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摘要：2021年6月9日，陕西省神木市红碱淖国家级自然保护区发生一起野禽H5N8亚型高致病性禽流感疫情。为了解该起疫情的发生经过、可能来源、内部传播方式以及对外扩散风险，组织开展了流行病学调查。现场调查发现：5月27日该保护区的黑颈??种群开始发病死亡，28日保护区工作人员发现后上报疫情，经国家禽流感参考实验室确诊为H5N8亚型高致病性禽流感疫情；截至6月26日，累计死亡黑颈??5 486只，未见其他鸟类及周边家禽异常死亡。采样检测发现，野禽环境中病毒污染面较小，家禽中未检出病原，家禽H5亚型禽流感免疫抗体水平较高。调查认为：疫情由迁徙候鸟感染禽流感病毒传入引起，发病局限于野禽；因红碱淖水质碱性较强，病毒存活时间较短，疫情经湖水传播的风险性较小。疫情确诊前，保护区已采取了无害化处理病死禽、消毒、人车管控等措施，当地农业农村部门对周边家禽开展了禽流感紧急疫情排查和强化免疫。因此，结合现场调查和实验室检测结果，推断疫情由野禽向家禽扩散风险很低。本次疫情提示，应多部门密切协作，持续做好高致病性禽流感疫情监测工作，做到疫情早发现，果断处置，以降低疫情扩散风险。
2020年以来，H5N8亚型高致病性禽流感（HPAI）疫情随候鸟迁徙及商业贸易活动已蔓延至全球多个国家和地区，给全球养禽业造成巨大经济损失。2021年6月9日，经国家禽流感参考实验室确诊，陕西省神木市红碱淖国家级自然保护区（下简称保护区）发生野禽H5N8亚型HPAI疫情，截至疫情发布时，累计发病死亡野鸟4 355只，均为黑颈??。该起疫情为当年全国第5起H5N8亚型HPAI疫情。为了解保护区野禽疫情发生经过、可能来源、内部传播方式以及对外扩散风险，陕西省农业农村厅畜牧兽医局组成流行病学调查工作组，赴现场开展了疫情调查工作，以期找出该病在野禽群体中发病和传播的相关风险因素，以便采取针对性防控措施，防止疫情扩散蔓延。
调查内容与方法
病例定义
疑似病例 2021年5月下旬以来，在保护区发病或死亡野禽以及周边异常发病、死亡的家禽，定义为H5N8亚型HPAI疑似病例。
确诊病例 经实验室检测为H5N8亚型高致病性禽流感病毒（HPAIV）核酸阳性的疑似病例，定义为H5N8亚型HPAI确诊病例。
调查方法
采用座谈交流、实地调查、现场采样等形式进行调查。分别与榆林市农业农村局及其下设的畜牧兽医服务中心、动物卫生监督所，神木市农业农村局及其下设的畜牧业发展中心，中鸡镇农业综合服务站和当地养殖场户进行座谈交流，了解疫情经过和处置情况，周边家禽存栏及免疫情况，当地历史疫病数据以及异常报告情况，家禽与疫点野禽接触情况等信息。在保护区，实地调查野禽无害化处理点、疫情防控卡口以及野禽栖息地（湖面、湖心岛），了解疫情防控措施落实情况，观察鸟类健康状况、活动规律等。根据访谈和现场察看情况，拟定紧急流行病学调查方案。按照基于风险的抽样原则，野禽环节采样选择在疫区鸟类活动频繁的湖边、湖心岛，采集新鲜粪便及环境拭子18份、黑颈??活动水域湖水样品3份，合计21份；家禽环节采样涉及疫区周边6个规模养鸡场和3个散养户，采集规模场样品60份、散养户20份（双拭子、血清平行样品），合计80份。
实验室检测
将上述101份样品送国家禽流感专业实验室（青岛）检测，其中血清样品检测H5亚型免疫抗体，拭子和水样检测H5N8亚型病原。
调查结果
疫点概况
