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隐形杀手—猪伪狂犬病


现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2018/9/4 21:50:00 关注:568 评论: 我要投稿

新希望六和——生物环保饲料

  猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus, PRV)引起的一种急性传染病,被列为二类动物疫病。其病原体为疱疹病毒科的猪疱疹病毒I型病毒,脑脊髓组织中含量较多。
  该病毒感染极广,报道有近35种动物可以被感染,病毒在自然界不断循环,是典型的自然疫源性疾病,也是极难预防治疗的传染病之一。猪是感染该病毒且不容易致死的宿主,所以也是该病毒的主要储存体,也最易感。猪感染伪狂犬病后,随着猪的日龄的增长,死亡率明显下降,成年猪轻微发病,但极少死亡,一般也不容易引起重视。本病一年四季,以冬春和产仔旺季多发。
  伪狂犬病毒


  伪狂犬病毒(Pseudorabies virus, PRV)属于疱疹科病毒,其空间结构为二十面体结构,遗传物质为双链DNA,约150kb。病毒包膜表面有大量的糖蛋白纤突。伪狂犬病毒含有30种以上病毒编码的结构蛋白,参与构成PRV4种形态成分:里层的核蛋白、二十面体结构的衣壳、病毒糖蛋白、脂质囊膜以及位于衣壳和囊膜之间的间质蛋白层。其中糖蛋白是其致病性的主要因素,如gE、gA和gB等等,它们具有很强的抗原性,如果编码某些糖蛋白的基因缺失会导致病毒毒力减弱或者丧失,人们也是根据这个特性,可生产出不同的基因缺失型疫苗。
  疱疹病毒在自然界中分布十分广泛,疱疹科病毒主要分为3个亚科,分类主要是依据其遗传物质的大小以及复制扩增的速度等。伪狂犬病毒属于疱疹科病毒I型,DNA分子量大,扩增速度慢。结构示意图如图1。
  伪狂犬病毒可引起高度接触性传染病,猪是该病毒的主要携带者和储存者,与其他动物相比之下,猪对该病毒具有其特殊的反应,它可在猪的神经细胞中呈隐性状态:此时病毒基因组绝大多数基因未被转录表达,仅有一小段序列转录表达,即隐性状态相关转录物(latency associated transcript, LAT),但该片段却没有翻译产物,推测可能是转录后的RNA抑制病毒基因组的表达。
  病毒基因组以附加体的形式存在细胞核内的神经细胞基因组中。带有伪狂犬病毒的神经元,其正常生理功能大多数情况下仍能正常完成,然而,隐性病毒可在一定条件下被激活,进而复制扩增。PRV这种特性具有重要研究意义且一旦疫病发生,PRV很难进行根除,可给养殖业造成巨大的经济损失。
  伪狂犬病毒是疱疹病毒科中抵抗力相对较强的,暴露37℃中,半衰期为7小时左右;低温下(8℃)存活46天,25℃干草、树枝、食物等,可存活20天左右;病毒适应的pH值为pH4~9,5%石炭酸处理2min或者 1% NaOH处理,可以迅速使其灭活;该病毒也对脂溶剂(乙醚、氯仿等)以及福尔马林和紫外线照射敏感。
  2011年底起,我国猪伪狂犬病野毒阳性率急剧上升。很多证据显示, 2011年新流行毒株发生变异,是导致伪狂犬病爆发的根本原因。关于 PRV新流行毒株变异主要存有 3 种观点:毒力增强说、抗原变异说以及毒力增强兼抗原变异说。由于毒株的变异,也导致现在很多经典的伪狂犬疫苗保护性大大下降。
  Ye 等用高通量测序的方法获得PRV新流行毒株 PRV-HeN1 株与 PRV-JS 株的全基因组序列,然后与 4 株 PRV 分离株(Kaplan、Becker、Bartha 和 TJ 株) 以及 729 个PRV 基因片段进行进化树分析比对,首次表明 PRV分离株可分为 2 个基因型,中国新流行毒株属于基因Ⅱ型,其他 PRV 毒株(如欧美分离株)属于基因Ⅰ型。这一发现也解释了为什么 Bartha-K61疫苗(Ⅰ型)对中国新流行毒株(Ⅱ型)缺乏有效保护。
  伪狂犬病毒感染过程概述
  猪感染伪狂犬病毒后,首先在鼻咽、扁桃体等器官扩增,然后再经嗅神经、吞咽神经或三叉神经转移到脑和脊髓,进而定殖;病毒还可从鼻黏膜经呼吸道转移到肺泡。PRV感染未断奶仔猪后,病毒初始在口咽部和呼吸道组织内复制,再经神经纤维到达中枢神经系统,随后也会出现病毒血症引起肝、脾等内脏器官病变;由于新生仔猪神经系统发育不完全,很快由病毒入侵而导致因神经系统功能紊乱而死亡,由于整个发病到死亡过程快,其表现出的典型病理症状不易被观察;在较大年龄的猪,如育肥猪和肥猪,病毒在最初增殖部位常引起病变,如扁桃体坏死、肺炎等,即使在这种较老年龄的猪,病毒也常经神经纤维或随血液循环到达中枢神经系统,从而可能出现神经症状。
  猪伪狂犬病临床症状
  并非所有的猪,感染猪伪狂犬病毒就能发病,这主要取决于感染病毒的毒力和感染量以及感染猪的年龄。其中,感染猪的年龄是最主要的。疱疹病毒科感染不同动物后,很多症状都相似,幼龄动物感染病毒后病情最为严重。
