众多试验证明,噪声应激会导致动物正常生理状态和代谢的改变,并且对肉品质指标有一定的影响。维生素E具有抗应激的作用,它可清除机体内活性氧及活性氮自由基,提高机体的抗氧化能力,保护机体免受氧化损伤,维持生物体正常代谢和生理功能。李俊杰等报道维生素C、维生素E能缓解鸡的热应激,但是抗应激添加剂维生素E能否缓解噪声所产生应激,目前尚未见有报道。本试验拟通过在北京鸭饲料中添加抗应激添加剂维生素E,探讨维生素E对缓解北京鸭噪声应激后血液应激指标、肉品质及hsps mRNA转录水平的影响。对于指导肉鸭养殖和屠宰加工业具有一定的实践价值。
1.材料与方法
1.1 试验设计和饲养管理
将60只1日龄瘦肉型北京鸭进行统一饲养管理,到2周龄时随机分成3个处理,即组I(空白组)、组II(对照组,不添加维生素E)、组III(维生素E组,饲料中添加200 mg/kg维生素E),每个处理设5个重复,每个重复4只鸭。42日龄时对组Ⅱ、组III的肉鸭进行应激,噪声应激前不禁食禁水。
1.2 样品制备
运输结束后,鸭左侧颈动脉放血,收集血液3.5 mL,轻微混匀,2 000 r/min离心10min分离血清,分装后于-20℃保存,用于测定血液指标,同时采集左侧完整胸肌,用于肉品质测定。采集肝脏、脾脏、肺和肾脏等组织于液氮中冷冻,置于超低温冰箱保存备用。
1.3 测定指标
1.3.1 血液应激指标
三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、胰岛素(INS)、谷丙转氨酶(ALT)、肌酸激酶(CK)、谷草转氨酶(AST)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)。
1.3.2 肌肉品质指标
pH值、蛋白含量、水分含量、脂肪含量、脂肪氧化、蛋白质氧化。
1.3.3 hsps mRNA转录水平测定
1.4 统计分析
本试验所有检测指标的数据,用Excel 软件进行整理,然后使用SPSS16.0单因素方差统计分析软件进行统计分析,结果用平均值±标准差表示,并进行多重比较(LSD法)。
2.结果
2.1 噪声应激及维生素E对北京鸭血液指标的影响
由表1可以看出,宰前100 db的噪声应激20 min后,T3、T4浓度极显著低于空白组(P<0.01),并且噪声应激后对照组北京鸭血清中的ALT、CK、AST和GSH-Px浓度都极显著高于空白组(P<0.01)。与对照组相比,饲料中添加维生素E后,北京鸭体内T3、T4浓度极显著上升(P<0.01);并且饲料中添加维生素E的试验组北京鸭血清中ALT、CK、AST和GSH-Px浓度显著低于对照组(P<0.05),且与空白组差异不显著(P>0.05)。
2.2 噪声应激及维生素E对北京鸭肉品质的影响
由表2可知,噪声应激后北京鸭肌肉的水分和脂肪含量与空白组相比差异不显著(P>0.05)。经噪声应激后组II北京鸭胸肌的pH值极显著低于空白组(P<0.01);并且经噪声应激后北京鸭胸肌蛋白质羰基和MDA含量极显著增加(P<0.01)。在饲料中添加维生素E的试验组北京鸭胸肌的pH值极显著大于对照组(P<0.01),且与空白组差异不显著(P>0.05)。在饲料中添加维生素E的试验组北京鸭胸肌蛋白质羰基和MDA含量极显著小于对照组(P<0.01),并且蛋白质羰基含量与空白组差异不显著(P>0.05)。
2.3 噪声应激及维生素E对北京鸭组织hsp70 mRNA转录水平的影响
100 db噪声应激组北京鸭肝脏、脾脏、肺和肾脏4个组织中hsp70mRNA的转录水平都要极显著高于空白组(P<0.01)。饲料中添加维生素E试验组的北京鸭肝脏、脾脏和肺3个组织中hsp70mRNA转录水平要极显著低于对照组(P<0.01),并且与空白组差异显著(P<0.05);而饲料中添加维生素E试验组的北京鸭肾脏中hsp70mRNA转录水平与空白组和对照组差异均极显著(P<0.01)。
2.4 噪声应激及维生素E对北京鸭组织hsp90 mRNA转录水平的影响
噪声应激后北京鸭肝脏、脾脏、肺和肾脏4个组织中hsp90mRNA转录水平要极显著高于空白组(P<0.01)。饲料中添加维生素E试验组的北京鸭肝脏、脾脏、肺和肾脏4个组织中hsp90mRNA转录水平要极显著低于对照组(P<0.01),且与空白组差异极显著(P<0.01)。
3.讨论
3.1 声应激及维生素E对北京鸭血液指标及肉质的影响
本研究结果显示,噪声使得北京鸭血清中CK水平和AST水平都上升,这说明噪声应激对机体组织有一定程度的损伤。长时间暴露在稳态噪声中可能会导致禽类逐渐适应,而本试验中急性的噪声水平的变化则会导致北京鸭强烈的应激反应。本试验中噪声应激组胰岛素水平均显著低于对照组。
本试验中,对照组北京鸭胸肌脂肪氧化产物丙二醛和蛋白质氧化产物羰基化合物含量有显著上升。MDA 能引起细胞代谢及功能障碍,间接反映机体的损伤程度。应激过程中,北京鸭肌肉中产生的活性氧供给肌肉组织中的不饱和脂肪酸,引发脂质氧化物的大量产生,同时活性氧和脂质过氧化自由基选择性攻击氨基酸残基的一侧肽链并导致一些氨基酸残基转变为羰基化合物,导致蛋白质的氧化损伤加剧。维生素E可清除机体内活性氧及活性氮自由基,提高机体抗氧化能力,保护机体免受氧化损伤,维持生物体正常代谢和生理功能。
3.2 噪声应激及维生素E对北京鸭组织的hsps mRNA转录水平的影响
本研究发现,在噪声应激后,对照组北京鸭肝脏、脾脏、肺和肾脏4个组织中hsps mRNA转录水平均极显著升高。在噪声应激过程中,产生的应激作用于机体,HSF被激活后构型改变形成三聚体,然后与HSE结合,启动热休克基因的转录,从而保护组织细胞免受伤害,HSPs蛋白在此时会有较高的表达,而hsps mRNA转录水平的增加是HSPs表达的基础,因此噪声应激后hsp70和hsp90 mRNA的转录水平极显著增加。而添加维生素E试验组的4个组织中hsp70 mRNA、hsp90 mRNA转录水平要极显著低于对照组,表明由于维生素E的抗氧化作用提高了北京鸭自身的抵抗能力,机体无需启动HSPs蛋白调控,因此hsps mRNA的转录水平极显著低于对照组。
综上分析,维生素E能够有效的缓解宰前急性噪声应激带来的不利影响,在规模化饲养中可以根据不同情况来添加。
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