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猪伪狂犬病新疫苗——ST伪狂犬活疫苗的研究概况
现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2018/9/29 17:23:26 关注：463 评论： 我要投稿
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猪伪狂犬病活疫苗（Bartha-K61株，传代细胞源）研究概况伪狂犬病（Pseudorabie，PR）是由伪狂犬病病毒（PRV）引起的一种急性烈性传染病，宿主范围广泛，可感染猪、牛、羊和野生动物等。PRV有极强的免疫逃逸能力，能造成免疫系统损害，且易继发其他疾病，严重威胁养殖业，每年给养殖业带来巨大的经济损失。
目前伪狂犬病疫苗毒株在我国应用最多的是伪狂犬病病毒Bartha-K61株，该毒株呈现gE基因缺失表型，其毒力大大减弱，免疫原性好，是世界上公认的优良疫苗株。随着疫苗的普及和使用，猪伪狂犬病得到有效的控制，但2011年以来，我国多地相继报道了由变异株引发的猪伪狂犬病疫情，变异株对猪的致病力和在猪只之间的传播力明显增强，虽然与经典株基因型不同，但其血清型没有发生改变，所以从理论上讲经典株的疫苗仍能对变异株产生有效保护。王继春等的研究表明Bartha-K61疫苗（106.8TCID50/头份）免疫猪后对PRV变异株的攻击具有良好的保护效果，并且增加Bartha K61株的接种次数可提供更坚强更持久的保护。在周金柱等的研究中显示，应用Bartha-K61疫苗（106.3TCID50头份），无论是一次免疫还是二次免疫都能很好地抵抗 PRV 经典强毒和野毒株的攻击，而二次免疫后猪只有更好的增重情况。
此外，PR病防控中导致免疫失败的原因很多，比如猪场本身存在免疫抑制性病原（如PCV2、PRRSV等）感染、低质量疫苗的使用与不合理的免疫程序等都会影响伪狂犬病疫苗的免疫效果。
通过对市场PR疫苗的分析发现，目前市面上在售的Bartha-K61疫苗中，每头份病毒含量从5000TCID50到2000000 TCID50，而且我们在临床上也发现养猪业者反映使用高抗原含量的疫苗免疫接种后，猪场的疫情得到了有效控制，因此，提高疫苗质量对控制PR的发生和流行有很好的作用。
我国目前生产该疫苗所用的细胞为鸡胚成纤维原代细胞，不但工作量大，费时，而且生产成本高。由于鸡胚批间差异的原因，利用鸡胚成纤维原代细胞生产猪伪狂犬病活疫苗，不但病毒滴度低，而且批间差异大，产品质量不稳定，严重影响了猪伪狂犬病活疫苗的免疫效果。为了解决鸡胚成纤维原代细胞生产伪狂犬病活疫苗存在的突出问题，广东永顺生物制药股份有限公司开展了用传代细胞系生产猪伪狂犬病活疫苗的研究。经过近几年的研究，取得了突破性进展，并于2018年7月获得新兽药证书。
猪伪狂犬病活疫苗（Bartha-K61株，传代细胞源）选择了一种对猪等动物安全、适宜于PRV Bartha-K61株增殖的传代细胞系。将ST细胞系感染裸鼠，观察近120d，没有发现致瘤现象，也没有观察到组织病理变化；将该细胞连传30代，染色体没有变化，证明该细胞系对猪是安全的。并且ST细胞系可建立细胞库，并经严格检验，细胞来源清晰、无污染，生产工艺稳定，批间差异小，质量容易控制。PRV Bartha-K61株在该细胞中能实现高滴度增殖，半成品每毫升病毒含量≥108.0TCID50，是用鸡胚成纤维细胞生产的伪狂犬病活疫苗半成品病毒含量100倍以上，成品每头份病毒含量≥106.5TCID50，远远高于伪狂犬病活疫苗每头份病毒含量≥5000TCID50（约为103.7TCID50）的国家标准，是用鸡胚成纤维细胞生产的伪狂犬病活疫苗病毒含量的600倍。
Bartha-K61株由于基因缺失而进一步阻断弱毒株回复毒力的可能性，所以大大提高了这种弱毒苗的安全性。猪伪狂犬病活疫苗（Bartha-K61株，传代细胞源）具有良好的安全性，无论是采取一次单剂量、单剂量重复及超剂量（10头份/头）分别接种不同日龄的仔猪和妊娠后期母猪，所有免疫猪均没有任何局部和全身不良反应，妊娠母猪所产仔猪全部健康存活。
Bartha-K61株的基因缺失能够有效降低PRV的神经致病力，但免疫原性好，能够产生均衡的细胞免疫和体液免疫，保护时间长。免疫效力检验结果显示，以103.0TCID50/ml的剂量免疫健康易感猪，免疫后7日进行强毒攻击保护率为100%。实验室以单剂量免疫仔猪，第3d便开始产生部分免疫保护，免后5d可提供100%（5/5）保护；20~25日龄后备母猪免疫后14个月对母猪和仔猪仍产生保护。按照农业部的临床试验批复，将猪伪狂犬病活疫苗（Bartha-K61株，传代细胞源）在6个猪场分别按照指定程序进行免疫，结果表明疫苗对各种品种、各种日龄的猪均安全有效，可大幅度提高免疫猪的抗体水平，能产生很好的免疫保护力。
猪伪狂犬病活疫苗（Bartha-K61株，传代细胞源）是属于自然基因缺失疫苗，可以用伪狂犬抗体鉴别诊断试剂盒准确区分野毒株抗体与疫苗激活的抗体，有良好的免疫原性和鉴别标记特性，可用于疫苗免疫动物与自然感染动物的鉴别诊断，有利于伪狂犬病的防控和净化。
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| 文章来源：黄秋雪 文章编辑：一米优讯 |
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