸡群的健康，进而推动我国家禽产业的健康发展。
[1]冯阳,关秀春,葛忠凯,周忠号,丁树龙.鸡马立克氏病疫苗鸡胚免疫技术的应用[J].家禽科学,2023,45(07):70-74.
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| 文章来源：家禽科学 文章编辑：一米优讯 |
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