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摘要：为了解J亚群禽白血病病毒（ALV-J）在山东省枣庄市鸡场的流行情况，2019—2020年在枣庄市39家鸡场采集1 174份血清样品，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行ALV-J抗体检测。结果显示：39家鸡场中有27家检出阳性，群体阳性率为69.2%（95%CI：56.2%~85.1%）；1 174份鸡血清样品中，有200份为阳性，个体阳性率为17.0%（95%CI：15.2%~19.6%）。不同区域间个体阳性率，经卡方检验差异显著（χ2=27.48、P＜0.01）；群体阳性率，经fishers确切检验，差异不显著（P＞0.05）。2019年个体阳性率为12.4%（95%CI：10.0%~15.3%）、2020年为21.8%（95%CI：18.9%~25.7%），经卡方检验差异显著（χ2=18.51、P＜0.01）；2019年群体阳性率为65.0%（95%CI：45.4%~87.3%），2020年为73.7%（95%CI：55.5%~94.9%），经fishers确切检验，群体阳性率差异不显著（P＞0.05）。结果表明，枣庄市鸡场普遍存在ALV-J感染，感染率较高。建议继续深入推进禽白血病净化工作，加强引种管理，严把疫苗免疫关，做好综合防控。
禽白血病（avian leukosis，AL）是由禽白血病病毒（avian leukosis virus，ALV）引起的，通过垂直和水平方式传播的一种免疫抑制性疾病，主要表现为肿瘤、血管瘤以及产蛋下降、免疫或生长抑制等症状。ALV属于反转录病毒科α-反转录病毒属，共有10 个亚群（A—J），其中ALV-J致病性和感染性最强。1988年英国首次分离到J亚群ALV（ALV-J）。1999年我国在江苏和内蒙古首次分离到ALV-J。ALV-J感染宿主范围在不断扩大，最初主要感染肉鸡，后感染蛋鸡，目前在地方鸡品种中也有存在。本研究于2019—2020年采集枣庄市39家鸡场的1 174份鸡血清样品，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）进行ALV-J血清抗体检测，以便了解该地区鸡场中的ALV-J感染情况，从而为净化ALV-J提供数据支撑。
材料与方法
样品采集
抽样框 枣庄市下辖5区1市，存栏2 000只以上的规模商品蛋鸡场共有320家，共存栏约310万只。
抽样方法 采用多阶段抽样方法。第一层，以估计流行率方式计算场户抽取数量。按照预期流行率（p）2%、置信水平95%（z=1.96）、可接受误差（e）7%，在320个场户中，依据公式（1）计算出抽样场群数为15个（每年选择的场户不重复）。第二层，以估计流行率方式进行计算个体抽样数量。按照流行率（p）8%、置信水平95%（z=1.96）、可接受误差（e）10%，依据公式（1）计算出每个场群需要采样28份。样品的采集、运输、血清分离、保存，均按照规范操作。2019—2020年共采集6个辖区内39家养鸡场的1 174血清样品（表1）。
 （1）
检测与数据分析
试验操作过程严格按照试剂盒说明书要求的环境和条件进行；对检测结果和有关数据，使用Excel软件进行统计分析。
判定标准
场群阳性 本场群所有样品中，只要检出1份阳性，即判定本场为阳性场。
个体阳性 样品检测结果为阳性，即判定为个体阳性。
结果与分析
总体情况
2019—2020年在全市 39家鸡场1 174份血清样品中，检出阳性样品200份，个体阳性率为17.0%（95%CI：15.2%~19.6%）；检出阳性场27家，群体阳性率为69.2%（95%CI：56.2%~85.1%）。
不同区域情况
不同区域统计结果（表2）显示：台儿庄区个体阳性率最高（23.4%），峄城区最低（8.8%），经卡方检验，χ2=27.48、P＜0.01，区域间个体阳性率差异显著；山亭区群体阳性率最高（83.3%），滕州市和峄城区最低（均为60.0%），经fishers确切检验，P＞0.05，区域间群体阳性率差异不显著。
不同年份情况
不同年份统计结果（表3）显示：2019年个体阳性率为12.4%（95%CI：10.0%~15.3%），2020年为21.8%（95%CI：18.9%~25.7%），经卡方检验，χ2=18.51、P＜0.01，不同年份间个体阳性率差异显著，有加重趋势；2019年群体阳性率为65.0%（95%CI：45.4%~87.3%）、2020年为73.7%（95%CI：55.5%~94.9%），经fishers确切检验，P=0.73，不同年份间群体阳性率差异不显著。
讨论
目前，从鸡身上分离到的ALV亚型有A—E和J亚群，其中ALV-J对不同品种的鸡均具有感染性和致病性，且目前尚无有效的预防性疫苗和治疗性药物，因此需要通过检测血清抗体淘汰ALV-J感染鸡群来实现净化目标。
2020年邢林林等对山东省7个种鸡场进行ALV-J抗体检测，发现个体阳性率为19.80%，群体阳性率为100%；2017年鲍伟华等对浙江宁波市鸡场进行ALV-J抗体检测，发现个体阳性为21.5%，群体阳性率为86.7%；马亚珍等2017—2019年在新疆定点调查3个县，均检测出ALV-J阳性抗体，个体抗体阳性率为26%；王倩等对安徽省部分禽场进行ALV-J抗体检测，发现2017—2019年个体阳性率分别为22.51%、15.12%、26.11%，群体阳性率分别为75.00%、42.86%、40.00%，在检测的8个市（县）中有7个检出阳性。本研究检测结果显示：2019—2020年枣庄市鸡场的ALV-J个体阳性率为17.0%，群体阳性率为69.2%，与上述检测结果基本相似。上述检测结果表明，全国范围内的ALV-J阳性检出率较高，污染面较广，需要加强开展ALV-J净化工作。
调查发现，枣庄市雏鸡主要从外地调入，辖区内仅有1家父母代种鸡场，对AL防控很难从源头上控制。AL为垂直性传播疫病，在发达国家的大型种鸡公司多基于切断垂直传播途径逐步实现了净化.。我国出台的《国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020年）》将AL列为优先防治和重点净化的疫病之一。建议上游种禽企业加强AL防控，从源头上净化该病，提供优质雏鸡。在控制水平传播上，地方鸡场应该从净化该病的种禽企业引进雏鸡，同时加强鸡场的综合生物安全防控，有效控制该病的发生和扩散。崔治中指出，外源性ALV污染的弱毒疫苗是鸡群中ALV传播的最可能原因之一；秦乐指出，在马立克疫苗中有多种外源性ALV污染，因此养鸡场应购买正规疫苗生产厂家生产的疫苗，阻断因疫苗污染造成该病传播。
本次调查在计算样本量时，预计流行率均较低，与实际差异较大，导致检测结果存在一定误差。建议在后续研究中，提高预计流行率，从而扩大样本量，以达到检测结果更加真实的目的。对于上一年度检测过的场户，下一年度也应该纳入检测范围，以便进行时间上的比较分析。本监测未开展相关问卷调查，缺少养殖场户调入调出、生物安全、人员管理等方面的数据信息，未能全面分析阳性场出现的原因，需要后续进一步研究。
结论
监测表明，枣庄市蛋鸡场普遍存在ALV-J感染，感染率持续较高，防控效果不佳。建议加大对该病的监测力度，及时淘汰阳性鸡，继续深入推进AL净化，同时加强引种管理，严把疫苗免疫关，做好综合防控。
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