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一 疫苗选择
目前马立克疫苗有两种形态：细胞依附性疫苗（湿苗）和非细胞依附性疫苗（冻干苗）。根据学者盖佛瓦等人的研究结果显示，细胞依附性疫苗在来航鸡的实验中，对马立克氏病的防疫效果比冻干疫苗好50％左右。盖佛瓦的实验鸡群共有9种不同的鸡种，其中一种鸡群以冻干苗免疫的死亡率为17．5％，而细胞依附性疫苗免疫的死亡率为10．4％。爱迪森等学者表示，拥有高母源抗体的1日龄肉鸡分别给予两种疫苗（冻干苗和湿苗）免疫，并且接种不同的剂量，然后和已感染马立克氏病3周龄鸡一起饲养，结果显示，使用冻干疫苗免疫的鸡，其马立克氏病病变比使用即使较低效价的细胞依附性疫苗的比例要高，其免疫结果详见表1。
由表1可见，较低效价的细胞依附性疫苗的免疫效果要比较高效价的冻干苗好很多，其原因在于小鸡体内含有高量的母源抗体，冻干疫苗（非细胞依附性）没有细胞保护，所以会被母源抗体中和，而细胞依附性疫苗有细胞保护，病毒存在细胞内可以繁殖、复制，所以即使给予较低效价也会有良好的保护力。另外，为克服母源抗体的影响，应选择与上一代种鸡接种的疫苗不同血清型的疫苗接种其子代雏鸡，或适当增加疫苗剂量，最大不超过1．3羽份/只雏鸡。为此，我们孵化场目前采用液氮保存的细胞结合性疫苗，即血清为I型的cVI－988疫苗/Respells，效价为3000－6000PFu/羽份，疫苗免疫保护率可达97％以上。
二 确定免疫接种程序
目前得到证实，马立克疫苗的效力和疫苗接种与感染强毒之间的间隔时间有关。因此疫苗要及早接种，早接种可早产生免疫力。但是，由于在1日龄接种疫苗后到产生坚强免疫力需要2周时间，一旦野毒抢先占领靶细胞后疫苗毒株就不能很好地增殖，产生的抗体就不理想，所以早期感染野外病毒也可能造成马立克氏病大量发生，因此国外研究证明，疫苗可以给孵化到18天的鸡胚接种，既不影响孵化率又可以提早产生免疫力，目前在国内孵化生产上很少使用。一般都采用在出壳后24小时之内接种疫苗，于颈背部正中1/3处皮下注射，0.2mL/只，即1羽份。另外现在有人为了确保免疫效果，还进行二次免疫，即于14日龄再次皮下注射，0.2mI/只疫苗，这种做法无理论依据，目前在养鸡生产上也不太现实，同时也加大养鸡成本。
三 正确使用疫苗
当已决定选用细胞结合性疫苗，一定要仔细阅读疫苗的使用方法、保存方式和注意事项，才能够保证疫苗效果。
1 疫苗的运输
必须放在液氮罐中，疫苗瓶细颈部要朝上，运输途中禁止用力碰撞，以减少疫苗的破损率。
2 疫苗的保存方式
疫苗必须放在装有液氮的罐内，其温度为－196℃液氮面，必须超出疫苗小桶上端10厘米以上，每天检查疫苗罐，并及时补充液氮，其原则是疫苗必须完全浸泡在液氮内。
3 疫苗的稀释和使用
马立克液氮苗的操作细则和技术要点如下：
（1）疫苗稀释前先将稀释液提前一天预温，控制在22℃左右。
（2）疫苗稀释时的水温在27±0．5℃范围内。
（3）应在60秒之内使安瓶中的疫苗完全解冻。
（4）吸取疫苗的针头应使用国产“16＊40”，禁止使用太细的针头吸取疫苗，防止破坏细胞的完整性。
（5）取出的疫苗瓶最好在60秒内迅速转移到稀释液内，最长不能超过90秒。
（6）稀释完的疫苗在注射过程中，必须每隔5分钟摇动1次，以保证疫苗液均匀性。
（7）在临床生产中，为了提高疫苗的效价，减少效价在使用过程的损失，控制在半小时之内用完。
（8）注射速度要适中，一般要求每人每小时注射1 800－2 400只，避免注射速度太陕而引起注射剂量不足或打飞针，直接影响疫苗的免疫效果。
（9）每只雏鸡的注射剂量为0.2ml。
目前，我们使用的液氮苗对水温、时间及稀释液的温度要求很严格，若超温、超时对疫苗效价影响很大。如果将疫苗从液氮中取出2分钟后再放回液氮罐内，疫苗损失73％，此疫苗必须报废。表2列举了水浴的温度、时间、稀释液温度和疫苗稀释后保存时间对疫苗效价的影响。
由表2可以看出，细胞结合性疫苗在保存和使用方面，对时间和温度要求比较严格，控制不好将直接影响疫苗的免疫效果。
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