基本信息 保护区位于我国候鸟迁徙的主要路线上，是候鸟栖息和迁徙中转地，水禽分布较为集中。保护区总面积108 km2，其中水域面积35 km2；50余种野禽于每年5—8月到此栖息和繁殖，以遗鸥和黑颈??居多，其中黑颈??种群达8 000余只。
气候环境 保护区海拔1 100 m左右，地处沙漠丘陵地带；大陆性气候显著，寒暑变化剧烈，气候干燥，灾害频繁，四季分明；冬季漫长寒冷，夏季短促，温差大；冬季少雨雪，夏季雨水集中，年际变率大；多西北风，无霜期短，日照丰富。
湖水水质 近年来，保护区附近煤矿开采加剧，使红碱淖水系进入煤矿采空区，从而导致水域面积减少。同时，在两条主要补水河流上游正在修建水库蓄水，从而加剧了红碱淖地表水资源量下降趋势。由于面积缩小，湖水含盐量提高，湖水pH在2011年为9.6，到2016年已升至9.8。
周边情况 保护区内未饲养家禽，周围只有两个镇涉及家禽养殖，分别为中鸡镇和尔林兔镇，共有规模场16个、散养户20余个，共存栏禽类12万羽，养殖场生物安全水平总体较差，养殖场户生物安全防护意识欠佳。
疫情发生情况
发病诊断过程 5月28日，保护区工作人员在湖畔发现黑颈??死亡（推测5月27日死亡）并报告主管部门，神木市畜牧业发展中心进行了初步诊断；6月4日，榆林市畜牧兽医服务中心初步判定为疑似H5亚型HPAI；6月5日，陕西省动物疫病预防控制中心复核，判定为疑似H5亚型HPAI，同时快报中国动物疫病预防控制中心；6月9日，经国家禽流感参考实验室确诊为H5N8亚型HPAI。
病例空间、时间分布 野禽栖息于广阔湖面，无法获知具体发病地点，其死亡后尸体大多被水流冲至湖畔，少数漂浮在湖面（图1）。以保护区工作人员发现并捡拾（打捞）死禽尸体的时间绘制流行曲线，5月28日首个病例被发现后1周内，每日死亡病例快速上升，1周后，6月4日死亡病例数量到达高峰，随后开始下降，4周后维持在较低的水平直至零报告（图2）。
实验室检测
家禽样品 80份双拭子、80份血清样品中，拭子样品均为H5N8亚型HPAIV核酸阴性，血清样品H5亚型免疫抗体合格率为98.75%（95%CL：93.23%~99.97%）。
野禽样品 18份新鲜粪便、环境（拭子）样品中，1份样品为H5N8亚型HPAIV核酸阳性，病原学阳性率为5.56%（95%CL：0.14%~27.29%）；3份湖水样品全部为H5N8亚型HPAIV核酸阴性。
病因推断
可能来源
家禽拭子样品均为HPAIV核酸阴性，血清样品H5亚型免疫抗体合格率较高，根据当地近年来禽流感病原学监测结果，均未发现当地有H5N8亚型HPAI流行，故基本排除疫情由家禽引起的可能。
保护区环境样品中仅有1份阳性，且其他鸟群未发现异常，推断HPAIV污染面不大，经本地留鸟传入引发疫情的可能性较小。
保护区位于我国候鸟迁徙的主要路线上。2020年以来，全球多个国家相继报道发生禽流感疫情1 277起，其中H5N8亚型占比最高，达83.09%；我国山西、山东等多地先后发生14起野禽HPAI疫情。黑颈??可能在迁徙途中接触病原，并将病原带入保护区。
发病原因
通过现场访谈及查阅资料得知：夏季是保护区旅游旺季，也是黑颈??迁徙季节，由低纬度地区飞往高纬度地区，从低海拔地区飞往高海拔地区，因而需要消耗大量能量；到达保护区后，遭遇5月中旬的极端降温天气，导致机体抵抗力下降，病原在体内迅速增殖，继而在繁殖行为、游客活动等多种应激因素作用下发病。
传播风险分析
野禽群间传播风险
