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作者：罗 阳 任云华 隋雁南 羊 慧 张菊华 戴雨洁 闫俊书 周维仁导读：试验旨在探究陈化粮中添加新型复合抗氧化剂对肉鸭生长性能和抗氧化功能的影响。选取1日龄樱桃谷肉鸭400只，随机分为两组，每组4个重复，每个重复50只肉鸭。对照组饲喂由陈化粮组成的基础饲粮，试验组饲喂在基础饲粮的基础上添加500 mg/kg的新型复合抗氧化剂的饲粮，试验期40 d。结果表明：①在基础饲粮中添加新型复合抗氧化剂可以显著提高1~40日龄试验鸭只的平均日增重（ADG）（P<0.05），并显著降低1~40日龄及15~40日龄试验鸭的料重比（F/G）（P<0.05），但对1~14日龄试验鸭只的ADG、平均日采食量（ADFI）和F/G均无显著影响（P>0.05）；②与对照组相比，试验组可显著提高血清、肝脏超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性（P<0.05），显著提高肾脏GSH-Px活性及心脏过氧化氢酶（CAT）和SOD活性（P<0.05），同时降低试验鸭只肾脏、心脏及胸肌丙二醛（MDA）含量（P<0.05）。由此可见，在陈化粮组成的基础饲粮中添加500 mg/kg新型复合抗氧化剂可以在一定程度上改善肉鸭生长性能并提高其抗氧化性能。全文已在《饲料工业》2023年第20期刊出。
陈化粮通常是指储存期在3年以上，发生陈化、变质及储存品质显著下降，不宜直接作为口粮的粮食，包括玉米、稻谷、小麦等[1]。陈化粮只能通过拍卖的方式定向销售给饲料加工及酿造企业。由于陈化粮价格低廉，在饲料行业中经常使用陈化粮部分替代新鲜粮食以降低饲料成本。但陈化粮由于储存期过长，储存方式不当，其营养成分通常会发生变化，脂质也会出现不同程度的氧化酸败[2]。饲喂陈化粮会引起动物机体氧化应激反应；破坏日粮的适口性，降低动物采食量；影响饲料营养物质的消化吸收，降低动物生产性能；严重时甚至危害动物的身体健康[3-4]。因此，缓解陈化粮对动物造成的不良反应成为养殖业亟须解决的问题。目前，生产实践中主要通过在饲料中添加一定剂量的抗氧化剂来延缓或预防油脂的氧化酸败。抗氧化剂按来源可以分为合成抗氧化剂和天然抗氧化剂两种[5-6]。乙氧基喹啉（EQ）是可以用来清除过氧化脂质自由基的一种化学合成抗氧化剂[7]。而茶多酚和维生素E作为天然抗氧化剂可以通过清除自由基，抑制脂质的过氧化反应，从而提高机体抗氧化能力，避免氧化应激对动物机体造成的损伤，在机体内起到抗氧化的作用[8-9]。但由于天然抗氧化剂价格较高，在实际生产过程中不会将其直接作为饲料抗氧化剂进行使用。
目前，关于抗氧化剂能否缓解陈化粮对动物带来的负面影响的相关报道较少，且更鲜有合成抗氧化剂与天然抗氧化剂配合使用以缓解陈化粮负面影响的相关试验。因此，本试验将利用新型复合抗氧化剂，通过测定肉鸭生长性能和抗氧化性能指标，探讨利用合成抗氧化剂与天然抗氧化剂配合使用以缓解陈化粮对肉鸭产生的氧化应激反应的影响，以期为合理利用陈化粮奠定科学的理论基础。
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材料与方法
1.1 试验材料
本试验所用新型复合抗氧化剂产品主要由乙氧基喹啉、维生素E、茶多酚、白炭黑和沸石粉组成，由某化工有限公司提供，具体成分及有效含量见表1。
1.2 试验设计与饲养管理
试验选取体重相近（70 g左右）、身体健康的1日龄雄性樱桃谷肉鸭400只，随机分为两组，分别为对照组和试验组，每组4个重复，每个重复50只肉鸭，对照组饲喂由陈化粮组成的基础饲粮，试验组在饲喂基础饲粮的基础上，额外添加500 mg/kg的新型复合抗氧化剂。试验于安徽全椒未来饲料有限责任公司进行，试验期为40 d。试验鸭均采用舍内平养，试验开始前对鸭舍进行严格消毒，试验期间肉鸭按照常规方法养殖，自由采食和自由饮水，基础饲粮组成及营养水平见表2。
1.3 样品采集与指标测定
1.3.1 生长性能指标的测定
