2018年1-6月份,广东永顺生物制药股份有限公司技术服务部检测了来自全国各地302个猪场共10208份猪血清样品的伪狂犬野毒抗体,其中4842份阳性,即野毒抗体阳性率为47.4%,说明猪场感染伪狂犬野毒的情况比较普遍。然而,在来自全国各地116个猪场共299份病料样品(含血清)当中,有11份检测到伪狂犬病原,即病原阳性率为3.7%。以下为检测情况详细介绍:
采用IDEXX PRV gE-ELISA试剂盒检测猪血清中的伪狂犬野毒抗体,2018年度1-6月份的野毒抗体阳性率见表1和图1,月阳性率最高为59.1%,最低为28.9%,月阳性率高低与月份关系不大。
目前,不少猪场进行伪狂犬野毒净化工作。一般认为,野毒抗体阳性率高于80%,显示净化工作难度较大,路途相对比较漫长;而低于20%,则表示相对容易实现净化。在2018年1-6月份检测的猪场当中,伪狂犬野毒抗体阳性率高于80%的猪场占比为16%,而阳性率低于20%的猪场占比为17%(具体见表2和图2)。
参照GB/T 18641-2002 伪狂犬病诊断技术,以及从NCBI下载近年来流行的伪狂犬野毒的基因(组)序列,分别针对伪狂犬病毒gD和gE基因设计特异性引物,对全国各地猪场病料中的伪狂犬病原进行PCR检测。针对gD基因的引物为:P1:5’-CAG GAG GAC GAG CTG GGG CT-3’,P2:5’-GTC CAC GCC CCG CTT GAA GCT-3’,扩增gD基因中434~651碱基对(bp)之间217bp基因片段。2018年1-6月份的伪狂犬病原PCR阳性率见表4。
2018年上半年检测到伪狂犬病原有11个场次,共11份样品,将这些伪狂犬病原阳性样品进行送样测序,成功获得相应的基因序列后应用DNAStar软件进行分析和比较,并利用MEGA 6软件绘制系统进化树(见图4)。
图4 基于gD基因部分序列的系统进化树图
结合抗体和病原检测结果来看,野毒抗体阳性率高与病原阳性率低相悖,但又是事实存在的,毕竟野毒抗体阳性不完全意味着感染了野毒,就算感染了野毒也不太容易检测到病原。
伪狂犬野毒通过伪装(改变抗原性),欺骗了机体免疫系统,已在不少猪只中插旗(定殖)。响应众多清白猪身(伪狂犬野毒抗体阴性猪)的要求,永顺伪狂犬活疫苗完成了从“普通细胞源”到“传代细胞源”的升级,更新换代后能力提升N次方,可有效减轻野毒感染猪的发病程度,甚至不表现临床症状和临床损害,还可以提高健康猪(野毒阴性)的感染门槛,将野毒拒之门外,帮助猪场实现伪狂犬野毒的净化。
Bartha K-61株是国际公认且广泛应用的安全有效自然基因缺失的伪狂犬病弱毒疫苗株。基于Bartha K-61株,永顺生物运用独特的传代细胞培养技术,产品完全可以媲美国外同类产品,抗原含量甚至超过国外同类产品。
作者简介
钟植文,兽医师,华南农业大学预防兽医硕士毕业,现为广东永顺生物制药股份有限公司客服部检测实验室主任,从事实验室检测和养殖一线技术服务等相关工作,提出“无”鸡(猪)管理比“有”鸡(猪)管理更为重要的观点。
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