HPAI主要通过接触和呼吸道传播，感染野禽及其分泌物、排泄物、气溶胶等，都可传播病原。发病黑颈??在湖面聚集性活动，以湖水中浮游生物为食，为同一风险群体，群内传播速度较快。然而黑颈??与其他鸟类活动区域相对独立，加之湖水碱性较强，病毒在水中存活时间较短，且未见其他鸟类异常死亡，推断疫病在野禽群间传播风险较低。
野禽向家禽扩散风险
H5N8亚型HPAI对多种家禽、野禽均易感，其传播性强、死亡率高。结合现场访谈和资料查阅情况，对保护区野禽疫情向周边家禽扩散开展定性风险评估（表1~2、图3）。根据评估结果判定野禽疫情释放风险为“低”，家禽暴露风险为“中等”，参照风险计算矩阵，估算本起野禽疫情向周边家禽扩散的风险为“很低”。
讨论
早期发现和果断处置对于降低疫情扩散风险至关重要2021年5月28日，疫情确认前，采取了边报告、边处置的应急处置策略，对死亡野禽及时进行无害化处理，严格执行消毒、疫情排查以及人员、车辆流动管控等措施。疫情确认后，神木市政府启动Ⅳ级应急响应，关停景区，发布封锁令，沿湖边200 m划定疫点，沿环湖路划定疫区，疫区周边5 km划定受威胁区；升级管控措施，加强临床巡查，对环境检测阳性点、病死禽打捞点、无害化处理点等重点区域加强消杀，严格限制疫点人员、车辆流动，直至疫区解封；迅速组织对疫区和受威胁区家禽开展紧急监测和强化免疫，强化临床巡查和异常报告措施，严格限制保护区周边散养、放养家禽，指导养殖场户落实防鸟、防鼠措施。上述措施有效防范了疫情的扩散蔓延。
野禽疫情处置需要多部门密切协作
本次疫情处置提示，野生动物疫情特别是人兽共患病疫情防控需要林草部门、农业农村部门和卫生健康部门通力协作、密切配合。林草部门及时开展野生动物病死情况监测排查、病死动物无害化处理和环境消毒等；农业农村部门以防止疫情向畜禽传播为目标，加强周边家养动物的排查、流行病学调查和监测工作，及时掌握防疫情况，做好免疫抗体监测，必要时及时开展紧急免疫，一旦发现家养畜禽大面积死亡，应按疫情报告要求做好科学处置；卫生健康部门聚焦相关高风险人群，做好医学隔离观察，及时发现并迅速处置人间疫情。
持续做好H5N8亚型HPAI监测
健全突发野禽异常情况监测、报告和预警体系，充分发挥基层林业站所、疫源疫病监测点、护林员及志愿者的作用，发现异常死亡情况时，及时做好现场调查、采样诊断、隔离消毒和无害化处理等工作；持续加强对保护区周边的巡查，特别是在候鸟迁徙季节，要提高家禽养殖场户监测频次，对免疫抗体不合格的及时强化免疫，如发现家禽异常死亡，要及时上报和诊断；密切监测家禽和野禽高致病性禽流感疫情动态，防止疫情向人间传播。
局限性
由于疫情发生地位于国家自然保护区，发病动物为国家保护野生动物，受疫情处置管辖权以及实验室条件制约，调查资料不够充分，未能进一步验证假设；流行病学调查介入时，疫点已反复消杀多次，加之为避免对野禽繁殖产生干扰，未能对野禽栖息的湖心岛全面采样，使野禽环境样品代表性不够，检测结果未能完全反映疫区病毒污染面；湖水的碱性环境不利于病毒存活，但未开展进一步的试验，以验证HPAIV在该湖水中的存活时间，故未能阐述碱性湖水是否真的阻断了疫病传播；调查时间仓促，获得信息有限，因不便捕捉其他活鸟采样检测，未能验证其他鸟类是否有隐性感染，也未能准确解释环境监测阳性是来自于发病的黑颈??，还是其他鸟类。
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