肉鸭在试验开始时（1日龄）、第14天和第40天时，记录各组的耗料量，计算平均日采食量（ADFI）。试验开始、第14天和第40天时，以重复为单位进行空腹称重，记录下每重复鸭只数，计算平均日增重（ADG）。每组所得平均日采食量与平均日增重的比值即是每组的料重比（F/G）。
1.3.2 抗氧化指标的测定
在试验第40天清晨饲喂前，每组每个重复挑选与该重复平均体重相近的肉鸭2只，颈部静脉采血10 mL，于3 000 r/min离心15 min分离出血清，置于-20 ℃冰箱中保存，用于血清抗氧化指标分析。并进行屠宰试验，采集肝脏、肾脏、心脏及胸肌样品放入冰盒冷藏，后将所有样品转入冰箱-20 ℃保存用于测定其抗氧化指标。按照南京建成生物工程研究所有限公司试剂盒提供的检测方法对血清、肝脏、肾脏、心脏及胸肌的超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、过氧化氢酶（CAT）活性、丙二醛（MDA）含量进行检测。
1.4 数据统计与分析
试验数据采用Excel 2016进行初步整理，利用SPSS 22.0统计软件对数据进行t检验分析，试验结果用“平均值±标准差”表示，以P<0.05为差异显著，P>0.05为差异不显著。
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结果与分析
2.1 新型复合抗氧化剂对肉鸭生长性能的影响
由表3可以看出，两组间1日龄体重和14日龄体重无显著差异（P>0.05），而试验组40日龄体重显著高于对照组（P<0.05）；1~14日龄对照组ADG、ADFI及F/G与试验组相比均无显著差异（P>0.05）；在15~40日龄两组间ADG和ADFI无显著差异（P>0.05），但试验组F/G显著低于对照组（P<0.05）；1~40日龄试验组ADG显著高于对照组（P<0.05），且F/G显著低于对照组（P<0.05），而ADFI与对照组相比差异不显著（P>0.05）。
2.2 新型复合抗氧化剂对肉鸭血清抗氧化功能的影响由表4可以看出，添加新型复合抗氧化剂的试验组肉鸭血清SOD活性和GSH-Px活性均显著高于对照组（P<0.05）；而两组间CAT活性和MDA含量均无显著差异（P>0.05）。
2.3 新型复合抗氧化剂对肉鸭肝脏抗氧化功能的影响由表5可以看出，与对照组相比，试验组肉鸭肝脏SOD和GSH-Px活性均显著升高（P<0.05）；而两组间CAT活性与MDA含量无显著差异（P>0.05）。
2.4 新型复合抗氧化剂对肉鸭肾脏抗氧化功能的影响由表6可以看出，与对照组相比，试验组肉鸭肾脏GSH-Px活性显著升高（P<0.05），而MDA含量则显著降低（P<0.05）；两组间CAT和SOD活性差异不显著（P>0.05）。
2.5 新型复合抗氧化剂对肉鸭心脏抗氧化功能的影响由表7可以看出，试验组肉鸭心脏CAT活性和SOD活性均显著高于对照组（P<0.05），而MDA含量则显著低于对照组（P<0.05）；两组间GSH-Px活性差异不显著（P>0.05）。
2.6 新型复合抗氧化剂对肉鸭胸肌抗氧化功能的影响由表8可以看出，与对照组相比，试验组肉鸭胸肌MDA含量显著降低（P<0.05）；而两组间CAT、SOD和GSH-Px活性差异不显著（P>0.05）。
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讨论
3.1 新型复合抗氧化剂对肉鸭生长性能的影响
脂肪酸值是衡量粮食储藏品质，判断粮食新陈的一项重要指标。一般情况下，随着储存时间的延长，粮食籽粒内部脂肪会发生氧化反应，使得脂肪酸值升高。本试验选用了两种粮食，组成为85%糙米+15%小麦（脂肪酸值125.42 mg KOH/100 g）和组成为85%稻谷+15%小麦（脂肪酸值84.23 mg KOH/100 g），均属于陈化重度不宜存。研究发现，陈化粮由于其营养成分的变化，且存在大量的过氧化物，饲喂陈化粮可能会降低动物的生长性能[10-12]。李桦等[13]在肉鸡日粮中添加茶多酚，发现可显著提高肉鸡ADG并显著降低料肉比，改善热应激对肉鸡生长性能造成的不良影响。