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用RT—PCR方法检测猪瘟病毒


现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2011/10/18 13:50:23 关注:436 评论: 我要投稿

新希望六和——生物环保饲料

    猪瘟(CSF)仍是当前规模化养猪场需要重要防范的传染病。对猪瘟进行净化的猪场仍需要使用猪瘟疫苗,而疫苗使用的效果需要检测抗原和抗体水平。然而,现有抗体检测方法无法区分免疫抗体和野毒抗体,在诊断上存在较大的误区,因而抗原检测最具有说服力。

    由于猪瘟兔化弱毒疫苗不会在猪体内存在持续性感染,所以只要避开疫苗注射时间一定期限(3周以上),疫苗的应用基本不会干扰猪瘟病毒(CSFV)抗原的检测结果。

    检测猪瘟病毒野毒的方法

    目前检测猪瘟病毒野毒的方法有很多,有病毒分离、直接荧光实验、酶标记免疫吸附测定法(ELI?SA)和RT-PCR(反转录PCR)等,其中病毒分离需要特殊的设备和专业技术,耗时长;而直接荧光实验主观性强,不易标化,对结果的阐释不易把握;细胞因子检测(ELISA)诊断试剂盒的敏感性、特异性相对较差;而RT-PCR方法可用于直接检测组织样品中的抗原,具有很高的特异性、敏感性和重复性,可以用于临床样品的准确诊断。但因其专业性强,需要贵重仪器,检测成本较高,难于大规模、高通量应用,近期将其在基层推广的可能性不大。但对于母猪猪瘟野毒感染较为严重的中小型猪场,若想获得较为理想的净化效果,RT-PCR不失为一种值得信赖的方法和一种潜在的应用技术,对预防和控制猪瘟将起到十分重要的作用。

    净化猪瘟应具备的条件

    从稳定猪场生产、提高效益的角度考虑,在部分猪场,尤其是种猪场净化猪瘟是切实可行的措施。而净化猪瘟除了必须具备特异、敏感的猪瘟抗原检测技术,还必须具有以下条件:一是便利的活体采样技术。由于带毒种猪是猪场猪瘟病毒持续存在的根本原因,因此对种猪采取“检测与淘汰”的策略可以从源头上对猪瘟进行净化。目前,国内已有专用的猪扁桃体活体采样机械,可以非常便利地对种猪进行活体采样。二是免疫合格的猪瘟疫苗。猪瘟兔化弱毒疫苗的应用实践表明,现有疫苗的毒株(C株)对于毒力不同的野毒仍然具有坚强的保护力,也就是说,不用怀疑疫苗毒株的效力。但是高效的疫苗毒株并不代表有效的疫苗。需要指出的是,对免疫猪群仍然发生猪瘟的原因要进行具体分析,种猪带毒和仔猪先天性感染是重要的原因。另外不同厂家的疫苗在生产过程中,毒价可能存在一定的差异,且疫苗在运输、保存、使用的过程中,措施不当会对疫苗的效果产生影响。免疫程序不合理也是重要因素,如母源抗体的干扰。鉴于目前猪瘟的流行现状,对猪瘟进行净化的猪场仍然需要使用猪瘟疫苗,合格高效的猪瘟兔化弱毒疫苗对于净化猪群可提供有力的保护作用。

    规模化猪场应充分认识猪瘟流行的新特点,更新观念,着眼于猪场的长期发展,重点抓好种群的净化,通过对种群2次~3次的净化,对每批后备猪进行检测,将显著降低种猪群的阳性率,从根本上控制猪瘟疫情。同时要充分认识到,猪瘟的防治是一项系统性的综合工程,猪场应在引种时选择健康水平好的种猪场作为引种场,并且采取严格的生物安全措施,控制人员、车辆、器械、治疗工具的机械传播,加强消毒工作。要采用优质高效的猪瘟疫苗,定期监测猪瘟抗体水平,通过定期的监测,建立适合本场的免疫程序并严格执行。规模化猪场还应该建立定期的流行病学监测机制,及时了解猪群疫病潜伏感染情况。在进行猪瘟净化的同时还要加强对伪狂犬病(PRVS)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)以及猪圆环病毒2型(PCV-2)等其他危害严重疫病的防治,条件允许时,可以对多种疫病同时净化,可有效地提高生产效益。       

文章编辑:现代畜牧网     
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