  新生仔猪感染伪狂犬病毒后,会引起大量的死亡,临诊上新生仔猪第1天无法观测出病变,第2天仔猪开始发病,3~5天是死亡的高峰期,仔猪甚至成窝死亡,同时,发病仔猪表现出明显的神经症状、昏睡、鸣叫及拉稀等等。一旦发病, 2日内死亡。剖检主要表现为肾脏布满针尖样出血点;经常伴随着肺水肿、大脑脑膜表面充血肿胀甚至出血。
  15日龄以内的仔猪感染本病严重时,死亡率可达100%。仔猪发病突然体温飙升至41℃以上、精神萎靡、不断发抖,运动极其不协调。也可会出现痉挛、呕吐以及腹泻等等,极少能够康复。断奶仔猪感染伪狂犬病毒后,发病率和死亡率均在20%~40%左右,主要表现为神经症状、拉稀以及呕吐等。
  成年猪一般为隐性感染,轻微症状,表现不明显,易于恢复。主要表现为体温升高、精神不振,有些病猪会出现呕吐、咳嗽,经处理后,通常一周内完全恢复。也有报道变异伪狂犬毒株会导致育肥猪的死亡率升高,主要是引起100-120日龄育肥猪的传染性胸膜肺炎发病率升高,高烧、咳喘增加。此外,公猪感染伪狂犬病毒后,也可能会导致睾丸肿胀、萎缩,丧失育种能力。
  伪狂犬抗体检测分析原则
  1) 确定猪场的规模:进而确定抽检的样本数,这样更能清楚准确反映猪场真实的情况。
  2) 确定待检测猪的日龄:一般情况下,刚出生的猪从猪乳(主要是初乳)中获取抗体(哺乳21天左右),断奶后2周内急剧下降,伪狂犬的母源抗体可持续90~120天。在分析抗体检测报告时,应考虑猪日龄,进而分辨抗体的来源。
  3) 猪场免疫程序:获得猪场免疫程序后,再结合抗体检测结果进行分析,一是能评判该免疫程序的效率,进而优化;另一方面也能确定猪场感染情况,重新制定免疫程序。
  4) 猪的类别:确定待检测样品的类别,如仔猪、育肥猪、种猪等等,结合检测结果做出不同的处理方法。
  案例分析
  2018年7月9号信得猪病检测中心对某猪场(500头)送检的28头(根据统计学检样原则,应采105头,可信度95%)70日龄仔猪血清进行伪狂犬gE抗体检测。其免疫程序为1日龄滴鼻,6周龄肌肉注射伪狂犬gE基因抗体缺失疫苗,70日龄采血送检。
  结果如图5所示,伪狂犬gE抗体检测出阳性,且阳性率为50%,表明可能存在野毒感染。由于只做了一次70日龄检测,无法分辨抗体的来源,因为导致这种情况可能出现两种情况,第一:该猪场存在野生伪狂犬病毒感染;第二:母源抗体。
  综上,该猪场存在着伪狂犬病毒的压力并且具有爆发的风险,须采取措施预防或者净化猪场。
  检测中心又对该猪场提供的病变组织,肺脏、肾脏以及扁桃体进行病原检测。剪取少量的病变组织,研磨粗提取DNA,再过柱洗涤纯化DNA,对病毒的基因组进行扩增,点样顺序为样品(sample)、阴性对照(negative control, Nc)以及阳性对照(positive control, Pc)。检测结果显示,在样品泳道中,检测出伪狂犬阳性。综合gE抗体检测的结果,该猪场存在着伪狂犬病毒。须采取措施控制疫病,以防止猪场更大的损失。
  猪伪狂犬病预防手段及治疗方法
  由于伪狂犬病毒可潜伏在神经节内,逃避免疫攻击,所以带毒猪可持久释放出伪狂犬病毒,进而可引起新的感染。
  1 PRV防疫思路
  1)对仔猪断奶后进行隔离饲养。
  2)有计划地进行抗体监测,以便及时调整免疫程序。
  3)及时淘汰带野毒的种猪,同时后备猪的引进需认真把关。
  4)普通猪场仔猪于3日龄内滴鼻接种弱毒疫苗,通过竞争性占位来阻止野毒感染,后期再不断加强免疫。
  2 防治办法
  1)病毒与免疫二者之间的关系是随着不同环境不断变化的,可以通过多次接种疫苗,建立绝对的免疫保护力。对仔猪应至少接种两次疫苗。
  2)一旦检测出病原,可对猪场进行弱毒苗紧急免疫。
  3)已感染猪,接种疫苗可以起到减少病毒的排出量,但无法根除,这也是控制PRV最大的障碍。目前较科学办法可为种猪建立比较详细的档案,尽可能淘汰或加速淘汰带毒种猪,同时配合科学免疫。
  4)如果带毒猪免疫低下时,可再度出现病毒扩增变得活跃,进而继续传染给其它猪。不仅仅是伪狂犬病,其他传染病也可能在群体免疫低下时再度复活。因而需要做好猪场整体免疫,如控制好猪瘟病毒、圆环病毒和伪狂犬病毒等几种关键传染病毒,保持群体健康的免疫状态。
  结束语
  净化伪狂犬病毒是一个漫长的过程,正因为如此,更应该加强对其的预防以及更加科学的净化治疗的措施,而后使猪场更健康的发展,带来更多的经济价值。
  主要参考文献
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文章作者:检测中心孟春雨     文章编辑:一米优讯     
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