张相伦[14]将维生素E添加至含有氧化大豆蛋白及2%加热油脂的肉鸡日粮中发现，维生素E可显著提高肉鸡ADG，但对ADFI和料肉比无显著影响。Lu等[15]在含有3%氧化大豆油脂+3%不饱和脂肪酸的肉鸡日粮中添加由乙氧基喹啉和没食子酸丙酯组成的抗氧化剂及维生素E发现，与对照组相比，试验组ADG和ADFI均未出现显著变化，但显著降低了料重比，一定程度上改善了动物的生产性能。在本试验中，整个试验周期内，添加新型复合抗氧化剂的试验组与未添加任何抗氧化剂的对照组相比ADG和ADFI均无显著差异，但在15~40日龄时，试验组料重比显著低于对照组，这与Lu等[15]的试验结果基本一致。说明合成抗氧化剂与天然抗氧化剂配合使用可以在一定程度上改善动物的生长性能，但由于抗氧化剂种类和添加剂量的不同以及受到动物所处状态的影响，部分指标结果可能会出现一定的差异。
3.2 新型复合抗氧化剂对肉鸭抗氧化能力的影响动物机体在正常生理状态下产生的自由基由于体内内源抗氧化系统（如GSH-Px、SOD、CAT等）和外源抗氧化系统（维生素E、类胡萝卜素等）的存在常处于动态平衡状态[16]。当机体摄入过多外源自由基或产生过多的自由基而抗氧化系统不能抵消时就会产生氧化应激，造成机体的氧化损伤，影响动物的身体健康[17]。研究发现，陈化粮在长时间储存过程中，脂肪和蛋白质易发生氧化产生过氧化物，诱导机体产生过量的自由基，从而破坏机体氧化还原平衡状态，引起氧化应激[18-19]。崔小燕[20]和刘比一等[21]研究发现，使用长期储存的陈化玉米配制肉鸡日粮会降低肉鸡血清抗氧化性能。同时，史东辉等[22]提出在家禽日粮中外源性添加抗氧化剂是保持动物机体氧化还原平衡状态，缓解氧化应激对动物造成负面影响的有效手段。
SOD和GSH-Px均是常见的内源性抗氧化剂，其活性的高低可间接地反映出机体对自由基的清除能力[23]。SOD可催化机体内自由基发生歧化反应生成H2O2和O2，保护细胞免受自由基的损伤，而GSH-Px可特异性催化GSH氧化，促进H2O2分解为H2O和O2，清除脂质过氧化物，从而阻断自由基对机体的进一步损伤[24-25]。穆雅东[26]研究发现，在陈化粮饲粮中添加100 mg/kg维生素E可显著提高蛋鸡血清和肝脏SOD活性和GSH-Px活性。周岭[27]在使用陈化玉米作为蛋鸡日粮的饲粮中添加茶多酚发现可显著提高血清、肝脏及卵巢SOD活性和GSH-Px活性，并显著降低血清MDA含量，缓解了陈化玉米对蛋鸡抗氧化能力的负面影响。本试验中，在陈化粮作为基础日粮的基础上添加新型复合抗氧化剂的试验组，可显著提高血清、肝脏SOD活性和GSH-Px活性，并显著提高肾脏GSH-Px活性及心脏SOD活性，这与上述试验结果基本一致。CAT是动物机体防御体系的关键酶之一，当机体内H2O2含量过高时，CAT能特异性地分解多余的H2O2，催化其生成H2O和O2，从而减轻机体过氧化损伤，保护细胞膜的完整性[28]。张亚茹等[29]研究发现，在陈化玉米作为肉鸭能量原料的日粮中添加茶多酚、维生素E、BHT均可显著提高其血清总抗氧化能力和CAT活性，对肉鸭抗氧化功能有不同程度的改善作用。而本试验中，添加新型复合抗氧化剂试验组与对照组相比，血清CAT活性无显著差异，但可显著提高肉鸡心脏CAT活性。MDA是脂质过氧化反应的分解产物之一，能与含氨基化合物如蛋白质、核酸等发生交联，使之丧失功能，其含量可作为机体脂质过氧化程度的检测指标，间接反映出机体细胞氧化损伤程度[30]。Wang[31]发现肉鸡日粮中添加茶多酚和维生素E可显著降低血清MDA含量。本试验中，试验组与对照组相比，对血清中MDA含量无显著影响，但可显著降低肉鸭肾脏、心脏及胸肌MDA含量。
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结论
本试验结果表明，在以陈化粮组成的基础饲粮中添加500 mg/kg的新型复合抗氧化剂可以在一定程度上改善肉鸭的生长性能并缓解陈化粮对其抗氧化性能的不良影响。
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